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目 录 1

第一章显微镜 1

一、显微镜的构造 1

1．显微镜的机械装置 1

2．显微镜的光学系统 3

二、显微镜的放大倍数和分辨力 5

三、显微镜的使用方法 7

1．选择良好的光源 7

2．用低倍镜调好光照 8

3．低倍接物镜观察 8

5．油浸接物镜观察 9

4．高倍接物镜观察 9

第二章培养基的制备与灭菌 10

一、概述 10

二、培养基的制备 13

1．培养基制备的一般过程 13

2．几种常用培养基的制备 14

三、培养基的灭菌 16

1．高压蒸汽灭菌法 16

2．间歇蒸汽灭菌法 18

3．滤过灭菌法 20

第三章微生物形态观察 22

一、染色剂简述 22

1．细菌的简单染色法 23

二、细菌形态观察 23

2．细菌的芽孢染色法 25

3．细菌的荚膜染色法 26

4．细菌的革兰氏染色法 27

5．细菌的鞭毛染色法 28

6．细菌的抗酸性染色法 30

7．细菌细胞中异染颗粒染色法 30

8．细菌细胞中脂肪粒染色法 31

9．苏云金芽孢杆菌伴孢晶体染色法 32

10．细菌运动观察法 32

三、放线菌形态观察 33

1．印片观察法 33

3．玻片培养法 34

2．直接显微镜观察 34

4．赛璐玢培养及染色法 36

四、霉菌形态观察 36

1．霉菌菌丝水浸片观察 36

2．洗脱孢子观察担子梗形态法 37

3．悬滴培养法 37

4．玻片培养法 38

5．染色法鉴别死活孢子 39

五、微生物大小测量 39

1．直接用融化的琼脂培养基稀释分离 43

二、微生物的稀释平板分离法 43

一、概述 43

第四章微生物的分离和纯化 43

2．用无菌水稀释分离 45

三、划线分离法 45

四、单细胞分离法 47

1．细菌的单细胞分离 47

2．真菌的单孢子分离 47

五、土壤微生物分离法 48

1．固氮菌的分离 48

2．根瘤菌的分离 49

3．磷细菌的分离 51

4．硅酸盐细菌的分离 52

5．硝化细菌的富集和分离 53

6．纤维分解微生物的分离 55

六、杀虫微生物分离法 58

1．杀虫细菌的分离 58

2．杀虫真菌的分离 59

〔附〕：昆虫病毒多角体的观察 60

七、植物病原菌分离法 61

1．植物病原细菌的分离 61

2．植物病原真菌的分离 62

八、抗生性放线菌分离法 63

4．真菌受真菌污染的纯化方法 67

3．真菌受细菌污染的纯化方法 67

1．细菌受细菌污染的纯化方法 67

2．细菌受真菌污染的纯化方法 67

九、菌株的纯化 67

第五章微生物的计数法 69

一、直接显微镜计数法 69

1．利用血球计数板计算微生物 69

2．利用目镜计数网计算微生物 71

3．利用视野面积与涂片面积之比估算微生物 71

二、平板培养法计算活菌数 72

三、液体稀释法计数 74

四、利用标准比浊管测定菌数 77

五、利用光电比色计测算菌数 78

六、土壤中各类型微生物数量测定法 81

1．土壤好气性细菌的测数 81

2．土壤真菌测数 81

3．土壤放线菌测数 82

4．土壤中氨化作用细菌测数 82

5．土壤中固氮细菌的测数 82

6．土壤中无机磷细菌的测数 83

7．土壤中有机磷细菌的测数 83

8．土壤中硝化细菌的测数 83

9．土壤中反硝化细菌的测数 84

七、根瘤菌肥料含菌数测定 85

10．土壤中好气性纤维分解菌的测数 85

第六章微生物培养特征的鉴定 86

一、平板培养特征的鉴定 86

二、斜面培养特征的鉴定 90

三、半固体穿刺培养特征的鉴定 91

四、液体培养特征的鉴定 92

第七章细菌的生理生化常规鉴定法 95

一、微生物的碳源测定 95

二、微生物的氮源测定 96

三、糖类发酵试验 96

四、淀粉水解试验 98

五、乙酰甲基甲醇试验（V.P试验） 98

六、甲基红试验（M.R试验） 100

七、明胶水解试验 101

1．穿刺法 101

2．平板培养法 102

八、硝酸盐还原试验 102

九、产氨试验 105

十、产硫化氢试验 106

十一、产吲哚试验 107

十二、石蕊牛乳试验 108

十三、七叶林水解试验 109

1．斐林氏法测定还原糖含量 111

一、发酵液中糖量的测定 111

要成分检验法 111

第八章微生物发酵液和菌体主 111

2．碘量法测定还原糖含量 113

3．蒽酮法测定含糖量 116

4．总糖的测定 119

二、蛋白质的测定 119

1．简易定氮法 119

2．微量凯氏定氮法 121

三、氨基氮的测定 124

四、脂肪的测定 126

1．发酵液中脂肪的测定 126

2．菌体中脂肪的测定 127

五、总磷的测定 128

六、核酸和其他含磷化合物测定 130

1．核酸和其他含磷化合物的提取 130

2．核糖核酸的测定 132

3．脱氧核糖核酸的测定 133

七、无机磷的测定 133

八、亚硝酸盐的测定 134

九、丙酮酸的测定 135

十、柠檬酸的测定 136

一、氧化酶的测定 138

1．Kavacs测定法 138

第九章微生物酶的测定 138

2．细胞色素氧化酶测定 139

二、接触酶（过氧化氢酶）测定 140

三、尿素酶测定 140

四、酯酶测定 141

五、色氨酸酶测定（产吲哚测定） 142

六、氨基酸氧化酶的测定 142

七、糖苷水解酶的测定 143

八、脱氧核糖核酸酶的测定 144

九、酸性磷酸酯酶和碱性磷酸酯酶的测定 144

十、芳香基硫酸酯酶测定 145

十一、肽酶测定 146

十二、淀粉酶测定 147

十三、纤维素酶，吉丁质酶测定 147

第十章微生物的血清学鉴定法 148

一、抗血清的制备 148

1．抗原制备 148

2．免疫 149

3．采血和制备抗血清 150

4．抗体吸收 150

二、凝集反应 151

1．试管凝集试验 151

2．载玻片凝集试验 153

三、沉淀试验 154

第十一章微生物的选种和菌种保藏 156

一、微生物的选种 156

1．从自然界选种 156

2．从已有菌株中选种 156

3．人工诱变选种 156

3．营养缺陷型的筛选方法 166

二、菌种保藏 172

1．斜面保藏法 172

2．矿油保藏法（即石腊油保藏法） 173

3．砂土管保藏法 173

5．冰冻真空干燥保藏法 174

4．固体曲保藏法 174

三、菌种的复壮 176

1．原菌种管中分离 176

2．通过寄主复壮 177

3．改变培养条件 177

4．利用低温处理进行复壮 178

附录： 180

一几种主要染色剂的配制方法 180

二常见元素的原子量表 184

三常用酸碱溶液的浓度 184

四实验室常用溶液的配制 185

五几种缓冲液的配制 185

六pH指示剂的配制 188