第一章 免疫球蛋白与B细胞分化 1
一、免疫球蛋白超基因家族 1
二、免疫球蛋白的结构 9
三、B淋巴细胞和浆细胞的分化 13
第二章 免疫球蛋白合成的遗传学：免疫球蛋白基因重排 16
一、免疫球蛋白合成的早期理论 16
二、人类k轻链基因 18
三、人类λ轻链基因 19
四、重链VH基因的组装 21
第三章 免疫球蛋白可变区片段的重排机制 24
一、作为重排信号的DNA序列 24
二、抗体多样性发生的遗传机制 26
三、免疫球蛋白基因的激活次序 28
四、重链恒区基因顺序和类型的转换 29
五、组织特异性强化子促进免疫球蛋白基因的转录 31
二、B细胞表面免疫球蛋白受体 34
一、参与B细胞对特异抗原反应的成分 34
第四章 B淋巴细胞的膜转移信号 34
三、B细胞的Fc受体(FcγR) 37
四、淋巴因子受体 37
五、与Ⅱ类MHC抗原的关系 38
六、补体受体 38
第五章 T细胞抗原受体 42
一、T细胞分化与表型 42
二、T细胞受体的结构 50
三、T细胞受体基因的组成 52
四、胸腺细胞中的T细胞受体基因变化 52
五、T细胞受体多样性的发生 53
六、TCRγ/δ受体的作用 56
第六章 人类TCRγ和δ基因及抗TCRγ/δ单克隆抗体 60
一、抗TCRγ/δ单克隆抗体的意义 60
二、TCRγ/δ基因和蛋白 60
三、抗TCRγ/δ的单克隆抗体种类 63
四、TCRγ/δ阳性淋巴细胞的功能和识别性 64
五、病理状态的免疫表型研究 65
第七章 MHC的分子遗传学 67
一、主要组织相容复合物(MHC) 67
二、MHC的遗传学结构 68
三、基因和假基因 70
四、Ⅱ类MHC抗原的功能 70
五、T细胞与MHC抗原反应 71
六、MCH的限制性 71
第八章 抗原特异性T细胞辅助和抑制因子 75
一、抗原特异性T细胞辅助因子和抑制因子的结构 75
二、细胞免疫反应必须依赖辅助和抑制因子 75
三、细胞接触和可溶性因子 76
三、抗原特异性因子的激活 77
四、遗传限制性的意义 77
第九章 干扰素 81
一、干扰素的命名及生化概要 81
二、干扰素的产生 82
三、干扰素的作用 83
第十章 淋巴因子与白介素 87
一、淋巴因子的名称 87
二、淋巴因子的生物学特征 89
三、淋巴因子与白介素的作用 90
第十一章 淋巴系统肿瘤的基因重排和易位 93
一、单克隆抗体和基因探针 93
二、免疫球蛋白和T细胞受体基因 96
三、淋巴系统肿瘤的基因分析 97
四、单克隆性是否意味着肿瘤 99
五、同时有TCR和Ig基因重排的淋巴细胞 100
六、淋巴恶性疾病的TCR和Ig基因易位 103
七、基因重排和易位研究的远景 106
第十二章 淋巴系统肿瘤染色体易位的分子机制 111
一、淋巴恶性疾病的染色体重排 111
二、c-myc原癌基因 112
三、断裂点分子学 115
四、免疫球蛋白基因位点的作用 118
五、重排的c-myc原癌基因失控 118
六、重排的c-myc原癌基因调节机制 119
七、体细胞杂交后重排c-myc基因的表达 121
八、Burkitt淋巴瘤和肿瘤发生的多阶段性 122
第十三章 免疫缺陷病的分子分析 125
一、免疫球蛋白重链病的分子分析 125
二、遗传性免疫缺陷病的TCR和Ig重排 126
第十四章 淋巴恶性肿瘤的基因诊断 129
一、白血病的诊断 129
二、Southern blot技术分析淋巴细胞白血病基因重排 130
三、T细胞受体基因(TCRαβγδ)检测恶性细胞克隆 131
四、基因分析加免疫选择法检测残留白血病细胞 132
五、PCR基因扩增法检测残留恶性细胞克隆 133
六、PCR检测染色体易位者的嵌合基因 133
七、PCR基因扩增TCRγ和TCRδ检测残留白血病 134
八、PCR扩增Ig的CDR3区基因检测残留B细胞白血病 135
第十五章 PCR体外基因扩增 140
一、PCR技术的原理 140
二、PCR基因扩增法的应用 143
三、PCR获得双链DNA序列作为分子探针 144
四、扩增DNA片段制备针对尚未克隆的基因的探针 145
五、从微量的mRNA中产生cDNA文库 147
六、PCR用于序列分析 147
七、突变分析 149
八、染色体步移(反向PCR) 150
九、彩色PCR 151
第十六章 分析B细胞肿瘤基因标志的PCR引物设计 153
一、利用编码Ig CDR的基因作肿瘤标志 153
二、免疫球蛋白CDR3区和重链基因序列中D区的关系 154
三、免疫球蛋白基因PCR引物的设计原则 156
四、PCR分析CDR3编码基因检测B淋巴细胞肿瘤 160
一、注意事项 165
附录一 多聚酶链反应(PCR)的方法学 165
二、寡核苷酸引物 166
三、PCR的缓冲液 167
四、Taq DNA多聚酶 168
五、脱氧三磷酸核苷酸 168
六、靶序列 169
七、扩增反应 169
八、扩增由mRNA逆转录产生的DNA 171
九、对PCR扩增的DNA进行序列分析 173
十、靶序列的定量 180
附录二 常用的基因诊断技术 185
一、分子克隆的技术简介 185
二、重组质粒DNA的制备 187
将重组质粒转入大肠杆菌扩增 187
迅速分离质粒DNA 189
聚丙烯酰胺凝胶电泳 191
低熔点琼脂糖凝胶电泳挖块法 192
三、DNA制备提纯操作规程(血细胞) 193
四、用微量及特殊标本制备染色体DNA 194
五、非超速离心法分离细胞总RNA(酸性硫氰胍/酚/氯仿提取法) 198
六、Southern blot转移 200
七、DNA与同位素探针分子杂交 203
八、同位素探针标记程序 204
九、生物素标记探针 205
十、生物素探针杂交 207
十一、生物素显色系统 207
二、同位素标记的原位杂交方法 209
附录三 染色体原位杂交 209
一、概述 209
三、放射自显影 210
四、生物素-染色体原位杂交 212
五、实验中常见问题的讨论 216
附录四 常用试剂的配制 220
附录五 分子生物学实验室常规设备 224
附录六 白血病PCR基因诊断试剂盒说明 229