第一篇 基础理论 1
第一章 分子遗传学进展 1
一、DNA的组成 1
二、DNA是双螺旋 3
三、双螺旋结构的多种形式 5
四、基因的分子结构 6
五、DNA分子能变性也能复性 6
六、基因的作用 7
七、基因的性能 7
八、突变的分子基础 10
九、DNA重组与疾病 13
小结 14
第二章 DNA体外重组 15
一、DNA体外重组的主要步骤 15
二、带有目的基因的DNA片段的获得 16
三、DNA片段与载体DNA体外人工重组 18
四、DNA重组体转入受体细胞及重组体克隆的筛选 20
五、外源基因的表达与表达产物 21
第三章 克隆载体的性质及应用 26
一、质粒的特性及其作为合适载体的条件 26
二、大肠杆菌质粒载体 27
三、枯草杆菌克隆载体 32
四、噬菌体载体 33
五、真核细胞的克隆载体 36
第四章 分子克隆工具酶 39
一、限制性核酸内切酶及其反应条件 39
二、同裂酶（同切口限制内切酶） 42
三、DNA连接酶 46
四、DNA聚合酶Ⅰ 47
五、末端转移酶 49
六、逆转录酶 50
九、核酸外切酶Ⅶ 51
七、核酸酶S1 51
八、核酸酶Bal31 51
第五章 重组克隆的筛选和检测 53
一、直接筛选法 53
二、间接筛选法 55
第六章 克隆基因的表达 63
一、克隆基因表达的基本条件 63
二、在大肠杆菌中为获得有效表达采取的一些设计和方法 65
三、克隆基因表达的检测 71
四、大肠杆菌以外的其他宿主 72
第七章 DNA重排与转位因子 74
一、DNA重排 74
二、转位因子 76
小结 82
一、加减法 84
第八章 DNA序列分析 84
二、化学降解法 85
三、末端终止法 87
四、M13克隆单链DNA 88
五、DNA序列连续测定法 89
六、电子计算机的应用 91
第九章 真核基因的克隆及其在真核细胞中的表达 93
一、真核细胞基因组的特征 93
二、真核细胞基因的获得 95
三、真核基因的克隆及筛选 100
四、真核基因在真核宿主细胞中的表达 103
第十章 基因工程的应用 108
一、基因工程在研制生物制剂和制药工业中的应用 108
二、基因工程在医学基础研究方面的应用 114
三、基因工程在临床上的应用 114
一、干扰素及其基因的类型和特性 116
第十一章 人的干扰素基因及其遗传工程的研究 116
二、干扰素cDNA的克隆和表达 117
三、干扰素“合成-天然杂合基因”的克隆和表达 118
四、干扰素化学合成基因的克隆和表达 119
五、从人的基因组DNA直接分离干扰素基因 121
六、干扰素基因的核苷酸序列 121
七、克隆基因产生的干扰素的特性 122
第十二章 腹泻病原菌的遗传工程 124
一、用遗传工程技术进行研究的意义 124
二、对粘附素的研究 125
三、对肠毒素的研究 129
四、对侵袭因子的研究 140
第十三章 肝炎病毒的分子生物学 143
一、病毒性肝炎的概述 143
二、HBV的结构 145
三、HBV基因的表达 150
四、HBV感染与肝癌的关系 154
小结 155
第十四章 遗传工程的安全防护 157
一、遗传工程与生物公害 157
二、对生物公害危险度的评价 158
三、生物公害的控制 160
第二篇 技术与方法 168
第十五章 质粒DNA的提取与纯化 168
一、氯化铯-溴化乙锭密度梯度离心纯化质粒DNA 168
二、酸酚法纯化质粒DNA 171
三、羟基磷灰石和SephacrylS-1000凝胶柱层析制备质粒DNA 172
四、简便快速检测质粒DNA的方法 174
第十六章 工具酶的制备 175
一、限制性核酸内切酶EcoRI的制备 175
二、限制性核酸内切酶BamHI的分离和纯化 177
三、T4-DNA连接酶的制备 179
第十七章 真核细胞mRNA的制备、鉴定与ds-cDNA的合成 183
一、哺乳类细胞poly(A)+RNA的制备 183
二、以poly(A)+RNA为模板逆转录合成ds-cDNA 185
三、mRNA在兔网织红细胞溶胞物体系中的转译 189
第十八章 DNA体外重组技术 193
一、粘末端连接法 193
二、同聚物接尾连接法 194
三、平端连接法 195
四、人工接头连接法 195
五、转化试验方法 196
第十九章 核酸分子杂交技术 197
一、菌落原位杂交 197
二、Southern吸印法 199
第二十章 重组体的筛选和检测 202
一、125I-SPA固相放射免疫检测技术 202
二、pBR322PstI位点插入失活快速碘化检测法 205
三、应用微细胞检测克隆基因的表达 206
第二十一章 DNA的限制性内切酶图谱绘制法 208
一、一次和多次酶解法制图 208
二、部分酶解法制图 209
第二十二章 DNA序列分析 211
一、双脱氧链终止法 211
二、化学降解法 219
第二十三章 乙型肝炎病毒快速免疫电镜检查 226
附录 226
一、常用母液的配制 226
二、抗菌素溶液的制备 227
三、常用电泳缓冲液的制备 227
四、常用凝胶加样缓冲液的制备 228
五、常用参考书 228
六、名词解释 229