1 脊髓灰质炎 1
1.1 病毒 1
1.2 疾病与发病机理 1
1.3 感染的传播方式 2
1.4 免疫 2
1.5 接种疫苗的预防作用 3
2 根据本国消灭脊髓灰质炎所处阶段应用本手册；实验室网络 5
2.1 消灭脊髓灰质炎的几个阶段 5
2.2 病毒学技术应用指南 6
2.3 实验室及其职能 7
3 标本的收集、贮存和运输 9
3.1 标本的收集 9
3.1.1 用于病毒分离的标本 10
3.1.2 用于血清学研究的血液标本 10
3.1.3 标本的标签 11
3.1.4 实验报告表 11
3.2 标本的保存和运输 11
3.2.1 温度 11
3.2.2 运输器材 15
3.2.3 航空运输 17
4 脊髓灰质炎病毒的分离和鉴定 19
4.1 脊髓灰质炎病毒的分离 19
4.1.1 标本的准备 19
4.1.2 推荐用于分离脊髓灰质炎病毒的传代细胞株 20
4.1.3 脊髓灰质炎病毒的分离 20
4.1.4 从环境标本中分离脊髓灰质炎病毒 21
4.1.5 从混有其它肠道病毒的标本中分离脊髓灰质炎病毒 22
4.1.6 脊髓灰质炎病毒的滴定 23
4.2 脊髓灰质炎病毒分离株的鉴定 26
4.2.1 血清抗体 26
4.2.2 用微量板法鉴定 26
4.2.3 用试管法鉴定 28
5 脊髓灰质炎病毒株的型内鉴别 30
5.1 单克隆抗体用于脊髓灰质炎病毒株的型内鉴别 30
5.2 核酸探针杂交法用于脊髓灰质炎病毒分离物的型内鉴别 33
5.2.1 标本的甲醛处理 35
5.2.2 将脊髓灰质炎病毒RNA固定到硝基纤维膜上 35
5.2.3 杂交 36
5.2.4 清洗硝基纤维膜以除去未结合的探针 37
5.2.5 杂交物的检测 37
5.2.6 试剂 38
6 脊髓灰质炎病毒中和抗体的检测 40
6.1 对脊髓灰质炎病毒免疫力的血清学监测 40
6.1.1 实验所用材料 41
6.1.2 微量中和试验的步骤 41
7 细胞培养技术及其在脊髓灰质炎实验室诊断中的应用 46
7.1 细胞培养的基本条件 46
7.2 细胞培养系统的选择 46
7.3 细胞培养 47
7.4 细胞的贮存 50
7.5 建立细胞库 54
8 实验室的生物安全性 56
8.1 感染危险的由来 56
8.2 带有危险性的操作步骤 57
8.3 减少感染危险的方法 57
8.4 污染物的处理 58
附录 59
附录1 快速评价3剂三价口服脊髓灰质炎活疫苗(OPV)剂量与血清学反应关系的操作规程 59
附录2 培养病毒和细胞的培养液及有关试剂的成分 61
附录3 RD和HEp-2传代细胞的来源 64
附录4 病毒母液的制备 67
缩略语 68