第一章 概述 1
第一节 紫杉醇的由来 1
第二节 紫杉醇的功能及其抗癌机理 3
一、抗癌作用 3
二、非癌性疾病 5
三、其他功能 7
四、紫杉醇的抗癌机理 8
第二章 紫杉醇的生产技术研究现状 9
第一节 从红豆杉树中提取紫杉醇 9
第二节 生物技术生产紫杉醇的研究现状 11
一、细胞和组织培养 12
二、器官培养 22
三、化学全合成和半合成 24
四、基因工程 26
五、微生物发酵法生产紫杉醇 26
六、代谢工程生产紫杉醇 33
第三章 紫杉醇的提取、分离与检测 35
第一节 紫杉醇的提取和分离 35
一、紫杉醇的提取 35
二、紫杉醇的分离 42
第二节 紫杉醇的分析与含量测定 51
一、薄层层析分析法 51
二、高效液相色谱分析法 54
三、质谱法 59
四、核磁共振光谱法 61
五、X-射线晶体照相术 63
六、免疫学分析法 63
七、毛细管电泳法 67
八、细胞生物学方法 67
九、荧光学方法 68
第四章 紫杉醇产生菌产紫杉醇发酵培养条件探讨及培养基的优化 70
第一节 紫杉醇生物合成的代谢调控 70
第二节 发酵过程中生物量和含糖量的变化 78
一、试验材料 78
二、试验方法 80
三、结果与分析 83
第三节 不同培养时期紫杉醇产生菌紫杉醇的产生情况 86
一、试验材料 86
二、试验方法 87
三、结果与分析 89
四、讨论 90
第四节 发酵条件对紫杉醇产生菌紫杉醇产量的影响 91
一、试验材料 91
二、试验方法 91
三、结果与分析 92
四、讨论 95
第五节 培养基组成对紫杉醇产生菌紫杉醇产量的影响 96
一、前体物间协同作用对紫杉醇产生菌生物合成紫杉醇影响的研究 96
二、诱导子对紫杉醇产生菌生物合成紫杉醇影响的研究 100
三、前体物和诱导子间的协同对紫杉醇产生菌生物合成紫杉醇影响的研究 103
四、前体物、抑制剂及诱导子的协同作用对紫杉醇生物合成影响的研究 107
五、讨论 112
第五章 紫杉醇高产菌株原生质体诱变育种的研究 116
第一节 原生质体诱变技术 116
一、丝状真菌原生质体诱变技术的研究进展 116
二、原生质体作为诱变材料的优越性 118
第二节 紫杉醇高产菌株原生质体诱变选育及其遗传变异初探 119
一、紫杉醇产生菌Nodulisporium sylviforme原生质体诱变育种的研究 119
二、紫杉醇高产菌株间遗传变异初探 140
第六章 紫杉醇生物合成途径中紫杉烯合成酶基因的克隆 158
第一节 紫杉醇的生物合成途径及部位 158
一、紫杉醇的生物合成途径 159
二、紫杉醇的生物合成部位 162
第二节 紫杉醇生物合成途径中相关酶的研究进展 163
一、紫杉醇骨架的生物合成中相关酶的研究 163
二、紫杉醇侧链的生物合成中相关酶的研究 168
三、紫杉环系统与侧链的酯化反应中相关酶的研究 169
第三节 紫杉醇合成途径中紫杉二烯合成酶cDNA克隆 169
一、试验材料 170
二、试验方法 171
三、结果与分析 180
第七章 紫杉二烯合成酶基因和紫杉醇产生菌基因组DNA的Southern杂交 188
一、试验材料 189
二、试验方法 190
三、结果与分析 195
四、讨论 196
五、结论 198
第八章 紫杉醇生物合成研究展望 199
参考文献 202