第1篇 总论 1
实验须知 1
第1章 基本操作技术 3
第1节 玻璃器皿的清洗 3
第2节 吸量管的种类和使用 4
第3节 溶液的混匀、过滤及离心 6
第4节 实验样品的制备 7
第5节 分光光度法 8
第2章 电泳技术 14
第1节 电泳的基本原理 14
第2节 影响电泳的主要因素 14
第3节 区带电泳的分类 15
第4节 几种常见的电泳方法 16
第5节 二维电泳 20
第3章 层析技术 25
第1节 层析技术的分类 25
第2节 层析中的常用术语 26
第3节 纸层析 28
第4节 薄层层析 29
第5节 离子交换层析 30
第6节 凝胶层析 32
第7节 亲和层析 35
第4章 离心分离技术 36
第1节 离心分离技术的原理 36
第2节 离心机的分类与特点 36
第5章 印迹技术 39
第1节 Southern印迹 39
第2节 Northern印迹 40
第3节 斑点杂交 41
第4节 Western印迹 41
第6章 聚合酶链式反应 43
第1节 PCR技术概述 43
第2节 PCR技术的基本原理 43
第3节 PCR反应条件的优化 46
第4节 PCR技术的扩展 48
第5节 PCR中应注意的问题 51
第6节 PCR在医学中的应用 53
第2篇 各论 55
第7章 蛋白质与氨基酸 55
实验1蛋白质含量的测定 55
实验2血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳定量测定 59
实验3凝胶层析法分离血红蛋白和DNP-鱼精蛋白（或DNP-酪蛋白） 64
实验4SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量 66
实验5蛋白质的沉淀反应 71
实验6酪蛋白等电点的测定 74
实验7氨基酸的薄层层析 75
实验8DNS-氨基酸聚酰胺薄膜双向层析 77
第8章 酶学 80
实验9影响酶活性的因素 80
实验10蔗糖酶的专一性 81
实验11丙氨酸转氨酶活性的测定 83
实验12乳酸脱氢酶同工酶的分离 85
实验13转氨基反应 87
实验14琥珀酸脱氢酶的作用及竞争性抑制 90
实验15米氏常数的测定 91
第9章 糖、脂和生物氧化 100
实验16饥饿和饱食对肝糖原含量的影响 100
实验17脂蛋白的分离和提纯 101
实验18血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 104
实验19血清三酰甘油测定 105
实验20高密度脂蛋白中胆固醇含量测定 108
实验21血清总胆固醇含量测定 109
实验22乳酸测定 111
实验23血中葡萄糖含量的测定 116
第10章 核酸 120
实验24细胞核的分离和纯化 120
实验25核酸含量的测定 122
实验26酵母RNA的提取及组分鉴定 126
实验27真核细胞基因组DNA的制备与定量 128
实验28DNA的限制性酶切反应 129
实验29Southern印迹 131
实验30Northern印迹 137
实验31PCR扩增技术 140
实验32随机扩增多态性DNA技术 142
第11章 综合性实验 144
实验33家兔免疫血清γ-球蛋白的分离与纯度鉴定 144
实验34蛋白质的分离、提取、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western印迹 146
实验35脂蛋白的分离、提纯和电泳鉴定 155
实验36大肠埃希菌感受态细胞的制备及质粒DNA分子导入原核细胞、提取、纯化鉴定 159
实验37碱性磷酸酶的提取、比活性及Km值的测定 165
实验38RT-PCR 169
实验39细菌双杂交质粒DNA的提取、纯化及鉴定 173
实验40apoE基因多态性分析 177
主要参考资料 181
附录 182