第一章 免疫荧光的原理及特点 1
第二章 荧光抗体的制备 3
第一节 免疫血清的制备 3
一、抗原 3
二、动物 3
三、免疫途径 4
四、佐剂 4
五、抗原剂量 5
六、多次注射的间隔时间 5
七、免疫血清的效价 6
八、自然感染病例抗血清的利用 7
第二节 免疫球蛋白的提取 7
一、硫酸铵盐析法 7
二、离子交换层析技术 9
三、凝胶过滤 12
四、简易快速提取法 13
第三节 脱盐 14
一、透析法 14
二、葡聚糖凝胶过滤法 14
第四节 定氮及浓缩 17
一、双缩脲法 17
二、福林—酚法 19
三、紫外光谱吸收法 20
四、凯氏微量定氮法 21
五、蛋白液的浓缩 21
第五节 荧光色素的标记 21
一、适于蛋白标记的荧光色素 22
二、标记方法 23
三、影响标记的因素 24
第六节 标记抗体的提纯 24
一、去除游离荧光色素 25
二、去除过度标记的蛋白分子 26
三、去除特异交又或额外反应性标记抗体 27
第七节 标记抗体的鉴定 28
一、F/P比值的测定 28
二、免疫电泳 29
三、染色性能鉴定 31
第八节 关于非特异性荧光染色问题 33
一、非特异性荧光染色的原因 33
二、非特异性荧光染色因素的去除 34
第三章 标本的制备方法 36
一、材料的收集 36
二、显微镜标本片的制备 36
三、标本的固定 37
四、标本片的保存 39
第四章 荧光抗体染色法 40
第一节 荧光抗体染色的基本条件 40
第二节 荧光抗体染色法 40
一、直接法 40
二、间接法 41
三、特殊染色法 43
四、染色标本的保存 43
第五章 荧光显微镜检查 44
第一节 光源 44
第二节 滤片系统 45
一、激发滤板 46
二、压制滤板 46
第三节 显微镜 47
一、聚光器 47
二、反光镜 48
三、落射光装置 48
四、物镜 48
五、目镜 49
六、载玻片及盖玻片 49
七、镜油 49
第四节 荧光显微镜的使用 49
第五节 荧光抗体镜检结果记录法 50
第六节 荧光显微摄影木 50
附:实验中常用溶液的配制法 51