生化实验技术学习要求及教学组织实施 1
第一部分 生物化学实验技术与原理 15
第一章 离心分离技术 15
第二章 层析技术 21
第三章 电泳技术 49
第四章 膜分离技术 62
第五章 光学检测技术 67
第六章 生物大分子制备技术 71
第二部分 基础实验 89
实验项目 89
蛋白质 89
实验一 氨基酸的分离鉴定——纸层析法 89
实验二 蛋白质的性质实验——蛋白质及氨基酸的呈色反应 93
实验三 蛋白质的等电点测定和沉淀反应 96
实验四 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳 100
实验五 茚三酮显色法测定氨基酸浓度 106
实验六 蛋白质浓度测定方法 108
实验七 蛋白质溶液脱盐——透析脱盐、凝胶层析法脱盐 122
实验八 凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量 128
实验九 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子质量 133
糖类 139
实验十 3，5-二硝基水杨酸比色法测定糖的浓度 139
实验十一 费林试剂热滴定定糖法 143
实验十二 可溶性总糖的测定（蒽酮比色法） 145
实验十三 糖的分离鉴定——硅胶G薄层层析法 148
酶 153
实验十四 酶的基本性质 153
实验十五 植物组织中过氧化氢酶的活力测定——高锰酸钾滴定法 160
实验十六 底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定 162
脂类 165
实验十七 种子粗脂肪提取和定量测定——索氏提取法 165
实验十八 脂肪碘值的测定 167
核酸类 170
实验十九 核酸碱基的分离——纸层析法 170
实验二十 核酸的紫外扫描及浓度测定 173
实验二十一 定磷法测定RNA浓度 175
实验二十二 二苯胺显色法测定DNA浓度 177
实验二十三 苔黑酚法测定RNA浓度 180
维生素 183
实验二十四 维生素C的定量测定——2，6-二氯酚靛酚法 183
实验二十五 维生素B1的定量测定——荧光法 187
实验二十六 核黄素的荧光法测定 190
代谢类 193
实验二十七 肌糖元酵解作用 193
实验二十八 脂肪酸β-氧化作用 196
实验二十九 发酵过程中无机磷的利用和检测 199
实验三十 氨基转换反应及其产物的鉴定 202
第三部分 设计综合开放实验 207
课前设疑 207
实验项目 207
实验三十一 动物脾脏DNA提取与分离鉴定 207
实验三十二 免疫球蛋白的分离纯化 212
实验三十三 酯酶的分离、纯化与活性测定 217
实验三十四 细胞色素C的制备和测定 222
实验三十五 蔗糖酶的分离纯化及活力测定 228
实验三十六 亲和层析纯化胰蛋白酶 245
第四部分 设计应用实验 257
实验项目 257
实验三十七 血糖的定量测定（Hagedorm-Jendon定糖法实验设计） 257
实验三十八 几种水果中有机酸的定量测定与分析（HPLC法检测水果中有机酸浓度实验设计） 261
实验三十九 维生素E浓度测定方法与比较（HPLC法检测食品中维生素E浓度实验设计） 272
实验四十 多糖分离及鉴定（天然产物多糖提取分离、纯化、鉴定实验设计） 276
实验四十一 高级脂肪酸的浓度的测定与分析（脂肪浓度测定及高级脂肪酸组分气相色谱法分析实验设计） 282
实验四十二 食品中微量元素的浓度测定与分析（食品中铜浓度原子吸收法的测定实验设计） 292
实验四十三 正交法测定几种因素对酶活力的影响 296
附录 301
一、实验基本操作及要求 301
二、常用蛋白质相对分子质量标准参照物 306
三、常用缓冲溶液的配制方法 306
四、实验室中常用酸碱的比重和浓度 312
五、常见蛋白质相对分子质量参考值 312
六、常见蛋白质等电点参考值 314
参考文献 316