第一章 电子显微镜概述 1
第一节 电镜发展简史 1
一、光学显微镜的极限分辨率 1
二、电镜的研制历程 3
第二节 电镜的类型及其展望 5
一、电镜类型介绍 5
二、展望 11
第二章 电子显微镜的用途 12
第一节 透射电镜在生命科学中的应用 12
一、细胞学 12
二、发现和识别病毒 13
三、临床病理诊断 14
四、微生物学 14
五、免疫学 15
六、细胞化学 16
第二节 透射电镜在材料科学中的应用 16
一、纳米材料的分析鉴定 17
二、半导体材料的观察分析 18
第三节 扫描电镜在生命学科中的应用 18
一、植物学 18
二、动物学 21
三、医学 23
四、微生物学 24
五、古生物学 26
六、考古学 26
第四节 扫描电镜在基础学科中的应用 27
一、材料学 27
二、物理学 29
三、化学 29
第五节 扫描电镜在工业中的应用 30
一、半导体工业 30
二、陶瓷工业 31
三、化学工业 31
四、地质矿物学 32
五、食品科学 33
第六节 X射线微区成分分析技术的应用 33
一、在生物学领域中应用 34
二、在材料科学中的应用 34
三、特殊试样的应用 35
第七节 电镜成分分析技术的发展前景 36
第三章 扫描电镜的工作原理和结构 38
第一节 工作原理和主要结构 38
一、工作原理 38
二、主要结构 38
第二节 扫描电镜成像原理和成像过程 42
一、成像原理 42
二、成像过程 42
三、扫描电镜的特点 45
第三节 影响扫描电镜图像形成和图像质量的因素 46
一、影响图像形成的因素 46
二、影响图像细节清晰的因素 48
三、影响图像反差的因素 50
第四章 透射电镜的工作原理和结构 51
第一节 透射电镜的工作原理和主要结构 51
一、透射电镜的工作原理 51
二、透射电镜的结构 51
第二节 透射电镜的成像原理 55
一、透射电镜的成像原理可分为三种情况 56
二、透射电镜图像反差的形成原理 56
三、提高生物样品图像反差的方法 58
四、透射电镜的特点 59
第三节 电子显微镜与光学显微镜的主要区别 60
一、成像原理和反差来源 60
二、分辨本领和放大倍数 60
三、视野、景深和焦深 61
四、样品制备 6
五、样品的损伤和污染 61
第五章 扫描电镜样品制备技术 63
第一节 对样品处理的要求 65
一、研究样品表面要处理干净 65
二、研究样品必须彻底干燥 65
三、非导体样品的导电处理 66
四、保护样品研究面 66
五、要求标记物要有形态 66
第二节 取样、清洗、固定 67
一、取样 67
二、粗样清洗 67
三、样品固定 68
第三节 脱水 74
一、脱水剂 74
二、脱水的原理与要求 74
三、脱水方法 75
第四节 干燥 75
一、干燥要求 75
二、干燥方法 75
第五节 粘样 82
一、粘样的目的 82
二、粘贴样品的材料 82
三、注意事项 82
第六节 样品的导电处理 82
一、金属镀膜法 83
二、导电染色法 85
第六章 透射电镜样品制备技术 86
第一节 概述 86
一、电镜样品取材的基本要求 86
二、样品超薄切片的基本要求 86
三、主要制样技术 86
第二节 样品取材与固定 88
一、取材方法 88
二、固定 89
第三节 样品的清洗与脱水 91
一、清洗 91
二、脱水 91
第四节 样品的渗透、包埋与聚合 92
一、渗透 92
二、包埋 92
三、渗透与包埋的操作步骤 93
四、渗透与包埋中的注意事项 93
五、聚合 93
第五节 载网和支持膜的制作 94
一、载网的类型和选择 94
二、支持膜的制作 95
第六节 样品的超薄切片技术 97
一、切片刀制作 97
二、修块 98
三、切片 99
第七节 切片的染色 102
一、染色剂的种类 102
二、常用染色剂的特性 103
三、常用染色剂的配制 103
四、染色方法 103
五、切片染色常出现效果欠佳的原因及克服方法 104
第八节 负染色技术 104
一、负染色的原理 104
二、负染色剂的种类及其特性 105
三、负染样品悬浮液的制备 106
四、负染的方法与操作步骤 107
五、影响负染色效果的主要因素及克服方法 108
六、正染与负染的区别 108
第九节 电镜细胞化学技术 109
一、电镜细胞化学技术种类 109
二、电镜酶细胞化学技术 109
三、其他生化物质的细胞化学技术 113
第十节 免疫电子显微技术 116
一、抗体的标记技术 116
二、胶体金制备 116
三、胶体金的鉴定 117
四、胶体金探针制备方法 117
五、胶体金免疫电镜样品的制备 119
六、对照实验 121
七、胶体金探针的优点 122
第十一节 实验废液处理 122
一、废液的收集 122
二、废液的处理 123
三、废液处理的注意事项 125
第七章 扫描电镜的使用 126
第一节 扫描电镜的操作 126
一、电镜启动 126
二、样品的安装 126
三、观察条件的选择 126
四、观察图像的操作方法 127
五、关机 130
第二节 扫描电镜图像常出现的质量问题 130
一、产生的原因 130
二、损伤 132
三、污染 133
四、放电 133
第八章 透射电镜的操作 134
第一节 透射电镜的一般操作步骤 134
一、TEM的开机 134
二、TEM的对中和调整 134
三、装样及注意事项 139
四、图像的观察和记录 139
五、关机 140
第二节 电镜日常使用期间的检查与保养 140
一、技术指标的调整 140
二、日常保养工作 141
第九章 电子图像储存技术和计算机处理 142
第一节 计算机储存电子图像 142
一、计算机储存图像的特点 142
二、全自动图像处理技术 142
第二节 计算机图像处理实例 143
一、电子图像的计算机处理过程 143
二、实空间图像的处理 144
三、傅里叶空间图像的处理 144
四、二维晶体图像的处理 145
五、螺旋对称颗粒图像的处理 147
六、单颗粒图像的处理 148
七、二十面体对称的病毒颗粒图像的处理 150
第十章 电镜样品制备实例 152
第一节 生物样品扫描电镜制备方法 152
一、孢子常规的固定方法 152
二、酵母的固定 152
三、原生动物固定 153
四、植物组织的特殊固定方法 153
五、单固定快速脱水法 154
六、鱼类细胞单固定半程序微波辐射法 155
七、贴壁培养细胞的单固定氯化金染色法 155
八、血细胞制样方法 155
九、血细胞E花环样品制备 156
十、明胶膜收集游离细胞制样方法 157
十一、单细胞藻类的制样方法 157
十二、菌落制样方法 158
十三、细菌液体培养物制样方法 158
十四、真菌熏蒸制样方法 159
十五、微小样品的制样方法 159
十六、原生质体的制样方法 159
十七、染色体的制样方法 160
十八、植物花粉粒的制备技术 161
十九、叶表皮制样方法 163
二十、木材立方体扫描样品制备技术 164
二十一、植物材料的冷冻割断制备技术 165
二十二、动物细胞内部结构冷冻割断法 166
二十三、动物器官的制样方法 166
二十四、细胞盐酸化学消化法 167
二十五、线虫扫描电镜样品的制备 168
二十六、针插或乙醇浸泡标本的样品制作 171
二十七、扫描电镜样品的导电法 172
二十八、非包埋与包埋切片的样品处理方法 173
二十九、免疫扫描电镜方法 176
三十、微区成分分析的生物样品制备方法 180
第二节 非生物样品扫描电镜制备技术 180
一、块状导电样品制备 180
二、粉末样品制备 180
三、土壤试样的制备 182
第三节 生物样品透射电镜制备方法 182
一、蛋白质样品的负染色 182
二、核酸样品的负染色 183
三、水稻条纹病毒（RSV）的提纯 185
四、免疫电镜技术包埋前染色方法 185
五、免疫电镜技术包埋后染色方法 186
六、免疫铁蛋白标记技术 186
七、免疫酶标记技术 187
八、悬浮态抗原的免疫标记技术 187
九、藻类透射电镜制样方法 188
十、散在细胞的透射电镜制样方法 189
十一、血小板透射电镜样品制备方法 190
十二、孢粉包埋切片法 190
十三、花药包埋切片法 190
十四、整花包埋切片法 191
十五、静脉乳液样品的制备 191
十六、纳米材料乳液制备 191
十七、细胞钙离子定位的锑酸盐沉淀技术 192
十八、三磷酸腺苷酶的定位 192
十九、组胞色素氧化酶的定位 193
二十、过氧化物酶的定位 193
二十一、过氧化氢酶的定位 193
二十二、葡萄糖—6—磷酸酶的定位 194
二十三、显示DNA的染色法 194
二十四、提高超薄切片反差的双铅染色法 194
二十五、超薄切片的选择性染色法 195
二十六、显示蛋白的氨银反应 195
二十七、细胞质多角体病毒的分离与纯化 195
二十八、染色质核小体的透射电镜样品制备 196
二十九、植物花叶病毒的免疫电镜观察 196
三十、造纸胶料的制备 197
第四节 非生物样品透射电镜制备技术 197
一、粉末样品的制备 197
二、薄膜样品的制备 198
三、复型 200
四、界面试样的制备 202
五、聚焦离子束方法 202
六、真空蒸涂方法 202
七、试样的保存和观察时的注意事项 203
参考文献 204