序 1
前言 1
1 RNAi分子机制与病毒防御 1
1.1 引言 1
1.2 RNAi分子机制 3
1.3 microRNA的表达与功能 18
1.4 RNAi介导的细胞发育调控 29
1.5 RNAi与病毒防御 35
1.6 siRNA的设计、表达和转染 39
参考文献 43
2 RNAi分子机制与脊椎动物免疫系统之间的进化关系 55
2.1 引言 55
2.2 RNAl是天然的病毒感染防御机制 55
2.3 脊椎动物RNAi可能与蛋白质免疫系统协同作用 57
2.4 干扰素反应:RNA沉默与蛋白质免疫系统之间的进化纽带 59
参考文献 62
3 siRNA抑制HBV在HepG2.2.15细胞中的复制与表达 65
3.1 引言 66
3.2 实验材料 68
3.3 实验方法 70
3.4 实验结果 84
3.5 实验发现 91
参考文献 93
4 siRNA抑制HBV在BHK-21细胞中的复制与表达 97
Ⅰ 靶基因表达载体pC-EGFP-N1的构建QQ 98
Ⅰ4.1 引言 98
Ⅰ4.2 实验材料 98
Ⅰ4.3 实验方法 100
Ⅰ4.4 实验结果 103
Ⅰ4.5 实验发现 105
Ⅱ siRNA表达载体的构建 106
Ⅱ4.1 引言 106
Ⅱ4.2 实验材料 106
Ⅱ4.3 实验方法 107
Ⅱ4.4 实验结果 112
Ⅱ4.5 实验发现 114
Ⅲ RNAi抗HBV感染的研究 116
Ⅲ4.1 引言 116
Ⅲ4.2 实验材料 116
Ⅲ4.3 实验方法 116
Ⅲ4.4 实验结果 119
Ⅲ4.5 实验发现 122
参考文献 123
5 RNAi抑制FMDV在BHK-21细胞和乳鼠中的复制与感染 125
5.1 引言 126
5.2 实验材料 127
5.3 实验方法 128
5.4 实验结果 134
5.5 实验发现 141
参考文献 144
6 靶向FMDV基因组保守区的siRNA对异源毒株感染的交叉抑制 147
6.1 引言 148
6.2 实验材料 148
6.3 实验方法 150
6.4 实验结果 154
6.5 实验发现 163
参考文献 164
7 siRNA抑制FMDV在IBRS-2细胞和动物体内的复制与感染 166
7.1 引言 167
7.2 实验材料 168
7.3 实验方法 169
7.4 实验结果 173
7.5 实验发现 186
参考文献 187
8 靶向FMDV的siRNA诱导IFN-β的研究 189
8.1 引言 190
Ⅰ siRNA表达载体的构建 190
Ⅰ8.2 实验材料 190
Ⅰ8.3 实验方法 191
Ⅰ18.4 实验结果 196
Ⅰ8.5 实验发现 197
Ⅱ siRNA诱导IFN-β表达量的测定 198
Ⅱ8.2 实验材料 198
Ⅱ8.3 实验方法 199
Ⅱ8.4 实验结果 202
Ⅱ8.5 实验发现 208
参考文献 210
9 siRNA抑制SARS-CoV在HEK 293T细胞中的复制与表达 214
9.1 引言 215
9.2 实验材料 216
9.3 实验方法 218
9.4 实验结果 223
9.5 实验发现 226
主要英文缩写词 232