《分子杂交理论与技术》PDF下载

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  • 作  者:王廷华,Jean Phlilppe Merlio主编
  • 出 版 社:北京:科学出版社
  • 出版年份:2009
  • ISBN:9787030242143
  • 页数:229 页
图书介绍:分子杂交是分子生物学中较为重要的原位定位和定量技术,广泛应用于各生物学科领域。前者(定位)主要包括原位杂交技术,后者(定量)包括Northern杂交,Southern杂交技术。本书从理论上全面介绍分子杂交技术的发展和形成过程与原理。在此基础上分别介绍各技术,用大量自制照片辅以说明,较为实用第二版将在第一版的基础上增加近3年的新进展。

第一章 分子杂交概论 1

第一节 分子杂交技术及其意义 1

第二节 核酸分子杂交 2

第三节 核酸探针 7

第二章 原位杂交技术的基本理论 25

第一节 原位杂交技术的发展及研究历史 25

第二节 原位杂交技术的基本方法和主要内容 26

第三章 地高辛原位杂交技术 33

第一节 实验原理 33

第二节 地高辛原位杂交技术的研究历史与发展 33

第三节 实验所需设备、试剂及配制 36

第四节 详细实验步骤、结果及分析 39

第五节 cRNA探针原位杂交实验中存在的问题和经验体会 43

第四章 荧光原位杂交技术 47

第一节 实验原理 47

第二节 荧光原位杂交技术的研究历史与发展 47

第三节 操作步骤 51

第四节 实验所需设备、试剂及配制 57

第五节 详细实验步骤、结果及分析 60

第六节 实验中存在的问题和经验体会 64

第五章 抑制消减杂交 66

第一节 抑制消减杂交的概念 66

第二节 抑制消减杂交产生的背景及内涵 66

第三节 抑制消减杂交的原理 68

第四节 抑制消减杂交实验操作步骤 73

第五节 结果与分析 79

第六节 问题与解答 82

第六章 辐射性杂交 88

第一节 辐射性杂交的基本原理与发展历程 88

第二节 构建辐射性杂交图谱的方法 91

第三节 辐射性杂交图谱的应用 95

第七章 反义核酸分子杂交技术及其应用 103

第一节 反义RNA 103

第二节 反义DNA 106

第三节 反义核酸的特性 107

第四节 人工合成反义寡核苷酸的类型 108

第五节 反义寡核苷酸的化学改造 109

第六节 制备反义寡核苷酸要考虑的因素 110

第七节 反义寡聚核苷酸导入细胞的方法 114

第八节 核酶 114

第九节 反义核酸分子杂交技术的应用 118

第八章 基因芯片固相分子杂交技术理论与进展 123

第一节 基因芯片的制备方法 123

第二节 基因芯片检测的样品制备 127

第三节 基因芯片杂交 129

第四节 基因芯片检测原理 129

第五节 基因芯片杂交的结果分析 132

第六节 基因芯片的应用 132

第七节 国内外基因芯片研究及开发情况 140

第九章 基因芯片分子杂交技术在脑出血周围带基因组分析中的应用 144

第一节 实验原理 144

第二节 材料和方法 144

第三节 实验结果 149

第四节 注意事项与经验体会 149

第十章 Southern印迹杂交 152

第一节 实验原理 152

第二节 实验方法 152

第三节 实验结果及注意事项 160

第十一章 Northern印迹杂交 161

第一节 实验原理 161

第二节 实验方法 161

第十二章 Western杂交 167

第一节 蛋白质样品的制备 168

第二节 蛋白质样品的分离—不连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 173

第三节 转移电泳 177

第四节 免疫检测 179

第五节 Western印迹应注意的问题和出现的异常情况及对策 181

第十三章 cRNA探针原位分子杂交单、双标技术的应用 185

第一节 原位杂交技术检测猫脊髓和背根节中NGF mRNA的表达 185

第二节 用免疫组化及原位杂交双标技术检测猫脊髓内NGF及其mRNA的表达 190

第十四章 寡核苷酸探针原位杂交技术检测大鼠脊髓中NGF家族及其受体mRNA的表达 193

第一节 实验原理 193

第二节 实验所需设备、试剂及其配制 193

第三节 实验步骤 194

第四节 实验结果 196

第五节 结果分析 198

第六节 实验中存在的问题和经验体会 198

第十五章 Western blot技术在检测全横断脊髓损伤大鼠神经干细胞移植后NGF变化中的应用 204

第一节 实验原理 204

第二节 实验所需设备、试剂及其配制 204

第三节 实验步骤 206

第四节 实验结果 208

第五节 结果分析 209

第六节 实验体会 210

第十六章 Northern印迹杂交检测小鼠乳房肿瘤组织的总RNA 211

第一节 实验目的及原理 211

第二节 实验方法 211

第三节 实验结果 216

第四节 实验体会 218

[附]生物素(地高辛)标记探针的Northern blot检测方法 218

第十七章 基因芯片技术检测针刺促进脊髓损伤修复中的基因表达 221

第一节 实验原理 221

第二节 实验所需仪器、试剂及其配制 221

第三节 实验步骤 224

第四节 实验结果 226

第五节 结果分析 228

第六节 实验体会 228