第一章 分子机制研究 1
第一节 基因芯片技术初步筛选药物作用的信号通路 2
一、实验目的及原理 2
二、实验材料 2
三、实验方法 2
四、实验结果 6
第二节 蛋白质印迹法 8
一、实验目的及原理 8
二、实验材料 9
三、实验方法 11
第三节 慢病毒的构建、包装与转染 20
一、实验目的及原理 20
二、实验材料 21
三、实验方法 22
第四节 流式细胞仪分析药物与靶点的结合情况 27
一、实验目的及原理 27
二、实验材料 27
三、实验方法及步骤 28
第二章 肿瘤治疗药物体外模型研究方法 32
第一节 细胞培养实验基本操作 33
一、实验目的及原理 33
二、实验材料 33
三、实验方法 33
第二节 MTT法检测细胞增殖实验 47
一、实验目的及原理 47
二、实验材料 47
三、实验方法 47
第三节 体外肿瘤转移模型 50
一、细胞侵袭实验 50
二、细胞黏附实验 54
三、细胞骨架检测实验 56
四、明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶(MMPs)活性 59
第四节 血管生成模型 61
一、HUVEC细胞迁移实验 61
二、HUVEC细胞小管形成实验 65
三、大鼠动脉环血管形成实验 67
第三章 肿瘤药治疗物体内模型研究方法 70
第一节 鸡胚绒毛尿囊膜实验 71
一、实验目的及原理 71
二、实验材料 71
三、实验方法 72
第二节 实验动物的给药剂量及其计算方法 74
一、实验目的及原理 74
二、实验方法 74
第三节 实验动物编号和分组方法 77
一、实验目的及原理 77
二、实验方法 77
第四节 CFDA要求——抗肿瘤药物药效学指导原则 79
一、基本原则 79
二、体外抗肿瘤活性试验 80
三、体内抗肿瘤试验 81
四、抗肿瘤药物的特殊要求 85
第五节 C57BL/6黑鼠移植瘤B16F10的抗肿瘤药效实验 89
一、实验目的 89
二、实验材料 89
三、实验方法 89
第六节 血管抑制剂联合奥沙利铂对肝癌裸鼠移植瘤模型的药效实验研究 91
一、实验目的及原理 91
二、实验材料 91
三、实验方法 92
第七节 乳腺癌肺转移模型的建立 96
一、实验目的及原理 96
二、实验材料 96
三、实验方法 96
第四章 蛋白多肽药物临床前药物代谢动力学研究 99
第一节 ELISA法检测蛋白多肽及PEG修饰蛋白多肽药物浓度的方法学建立 100
一、实验目的及原理 100
二、实验材料 102
三、实验方法 103
第二节 药代动力学参数测定及药物组织分布与排泄 108
一、实验目的及原理 108
二、实验材料 109
三、实验方法 109
四、实验结果 111
第三节 体外探针法测定L-02细胞体系中药物对人CYP亚型活性影响 114
一、实验目的及原理 114
二、实验材料 115
三、实验方法 115
四、实验结果 118