第一篇 概述 2
第一章 microRNA的发现 2
第二章 microRNA的起源与加工 4
第三章 microRNA与siRNA、piRNA 11
第四章 microRNA的鉴别和特征 16
第五章 microRNA的调控机制 19
第六章 microRNA的功能 22
第二篇 microRNA的研究方法和技术 34
第七章 生物信息学分析分法 34
第一节 microRNA的生物信息学分析策略 34
第二节 microRNA序列信息的获取 35
第三节 microRNA新基因的预测及注册 45
第四节 microRNA簇分析 48
第五节 microRNA基因的转录调控分析 52
第六节 microRNA的种系发育分析 64
第七节 microRNA的靶基因预测 68
第八章 分子生物学研究方法 78
第一节 microRNA的分子生物学研究方法简介 78
第二节 microRNA体外或体内水平的过表达研究 83
第三节 microRNA表达抑制研究 84
第四节 体外验证microRNA作用的靶基因 86
第五节 microRNA功能研究的策略 87
第九章 microRNA研究的实验技术 93
第一节 新microRNA基因的克隆 93
第二节 PAGE/Northern blotting 105
第三节 microRNA基因芯片技术 115
第四节 实时定量PCR 121
第五节 锁定的核苷酸原位杂交(LNA-ISH) 126
第六节 microRNA过表达实验技术 131
第七节 microRNA表达抑制实验技术 143
第八节 靶基因克隆验证-荧光素酶报告基因检测系统的构建及使用方法 149
第三篇 MicroRNA研究方法在医学研究中的应用 171
第十章 microRNA与病毒 171
第一节 编码microRNA的病毒 171
第二节 microRNA在病毒研究中的应用 177
第三节 展望 180
第十一章 microRNA与恶性肿瘤 183
第一节 microRNA在肿瘤中的表达研究 183
第二节 microRNA在肿瘤中的功能研究 187
第三节 肿瘤microRNA研究展望 189
第十二章 人microRNA簇基因组组织及造血表达谱分析 194
第一节 分析方法 195
第二节 人microRNA簇基因分布分析 197
第三节 人microRNA基因簇启动子分析 197
第四节 人microRNA基因簇同源性分析 198
第五节 人microRNA基因簇造血表达谱 202
第六节 人microRNA基因簇造血表达的聚类分析 205
第七节 人microRNA基因簇表达特征 207
第八节 人microRNA基因簇表达一致性趋势的验证 210
第九节 人microRNA基因簇杂交灵敏性检测 212
第十节 人造血链系特异或丰度表达microRNA基因和microRNA基因簇鉴别 213
第十一节 讨论 213
第十三章 microRNA与2型糖尿病 226
第一节 2型糖尿病的动物模型——GK大鼠 227
第二节 GK大鼠骨骼肌组织中microRNA表达谱 228
第三节 Northern blotting验证差异表达microRNAs 230
第四节 过表达miR-29的腺病毒载体构建与病毒包装 237
第五节 高胰岛素与葡萄糖刺激miR-29的表达 238
第六节 miR-29过表达抑制胰岛素刺激的葡萄糖吸收 239
第七节 讨论 241