序 1
前言 1
第一章 绪论 1
第一节 园艺植物生物技术的主要内容 1
一、园艺植物组织培养 1
二、园艺植物细胞工程 2
三、园艺植物染色体工程 3
四、园艺植物基因工程 3
五、园艺植物分子标记 4
第二节 园艺植物生物技术的发展简史与趋势 5
一、植物生物技术发展简史 5
二、园艺植物生物技术发展趋势 11
第二章 园艺植物组织培养的理论基础与基本技术 15
第一节 概述 15
一、园艺植物组织培养的概念和类型 15
二、园艺植物组织培养的理论基础 16
第二节 园艺植物组织培养所需的仪器及设备 19
一、灭菌设备 19
二、无菌接种设备 20
三、可调控人工培养设备 20
四、其他仪器设备 21
第三节 园艺植物组织培养的基本技术 21
一、培养基配制技术 21
二、外植体的灭菌技术 25
三、接种环境和接种设备灭菌技术 26
四、无菌接种技术 27
五、组培苗的继代技术 28
六、组培苗的生根技术 28
七、组培苗的驯化和移栽技术 29
第四节 影响园艺植物组织培养的因素 30
一、外植体的种类 30
二、培养基成分及激素配比 31
三、组织培养环境条件 33
第三章 园艺植物脱毒与离体快速繁殖 37
第一节 园艺植物的脱毒 37
一、脱毒的意义 37
二、脱毒的方法 37
三、脱毒苗的鉴定 41
四、无毒苗的保存与繁殖 44
五、脱毒技术在园艺植物上的应用 45
第二节 园艺植物的离体快速繁殖 46
一、离体快速繁殖的意义 46
二、离体快速繁殖的方法 47
三、离体快速繁殖在园艺植物上的应用 49
第三节 园艺植物人工种子的生产 50
一、人工种子的概念及意义 50
二、人工种子的制备方法与技术 51
三、人工种子的储藏与萌发 54
四、园艺植物人工种子的制备技术 55
第四章 园艺植物种质离体保存与无性系变异筛选 58
第一节 园艺植物种质资源的离体保存 58
一、限制生长保存 58
二、超低温保存 60
三、园艺植物种质资源离体保存技术应用 66
第二节 园艺植物的无性系变异及其筛选 67
一、植物体细胞无性系变异的来源 68
二、植物体细胞无性系变异的遗传学基础 70
三、植物体细胞无性变异系的筛选 72
四、体细胞无性系变异在园艺植物育种中的应用 74
第五章 园艺植物的细胞工程 76
第一节 园艺植物细胞培养 76
一、单细胞培养 76
二、细胞悬浮培养 81
三、植物细胞的规模化培养 84
第二节 园艺植物的原生质体培养 87
一、原生质体培养的意义 87
二、原生质体培养的基本技术 88
第三节 园艺植物的细胞融合 93
一、细胞融合前的准备 93
二、细胞融合技术 93
三、杂种细胞的筛选技术 95
第六章 园艺植物的染色体工程 98
第一节 园艺植物单倍体制备 98
一、雄配子途径 98
二、雌配子途径 101
第二节 园艺植物多倍体制备 103
一、活体诱导 103
二、离体诱导 104
第三节 园艺植物非整套染色体操作 106
一、染色体代换系的创制 106
二、染色体附加系的创制 106
三、染色体易位系的创制 107
第四节 园艺植物染色体工程产物的鉴定 108
一、形态学鉴定 108
二、细胞学鉴定 109
三、生理生化鉴定 110
四、分子生物学鉴定 110
第五节 园艺植物染色体工程的成就及其发展方向 111
一、成就 111
二、存在的问题及今后的发展方向 111
第七章 植物基因工程的基础知识与技术 114
第一节 植物遗传物质的基础知识 114
一、DNA的结构与功能 114
二、RNA的结构与功能 116
三、蛋白质的结构与功能 117
四、遗传信息的传递 118
五、基因的概念 118
第二节 植物基因工程常用的工具酶 119
一、限制性内切核酸酶 119
二、DNA连接酶 120
三、DNA聚合酶 120
四、其他工具酶 122
第三节 园艺植物基因工程常用的载体 123
一、质粒载体 123
二、λ噬菌体载体 125
三、柯斯质粒载体 126
四、人工染色体载体 126
第四节 植物基因工程的基本技术 127
一、核酸分离技术 127
二、核酸电泳技术 130
三、核酸体外扩增技术 131
四、分子杂交技术 134
第八章 园艺植物基因的分离与克隆 138
第一节 文库筛选法 138
一、园艺植物基因组文库的构建 138
二、园艺植物cDNA文库的构建 140
三、目的基因的筛选 143
第二节 图位克隆技术 144
一、分离基因的程序 144
二、优缺点 145
第三节 转座子标签法 145
一、转座子的分类 145
二、分离基因的程序 145
三、优缺点 146
四、T-DNA标签法 146
第四节 基因差异表达技术 147
一、mRNA差异显示技术 147
二、抑制性消减杂交技术 148
三、代表性差异分析法 149
四、基因表达系列分析 150
五、cDNA-AFLP技术 151
第五节 同源序列法 152
一、基于同源序列的候选基因法 152
二、cDNA末端快速扩增技术 153
第六节 基因芯片技术 155
一、基因芯片的类型 155
二、基本程序 155
三、优缺点 156
第九章 园艺植物遗传转化载体的构建 158
第一节 根癌农杆菌Ti质粒基因转化载体的构建 158
一、Ti质粒的改造 158
二、Ti中间表达载体的构建 160
三、Ti共整合转化载体的构建 161
四、Ti双元转化载体的构建 164
第二节 发根农杆菌Ri质粒基因转化载体的构建 165
一、Ri质粒的基因结构 165
二、Ri中间表达载体的构建 166
三、Ri共整合转化载体的构建 166
四、Ri双元转化载体的构建 166
第三节 载体构建中常用的选择标记基因和报告基因 166
一、选择标记基因和报告基因的基本特点 167
二、常用的选择标记基因 167
三、常用的报告基因 171
第四节 园艺植物常用的遗传转化载体类型 173
一、正义表达载体 173
二、反义表达载体 173
三、RNA干涉载体 174
四、基因打靶载体 174
五、其他载体 175
第五节 目的基因与载体的连接 175
一、插入灭活法 176
二、定向克隆法 176
第十章 园艺植物遗传转化 179
第一节 园艺植物遗传转化受体系统 179
一、遗传转化对园艺植物受体系统的要求 179
二、常用的园艺植物受体系统 180
第二节 园艺植物遗传转化方法 181
一、外源裸露DNA的转化 181
二、载体介导的DNA转化 185
三、种质转化法 188
第三节 园艺植物转化植株的鉴定 190
一、利用选择标记基因和报告基因鉴定 190
二、利用重组DNA分子特征鉴定 192
三、利用外源基因的转录或表达鉴定 192
第四节 提高外源基因在园艺植物体内表达水平的策略 193
一、转基因园艺植物中外源基因的沉默 193
二、提高外源基因在园艺植物体内表达水平的策略 195
第五节 基因沉默技术与基因剔除技术 197
一、基因沉默技术 197
二、基因剔除技术 199
第六节 外源基因在园艺植物中的遗传 200
第十一章 转基因技术在园艺植物育种上的应用 202
第一节 培育抗病品种 202
一、抗病毒转基因园艺植物 202
二、抗真菌转基因园艺植物 203
三、抗细菌转基因园艺植物 204
第二节 培育抗虫品种 204
一、抗虫基因的来源 205
二、抗虫转基因园艺植物 205
第三节 培育抗逆品种 207
第四节 培育抗除草剂品种 208
第五节 培育耐储运品种 210
第六节 创造雄性不育材料 211
一、创造雄性核不育系的途径 211
二、基因工程雄性不育系的恢复与保持 213
第七节 改良产品的营养品质 213
第八节 改变花卉作物的花型和花色 215
一、改良花型 215
二、改变花色 216
三、改变花期 217
第九节 提高光合效率和固氮能力 218
一、提高光合效率 218
二、提高固氮能力 219
第十节 改良其他性状 219
一、改良香味 219
二、改良生长特性 220
三、单性结实 220
四、转基因生物反应器 220
第十二章 园艺植物的分子标记 222
第一节 园艺植物遗传标记概述 222
一、遗传标记的类型 222
二、理想的遗传标记应具备的特点 223
第二节 园艺植物分子标记的种类及其原理 224
一、分子标记多态性产生的分子基础 224
二、基于Southern杂交的分子标记 224
三、基于PCR扩增的DNA标记 226
四、基于序列测定的分子标记 234
五、园艺植物主要分子标记的技术特点比较 235
第三节 分子标记数据的处理与分析 236
一、数据的获得 236
二、统计学处理 236
第四节 分子标记在园艺植物上的应用 238
一、分子遗传图谱构建和基因定位 238
二、分子标记辅助选择育种 241
三、遗传多样性和亲缘关系分析 242
四、核心种质构建 243
五、园艺植物品种鉴定与纯度分析 244
第十三章 园艺植物生物技术与生物信息学 246
第一节 生物信息学基本知识 246
一、生物信息学的研究任务与内容 246
二、生物信息学常用数据库 246
三、生物信息学信息检索系统 251
四、核酸和蛋白质同源性比对检索分析系统 252
第二节 生物信息学在园艺植物上的应用 253
一、寻找园艺植物新基因 253
二、克隆园艺植物新基因 254
三、预测园艺植物基因区域 255
四、预测园艺植物基因功能 256
五、预测园艺植物蛋白质结构 256
六、分析园艺植物系统进化关系 257
第三节 新基因的登录及其发明专利的申请 258
一、新基因的登录 258
二、生物技术发明专利申请的意义与必备条件 259
三、基因专利的申请 261
四、生物技术发明专利申请存在的问题 262
第十四章 园艺植物生物技术的安全性评价与管理 265
第一节 概述 265
一、生物安全的内涵 265
二、生物安全的种类 265
三、转基因技术的应用情况 266
四、对转基因技术进行安全性评价的必要性 267
第二节 转基因植物的环境安全性评价 267
一、外源基因对受体植物的影响 267
二、转基因植物在生态方面的潜在风险 269
第三节 园艺植物生物技术对人类健康的安全性评价 272
一、园艺植物转基因食品对人类健康存在的可能影响 273
二、转基因食品的安全性评价 275
第四节 园艺转基因植物生物安全管理 276
一、转基因植物生物安全控制措施 276
二、转基因植物生物安全管理体系及实施原则 277
三、加强转基因植物生物安全工作的对策 279
主要参考文献 282