第三版前言 3
第二版前言 3
第一版前言 3
第一篇 遗传学实验 3
实验一 植物细胞有丝分裂的制片与观察 3
实验二 减数分裂的制片与观察 6
一 玉米减数分裂的制片与观察 6
二 蝗虫减数分裂的制片与观察 8
实验三 植物多倍体诱发 11
实验四 染色体畸变的制片与观察 13
一 染色体结构变异的制片与观察 13
二 染色体数目变异的制片与观察 14
实验五 链孢霉有性杂交的四分子分析 16
实验六 植物组织培养 19
实验七 植物染色体组型分析 22
实验八 小麦有性杂交技术 25
实验九 数量性状的遗传分析—遗传率的估算 28
实验十 群体等位基因频率估算及遗传平衡分析 31
实验十一 植物基因组DNA的提取、鉴定与转化 33
一 植物基因组DNA的提取方法 33
二 植物基因组DNA的质量鉴定和浓度估测 35
三 感受态细胞的制备及目的DNA的转化 35
实验十二 果蝇的饲养及性状、性别的观察 38
实验十三 果蝇的杂交实验 41
一 果蝇的单因子遗传 41
二 果蝇的双因子遗传 43
三 果蝇的伴性遗传 45
四 基因的连锁与交换 48
五 果蝇的三点实验和基因定位 50
实验十四 果蝇唾腺染色体制片与观察 53
实验十五 蟾蜍骨髓染色体制备与观察 55
实验十六 小白鼠染色体技术 57
一 骨髓染色体制备与观察 57
二 活体姊妹染色单体色差方法 58
三 染色体C-带显带方法 60
实验十七 人的染色体技术 62
一 外周淋巴细胞培养及染色体制片 62
二 染色体G-带显带方法 64
三 姊妹染色单体互换的制片与观察 65
实验十八 设计创新实验 67
第二篇 生物化学实验 71
实验一 啤酒酵母蔗糖酶的提取、分离纯化、性质鉴定及反应动力学 71
一 啤酒酵母蔗糖酶的提取及分离纯化 71
二 考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 75
三 紫外分光光度法测定蛋白浓度 77
四 蔗糖酶活力的测定 79
五 蔗糖酶纯度和相对分子质量的测定—SDS-PAGE电泳法 81
六 用正交试验设计法测定几种因素对蔗糖酶活性的影响 87
七 蔗糖酶米氏常数Km最大反应速率Vmax值的测定和抑制剂常数Ki 91
实验二 亲和层析法纯化胰蛋白酶 98
实验三 酶谱分析技术分析纤维素酶 102
实验四 大豆蛋白的提取与含量测定 107
一 大豆蛋白的提取 107
二 微量凯氏定氮法测定蛋白质含量 109
三 蛋白质含量的测定—Folin-酚法 113
四 双缩脲法测蛋白含量 114
五 大豆蛋白的氨基酸分析 115
实验五 N末端氨基酸分析—DNS-Cl法测定蛋白质及肽的N末端氨基酸 117
实验六 细胞色素c的制备及测定 122
实验七 核酸的提取及核苷酸的分离 127
一 动物组织核酸的提取及含量测定 127
二 植物组织核酸的提取及含量测定 130
三 酵母RNA的提取及含量测定 133
四 离子交换柱层析分离核苷酸 134
实验八 维生素B2和维生素C的含量测定 138
一 维生素B2含量测定 138
二 维生素C的含量测定 139
实验九 L-谷氨酸的酶促脱羧作用(测压法测定L-谷氨酸) 142
实验十 三羧酸循环中间产物对酵母耗氧率的影响 146
实验十一 脂肪、糖及氨基酸反应的定性实验 148
一 脂肪酸的β-氧化 149
二 脂肪转化为糖的定性实验 150
三 肌糖原的酵解作用 151
四 氨基移换反应的定性实验 153
实验十二 设计创新实验 156
第三篇 分子生物学实验 159
实验一 腺嘌呤脱氨酶基因工程菌的构建、蛋白的表达、纯化及鉴定 159
一 目的基因的获得 161
二 目的基因的亚克隆 162
三 重组质粒的构建 166
四 重组质粒的转化、筛选和鉴定 170
五 蛋白的表达、纯化及鉴定 173
实验二 头发中抽提DNA并用PCR-RFLP法鉴定CYP2C9基因型 177
实验三 植物基因组DNA、总RNA的提取及相对分子质量测定 181
一 植物基因组DNA的提取 1
二 植物总RNA的提取 182
实验四 蛋白质印迹分析(Western blot analysis) 185
实验五 DNA探针的制备和标记 188
实验六 Southern印迹法 191
实验七 RNA的Northern杂交 196
实验八 真核生物cDNA文库的构建和分析 199
实验九 电穿孔法转染哺乳动物细胞 204
实验十 转基因动物 206
实验十一 RNA甲醛变性电泳 211
实验十二 RT-PCR扩增目的基因 213
实验十三 聚合酶链式反应—单链构象多态性检测(PCR-SSCP) 216
实验十四 PLPR启动子表达载体表达目的基因 219
实验十五 设计创新实验 222
主要参考文献 223
附录 225
附录1 遗传学实验常用试剂、培养基的配制 225
附录2 设计创新实验程序与要求 226