第一章 绪论 1
第一节 分子生物学技术在中医药防治肝癌作用机制探索中的应用 1
第二节 分子生物学技术在中医药研究中的应用现状 7
第三节 中医药研究中常用的分子生物学技术 13
第四节 分子生物学技术在中医药研发中的应用前景 20
第二章 分子生物学常用基本技术 26
实验1重组质粒 26
实验2质粒转化大肠杆菌 30
实验3阳性单菌落扩增与小量DNA制备 34
实验4酶切重组质粒和电泳分离所插入的DNA 37
实验5从凝胶中回收DNA 40
实验6大量质粒DNA制备 41
第三章 DNA的研究方法 45
实验7哺乳类动物组织基因组DNA的提取 45
实验8基因组文库的建立与目的基因筛选 48
实验9 Southern blot 58
实验10 PCR 64
实验11 DNA双脱氧链终止法测序 70
第四章 RNA的研究方法 77
实验12哺乳类动物组织总RNA的提取 79
实验13 mRNA的分离 81
实验14 Northern blot 84
实验15 RT-qPCR 90
实验16多基因表达的检测 96
实验17 cDNA库建立 112
实验18基因全序列cDNA库筛选 123
第五章 蛋白质的研究方法 132
实验19哺乳类动物组织蛋白质的提取 132
实验20 Western blot 136
实验21 ELISA 149
实验22免疫组织化学 154
实验23蛋白质双向电泳 160
实验24蛋白芯片 178
第六章 基因功能与表达调控的研究方法 182
实验25 RNAi 183
实验26报告基因与基因调控元件的检测 189
实验27体外定点诱变技术 192
实验28 CRISPR-Cas9基因编辑技术 195
实验29基因过表达 204
实验30免疫共沉淀 211
第七章 分子生物学实验常用的细胞生物学技术 216
实验31哺乳类动物细胞的培养 216
实验32细胞增殖检测 224
实验33流式细胞术 226
实验34体外细胞划痕实验 234
实验35细胞迁移和侵袭实验 236
实验36 TUNEL法检测细胞凋亡 239
第八章 分子生物学常用网络资源及利用 243
第一节 美国国家生物技术信息中心(NCBI) 243
第二节 GenBank数据库查询与搜索 248
第三节 BLAST 255
第四节 EST的电子延伸 265
第五节 cDNA序列的蛋白阅读框架分析、染色体定位及其在机体各组织中的表达预测 271
第六节 PCR引物或序列寡核苷酸探针的在线设计 278
第七节 蛋白质分析 280
附录 287
1分子生物学实验常用仪器设备 287
2常用生物学数据 288
3常用载体 292
4分子克隆常用酶 293
5常用储存液的配制 297
6常用液体培养基 299
7常用缓冲液 300
8常用酸碱溶液的浓度与分子量 300
9不同浓度酸碱液的pH 301
10核酸的纯化(用酚-氯仿抽提) 301
11核酸浓缩 302
12分光光度法测定DNA及RNA含量 303
13 Sephadex的水化 303
14放射性度量单位和数据 303
15科学单位 303
16离心速度和离心力换算 304
17常用分子生物学术语对照 304