《生命科学综合实验 miRNA-X的克隆和功能分析》PDF下载

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  • 作  者:徐磊,李姣主编
  • 出 版 社:上海:同济大学出版社
  • 出版年份:2018
  • ISBN:9787560878331
  • 页数:109 页
图书介绍:通过对特定microRNA的生物信息学分析,初步了解microRNA的靶向预测,理解microRNA负调控基因表达的机制;进一步通过湿实验克隆和检测microRNA的功能,培养学生综合运用各种分子生物学、细胞生物学方法的能力。

概述 1

实验1 特定miRNA-X的生物信息学分析 5

实验1(1) GenBank,EMBL,DDBJ等核酸序列数据库的使用 5

实验1(2) 利用BLAST软件进行双序列比对,利用Gene Ontology和KEGG等数据库注释基因的功能和参与的通路 8

实验1(3) 蛋白质相关数据库(序列数据库、蛋白质三维结构数据库)的使用 15

实验1(4) 对特定miRNA-X的生物信息分析 17

实验2 人工合成shRNA与pSuper载体的体外连接与转化 21

实验3 重组质粒DNA的抽提纯化、鉴定及测序 26

实验4 转染真核细胞及CCK-8法检测细胞活力 31

实验5 RNA的抽提纯化、鉴定及RT-PCR 35

实验6 Western blot检测蛋白质的表达及含量 44