第一篇 腈水合酶的理论基础 1
第1章 腈降解原核微生物多样性及腈转化 1
1.1 腈降解原核微生物多样性及对腈的降解 1
1.2 杆菌属多样性、产酶及腈底物的转化 3
1.3 红球菌属多样性、产酶及对腈类的生物转化 5
1.4 参考文献 8
第2章 生物转化和生物催化 12
2.1 生物转化和生物催化概念 12
2.2 生物转化和催化反应特点 12
2.3 生物转化和生物催化发展 13
2.4 腈类物降解微生物转化和酶催化 13
2.5 参考文献 15
第3章 原核微生物腈转化酶 17
3.1 腈转化酶在有机腈类物代谢中的作用 17
3.2 微生物腈转化酶组成和特点 18
3.3 微生物腈转化酶系统分析和确定 19
3.4 微生物宽泛底物特异性腈转化酶 19
3.5 催化底物区域选择性腈转化酶 20
3.6 催化底物立体选择性腈转化酶 20
3.7 腈转化酶氰基耐受型和热稳定性 20
3.8 参考文献 21
第4章 腈类物降解及腈水合酶研究概况 24
4.1 腈水合酶类型、氨基酸组成和亚基构成 24
4.2 腈类物的化学与生物转化 25
4.3 微生物腈水合酶的纯化研究 29
4.4 腈水合酶的结构特点 32
4.5 产腈水合酶菌株的改良 34
4.6 腈水合酶基因的克隆表达 35
4.7 腈水合酶的固定化研究 36
4.8 腈水合酶的应用进展 37
4.9 腈水合酶的研究展望 38
4.10 参考文献 39
第5章 腈水合酶特性及其合成调节与催化机制 52
5.1 微生物腈水合酶催化特点 52
5.2 微生物腈水合酶的合成调节 56
5.3 微生物腈水合酶的催化机理 57
5.4 影响腈水合酶活性的因素 58
5.5 参考文献 60
第二篇 腈水合酶的实践研究 67
第1章 绪论 67
1.1 微生物腈水合酶概述 67
1.2 产腈水合酶微生物分布和分离 69
1.3 腈水合酶蛋白性质 72
1.4 基于蛋白质晶体的腈水合酶分子结构 76
1.5 蛋白质大分子结构研究方法 81
1.6 复合诱变育种 85
1.7 腈水合酶在工业产品开发和环境修复中的应用 85
1.8 本课题的立题背景、意义及主要研究内容 87
1.9 参考文献 90
第2章 腈水合酶纯化和酶学性质研究 100
2.1 引言 100
2.2 实验材料 104
2.3 实验方法 108
2.4 结果与讨论 113
2.5 本章小结 125
2.6 参考文献 126
第3章 腈水合酶基因克隆与亚基N端测序 130
3.1 引言 130
3.2 实验材料 133
3.3 实验方法 136
3.4 结果与讨论 141
3.5 本章小结 154
3.6 参考文献 155
第4章 腈水合酶同源模建和底物对接研究 158
4.1 引言 158
4.2 实验材料 160
4.3 实验方法 163
4.4 结果与讨论 164
4.5 本章小结 175
4.6 参考文献 176
第5章 腈水合酶结晶条件优化 179
5.1 引言 179
5.2 实验材料 181
5.3 实验方法 182
5.4 结果与讨论 184
5.5 本章小结 196
5.6 参考文献 196
第6章 复合诱变选育高产腈水合酶菌株LUV30-06 199
6.1 引言 199
6.2 实验材料 200
6.3 实验方法 203
6.4 结果与讨论 206
6.5 本章小结 212
6.6 参考文献 212
第7章 结论 215
第8章 展望 217