1 食品中的微生物安全 1
1.1 食品安全概述 1
1.2 葡萄球菌食物中毒及其流行病学特点 2
1.2.1 葡萄球菌细菌性食物中毒 2
1.2.2 葡萄球菌的流行病学特性 3
1.3 葡萄球菌的致毒性 5
1.3.1 葡萄球菌肠毒素 5
1.3.2 杀白细胞毒素 13
1.3.3 表皮剥脱毒素 13
1.3.4 中毒休克综合征毒素 14
1.3.5 其他毒素 14
1.4 葡萄球菌的耐药性 14
1.4.1 葡萄球菌耐药现状 14
1.4.2 葡萄球菌耐药机制 15
1.5 葡萄球菌生物被膜 15
1.5.1 生物被膜概述 16
1.5.2 葡萄球菌生物被膜概述 17
1.5.3 生物被膜与食品安全 20
2 葡萄球菌的鉴定与快速检测 21
2.1 常规PCR技术 21
2.2 多重PCR技术 22
2.3 PCR方法扩增葡萄球菌相关基因 23
2.3.1 实验菌株 23
2.3.2 实验方法 23
2.3.3 检测结果分析 27
3 葡萄球菌肠毒素 33
3.1 葡萄球菌肠毒素的生物学性状 33
3.1.1 SEs的分型 33
3.1.2 SEs的结构 33
3.1.3 SEs的理化性质 34
3.1.4 SEs的超抗原作用 34
3.1.5 影响SEs产生的因素 34
3.1.6 金黄色葡萄球菌与SEs的关系 34
3.2 SEs的病理学特性 35
3.2.1 SEs的致病性 35
3.2.2 SEs中毒的临床表现 36
3.2.3 SEs的预防、诊断与治疗 36
3.3 SEs的应用 36
3.4 SEs的检测 37
3.4.1 动物实验法 37
3.4.1 免疫血清学方法 37
3.4.3 微生物仪器检测法 37
3.4.4 核酸扩增方法 38
4 葡萄球菌的耐药性研究 48
4.1 葡萄球菌的耐药表型 48
4.1.1 葡萄球菌的来源分布及耐药率趋势 49
4.1.2 MRSA研究进展 51
4.1.3 万古霉素耐药葡萄球菌研究进展 56
4.2 基因组岛SCCmec 59
4.2.1 SCCmec的结构 60
4.2.2 SCCmec的类型 61
4.2.3 SCCmec的分布 62
4.2.4 SCCmec的进化 63
4.2.5 SCCmec的检测与鉴定 64
4.3 葡萄球菌耐药机制的进化和发展 73
5 葡萄球菌的指纹图谱分析与基因组背景分析 75
5.1 葡萄球菌传播渠道和侵袭途径的研究 75
5.1.1 23株MRSA菌株的指纹图谱及基因相似性分析 75
5.1.2 6株MRSA菌株的指纹图谱分析 78
5.2 葡萄球菌基因来源与克隆起源的研究 80
5.2.1 23株携带基因盒dfrAl2-orF-aadA2的MRCNS菌株的指纹图谱及基因相似性分析 80
5.2.2 30株MRSA菌株的指纹图谱及基因相似性分析 81
5.2.3 179株MRSA菌株的指纹图谱及基因相似性分析 82
5.3 葡萄球菌基因组进化与流行变迁的研究 84
5.3.1 MRSA菌株的多位点序列分型 84
5.3.2 MRSA菌株的表面蛋白A基因分型 89
5.3.3 MRSA菌株的凝固酶基因分型 92
5.3.4 葡萄球菌基因组背景分析与国际流行变迁 95
5.4 金葡菌基因组背景与生物被膜的相关性 96
5.4.1 262株金葡菌指纹图谱及基因相似性分析 97
5.4.2 262株金葡菌基因组背景研究 99
金葡菌生物被膜的分子机制研究 105
6.1 金葡菌生物被膜形成能力的研究与分析 105
6.1.1 结晶紫染色法对流行性金葡菌生物被膜总量的定量分析 106
6.1.2 XTT染色法对流行性金葡菌生物被膜代谢活性的定量分析 107
6.1.3 结晶紫染色法与XTT染色法对比 108
6.1.4 耐药型金葡菌与敏感型金葡菌生物被膜形成能力对比 112
6.1.5 生物被膜形成能力的SCCmec基因组背景研究 114
6.1.6 小结 116
6.2 金葡菌生物被膜的基因型 117
6.2.1 金葡菌生物被膜相关基因 117
6.2.2 金葡菌生物被膜相关基因检测 118
6.2.3 金葡菌生物被膜基因型分析 125
6.2.4 基因组岛SCCmec与生物被膜基因型的相关性 127
6.2.5 金葡菌克隆株与生物被膜基因型的相关性研究 141
6.2.6 小结 145
6.3 金葡菌生物被膜的形成与发展 146
6.3.1 金葡菌生物被膜的形成 146
6.3.2 不同阶段金葡菌生物被膜的形成特性研究 147
6.3.3 基因型与生物被膜形成的相关性研究 151
6.3.4 小结 156
6.4 金葡菌生物被膜的抑制与清除 157
6.4.1 右旋龙脑和溶菌酶质量浓度对金葡菌被膜的影响 158
6.4.2 右旋龙脑和溶菌酶作用时间对金葡菌被膜的影响 159
6.4.3 单独及联合方法对金葡菌黏附的抑制作用 161
6.4.4 单独及联合方法对生物被膜形成的抑制作用 162
6.4.5 单独及联合方法对生物被膜成熟及分化的抑制作用 163
6.4.6 光学显微镜对生物被膜的观察 164
6.4.7 扫描电镜对生物被膜的观察 165
6.5 食品加工条件对金葡菌生物被膜形成的影响 166
6.5.1 温度对金葡菌生物被膜形成的影响 167
6.5.2 pH对金葡菌生物被膜形成的影响 168
6.5.3 TSB配比对金葡菌生物被膜形成的影响 169
6.5.4 葡萄糖质量分数对金葡菌生物被膜形成的影响 170
6.5.5 NaCl质量分数对金葡菌生物被膜形成的影响 171
6.5.6 小结 172
6.6 金葡菌生物被膜中羧甲基赖氨酸的生成 173
6.6.1 生物被膜中羧甲基赖氨酸的生成规律 173
6.6.2 食品加工过程中羧甲基赖氨酸的生成规律 185
6.6.3 小结 191
参考文献 192