1植物体细胞胚胎发生概况与原理 1
1.1 合子胚发生过程 2
1.1.1 被子植物合子胚发生 3
1.1.2 裸子植物合子胚发生 6
1.2 体细胞胚胎发生过程 6
1.2.1 胚性培养物的诱导与增殖 11
1.2.2 体细胞胚的成熟与发育 12
1.3 合子胚发生与体细胞胚胎发生的异同 14
1.3.1 形态与组织结构的异同点 14
1.3.2 生化方面的异同点 16
1.3.3 合子胚与体细胞胚胎发生的差异机制研究 18
1.4 体细胞胚胎发生的调控研究 19
1.4.1 体细胞胚胎发生的动态追踪 19
1.4.2 影响细胞分化的信号分子研究 20
1.5 体细胞胚胎发生研究历程 21
1.5.1 植物体细胞胚胎发生研究史上的里程碑 21
1.5.2 松树体细胞胚胎发生研究历程 23
2松树体细胞胚胎发生技术 29
2.1 松树体细胞胚胎发生研究的前期准备 30
2.1.1 体细胞胚胎发生研究实验室的建设 30
2.1.2 试剂耗材与培养基配制 36
2.2 松树体细胞胚胎发生外植体选择 38
2.2.1 材料的来源 38
2.2.2 不同合子胚发育阶段外植体 39
2.3 松树体细胞胚胎发生的诱导 42
2.3.1 诱导培养基配方 42
2.3.2 胚性愈伤组织的诱导 44
2.3.3 胚性愈伤组织的鉴别 45
2.4 松树体细胞胚胎维持与增殖 45
2.4.1 胚性愈伤的固态增殖 45
2.4.2 胚性愈伤的液态增殖 46
2.5 松树体细胞胚胎发育与植株再生 47
2.5.1 松树体细胞胚胎的成熟 47
2.5.2 松树体细胞胚胎萌发与植株再生 52
2.5.3 松树体细胞胚胎遗传稳定性分析 55
3体细胞胚胎的超低温冻存技术 57
3.1 体细胞胚胎超低温保存的原理与研究进展 58
3.1.1 体细胞胚胎超低温保存的概念 58
3.1.2 超低温保存的基本原理 60
3.1.3 超低温保存机制的研究 65
3.2 针叶树种胚性细胞常用的两种超低温保存技术 68
3.2.1 胚性细胞程序降温方法步骤 69
3.2.2 胚性细胞玻璃化方法步骤 71
3.2.3 保存材料的活性检测 74
4体细胞胚胎发生技术的应用与前景 77
4.1 体细胞胚胎发生技术在遗传改良上的应用 78
4.1.1 体细胞胚胎无性系应用于遗传测定 78
4.1.2 杂种后代的胚拯救 79
4.2 体细胞胚胎发生技术在人工培育上的应用 79
4.2.1 基于体细胞胚胎的无性系林业 79
4.2.2 体细胞胚胎苗木与人工种子的利用 82
4.3 体细胞胚胎发生介导的遗传转化 83
4.3.1 松树遗传转化的方法 83
4.3.2 基于体细胞胚胎发生的遗传转化体系 85
4.4 体细胞胚胎发生与药用蛋白质的生产 86
4.4.1 药用转基因植物细胞的利用 86
4.4.2 针叶树种药用蛋白的生产 87
参考文献 90