1绪论 1
1.1阿特拉津概述 1
1.1.1阿特拉津分布及使用现状 1
1.1.2阿特拉津的危害 2
1.1.3土壤中阿特拉津的生物修复技术 4
1.2丛枝菌根真菌概述及其多样性 9
1.2.1丛枝菌根真菌的结构 9
1.2.2 AM真菌多样性的研究 10
1.2.3 AM真菌与土壤结构 10
1.3逆境胁迫下植物组学方法研究概述 13
1.3.1代谢组学概述 13
1.3.2转录组学概述 17
1.3.3蛋白质组学概述 18
1.4苜蓿概述 20
参考文献 20
2黑龙江省农田阿特拉津残留土壤的丛枝菌根真菌多样性研究 28
2.1材料与方法 28
2.1.1材料采集与处理 28
2.1.2试验方法 29
2.2结果与分析 40
2.2.1阿特拉津残留检测 40
2.2.2土壤理化性质 42
2.2.3土壤酶活性 42
2.2.4玉米根部侵染率 44
2.2.5 AM真菌形态鉴定 45
2.2.6 AM真菌多样性 66
2.2.7 AM真菌孢子密度、物种丰度和土壤因子的关系 69
2.2.8 AM真菌单孢扩繁结果 70
2.2.9 AM真菌多样性测序结果及分析 72
2.3讨论 78
2.3.1 AM真菌的分离及形态学鉴定 78
2.3.2 AM真菌单孢扩繁 79
2.3.3土壤因子对AM真菌多样性的影响 79
2.3.4阿特拉津残留量对AM真菌侵染率的影响 81
2.3.5阿特拉津残留对AM真菌多样性的影响 81
2.3.6 AM真菌多样性研究方法 82
2.4本章小结 83
参考文献 83
3菌根对土壤中阿特拉津降解及土壤酶活性影响的研究 86
3.1材料与方法 86
3.1.1供试材料 86
3.1.2试验方法 86
3.2结果与分析 90
3.2.1苜蓿培养结果 90
3.2.2菌根侵染情况检测 91
3.2.3土壤中阿特拉津测定结果 92
3.2.4土壤中关键酶活性测定结果 94
3.3讨论 97
3.3.1苜蓿培养结果 97
3.3.2菌根侵染率测定分析 98
3.3.3土壤阿特拉津的提取分析 99
3.3.4土壤酶活性测定分析 100
3.4本章小结 100
参考文献 101
4丛枝菌根根际细菌群落对阿特拉津胁迫的响应 102
4.1材料与方法 102
4.1.1供试材料与盆栽设计 102
4.1.2试验方法 103
4.2结果与分析 104
4.2.1土壤理化性质与AM真菌侵染 104
4.2.2细菌群落构成 105
4.2.3细菌群落α多样性分析 106
4.2.4苜蓿接种摩西球囊霉与施加阿特拉津对细菌群落结构的影响 107
4.3讨论 108
4.4本章小结 110
参考文献 110
5阿特拉津胁迫苜蓿丛枝菌根生理特性研究 112
5.1材料与方法 112
5.1.1供试材料 112
5.1.2试验方法 112
5.2结果与分析 116
5.2.1苜蓿培养结果 116
5.2.2苜蓿生长指标的测定结果 117
5.2.3苜蓿光合特性分析 118
5.2.4苜蓿抗逆性生理指标分析 121
5.2.5苜蓿抗氧化防御指标分析 125
5.3讨论 132
5.3.1苜蓿培养结果及侵染情况分析 132
5.3.2阿特拉津对苜蓿生长指标的影响 133
5.3.3阿特拉津对苜蓿光合特性的影响 133
5.3.4阿特拉津对苜蓿抗逆性生理指标的影响 133
5.3.5阿特拉津对苜蓿抗氧化防御指标的影响 134
5.4本章小结 135
参考文献 135
6阿特拉津胁迫下苜蓿菌根转录组学分析 137
6.1材料与方法 137
6.1.1供试材料 137
6.1.2试验方法 137
6.2结果与分析 142
6.2.1 RNA提取结果 142
6.2.2 Illumina测序流程 142
6.2.3组装后功能注释结果 146
6.2.4试验组与对照组差异表达分析 147
6.2.5 RT-PCR检验结果 151
6.3讨论 152
6.3.1 RNA提取优化 152
6.3.2差异基因表达分析 153
6.3.3 RT-PCR检验 155
6.4本章小结 156
参考文献 156
7阿特拉津胁迫下苜蓿菌根蛋白质组学研究 157
7.1材料与方法 157
7.1.1供试材料 157
7.1.2试验方法 157
7.2结果与分析 159
7.2.1蛋白质浓度及SDS-PAGE初步检测 159
7.2.2苜蓿蛋白质的鉴定 160
7.2.3苜蓿蛋白的GO分析 166
7.2.4苜蓿蛋白的KEGG通路分析 169
7.3讨论 171
7.3.1阿特拉津降解相关蛋白 171
7.3.2阿特拉津胁迫应答相关蛋白 173
7.3.3参与植物免疫应答相关蛋白 175
7.3.4蛋白质翻译、合成及加工相关蛋白 176
7.3.5信号传递和生物进程相关蛋白 176
7.4本章小结 178
参考文献 179
8阿特拉津胁迫下苜蓿菌根代谢组学研究 182
8.1材料与方法 182
8.1.1供试材料 182
8.1.2试验方法 182
8.2结果与分析 186
8.2.1苜蓿培养情况 186
8.2.2不同时期土壤中阿特拉津的降解动态 187
8.2.3菌根根系分泌物对阿特拉津的降解能力 187
8.2.4菌根根系分泌物组分特征 194
8.2.5土壤中阿特拉津中间代谢产物分析 201
8.2.6苜蓿根内代谢物数据分析 203
8.3讨论 226
8.3.1根系分泌物对阿特拉津的降解分析 226
8.3.2根系分泌物组分鉴定 227
8.3.3不同处理苜蓿根际土壤中阿特拉津中间代谢产物 229
8.3.4苜蓿根内代谢物差异表达分析 229
8.4本章小结 230
参考文献 231