摘要 1
1 前言 5
2 文献综述 7
2.1 IL-6的生物学特性 7
2.1.1 IL-6的分子特征 7
2.1.2 IL-6受体系统与信号转导 8
2.1.3 IL-6的主要生物学功能 8
2.2 运动与肌源性IL-6 9
2.2.1 运动对机体IL-6水平的影响 9
2.2.2 运动时IL-6的主要来源——骨骼肌 12
2.3 肌源性IL-6在能量代谢调控中的生物学作用 13
2.3.1 肌源性IL-6促进脂代谢 13
2.3.2 肌源性IL-6促进肝脏葡萄糖输出 14
2.3.3 肌源性IL-6调节骨骼肌糖代谢 14
2.4 不同能量状态下运动诱导肌源性IL-6表达的信号调控机制 15
2.4.1 不同能量状态对运动诱导肌源性IL-6表达的影响 15
2.4.2 与不同能量状态下运动诱导肌源性IL-6表达有关的信号通路 16
2.5 成肌细胞在运动医学研究中的应用 22
2.5.1 成肌细胞的生物学特性 22
2.5.2 成肌细胞在肌肉骨骼系统疾病基因治疗中的应用 22
2.5.3 成肌细胞在骨骼肌基础研究中的应用 26
2.6 选题依据及实验总体设计 27
2.6.1 选题依据 27
2.6.2 实验总体设计 28
3 研究方法 31
3.1 实验材料与仪器 31
3.1.1 实验材料 31
3.1.2 主要试剂与耗材 31
3.1.3 主要仪器 32
3.2 实验方法 33
3.2.1 C2C12小鼠骨骼肌成肌细胞增殖及诱导分化培养 33
3.2.2 糖剥夺对C2C12细胞IL-6表达水平影响的实验方案 34
3.2.3 糖剥夺状态下抑制相关信号转导通路对IL-6表达水平影响的实验方案 35
3.2.4 Real-Time PCR测定C2C12细胞IL-6mRNA表达水平 37
3.2.5 双抗夹心ELISA法测定C2C 12细胞培养基IL-6蛋白浓度 40
3.3 统计学处理 42
4 实验结果 43
4.1 C2C12小鼠骨骼肌成肌细胞增殖及诱导分化培养 43
4.2 糖剥夺对C2C 12细胞IL-6表达水平的影响 46
4.2.1 糖剥夺对C2C 12细胞IL-6mRNA表达水平的影响 46
4.2.2 糖剥夺对C2Cl2细胞IL-6蛋白水平的影响 47
4.3 糖剥夺状态下抑制相关信号通路对C2C 12细胞IL-6表达水平的影响 48
4.3.1 糖剥夺状态下抑制ROS信号通路对C2C 12细胞IL-6表达水平的影响 48
4.3.2 糖剥夺状态下抑制p38MAPK信号通路对C2C 12细胞IL-6表达水平的影响 49
4.3.3 糖剥夺状态下抑制NF-κ B信号通路对C2C 12细胞IL-6表达水平的影响 50
4.3.4 糖剥夺状态下抑制不同信号通路对C2C12细胞IL-6表达水平影响的比较 52
5 讨论 54
5.1 C2C12小鼠骨骼肌成肌细胞诱导分化模型的建立 54
5.2 糖剥夺状态下肌源性IL-6表达及释放的规律 55
5.3 糖剥夺状态下调控肌源性IL-6表达的信号转导机制 57
5.3.1 糖剥夺状态下ROS信号通路对肌源性IL-6表达的影响 57
5.3.2 糖剥夺状态下p38MAPK信号通路对肌源性IL-6表达的影响 58
5.3.3 糖剥夺状态下NF-κ B信号通路对肌源性IL-6表达的影响 60
5.3.4 糖剥夺状态下调控肌源性IL-6表达的信号转导机制 61
5.4 小结 63
6 结论与展望 65
6.1 结论 65
6.2 展望 65
7 参考文献 66
8 主要缩略词表 78
9 附录 79
致谢 92