第一部分 流行性感冒病毒 1
第一章 概论及历史 1
第二章 流感病毒的分类与命名 5
一、概况 5
二、流感病毒的分类 5
三、流感病毒的命名 6
四、型与亚型的划分 7
五、代表性毒株 7
第三章 流感理化与生物学特性 11
一、概况 11
二、理化特性 11
三、生物学特征 11
第四章 流感病毒的形态、结构和功能 16
一、形态和结构 16
二、流感病毒基因及其产物 16
第五章 流感病毒的复制 34
一、概况 34
二、复制步骤 34
三、流产和无效复制 38
四、异常病毒复制和缺损病毒形成 38
五、干扰 39
第六章 流感病毒的变异 41
一、概况 41
二、致病性变异 41
三、相变异 42
四、抗原性变异 42
第七章 流感的发病机理和临床特征 48
一、发病机理 48
二、临床特征 48
三、不同人群对流感疾病的反映 49
四、基因因素对流感疾病的影响 50
五、病毒对流感疾病的影响 50
六、流感病毒感染中不多见的一些疾病 50
七、并发症 52
八、与流感易混淆的一些疾病 53
九、超额死亡率 54
第八章 流感的免疫 56
一、概况 56
二、流感免疫的特点 56
三、非发特异性免疫 56
四、特异性免疫 57
五、个体免疫与感染和发病的关系 60
六、人群免疫与流行发生和发展的关系 61
第九章 流感的流行病学 64
一、概况 64
二、流行史 64
三、传染源 65
四、传播途径 65
五、人群易感性 66
六、影响流感流行的因素 66
七、散发、爆发、流行及流行的含义 68
八、旧流行株为何在人群中消失 68
九、是否存在有流感流行中心 68
十、的分子流行病学 68
十一、实验室监测 69
第十章 流感病毒的生态学 71
一、概况 71
二、猪群中的流感病毒 72
三、马群中的流感病毒 73
四、禽中流感病毒 74
五、其它哺乳类动物中的流感病毒 74
六、流感病毒致病性的分子基础 75
第十一章 流感的防治 77
一、概况 77
二、流感美丽疫苗研究的现状 77
三、防治的药物 83
四、自我保护 86
第二部分 实验技术 87
第十一章 鸡胚培养法 87
一、概况 87
二、材料 87
三、鸡胚的结构与生理 87
四、接种技术 88
第十三章 动物接种法 91
一、概况 91
二、材料 91
三、接种途径 91
四、采血法 92
五、小鼠肺的采集及其悬液的制备 93
第十四章 组织培养法 94
一、概况 94
二、材料 94
三、组织培养技术 95
第十五章 空斑及空斑减少中和试验 97
一、概况 97
二、材料 97
三、操作步骤 98
四、感染倍数 99
第十六章 红细胞吸附及其抑制试验 100
一、概况 100
二、红细胞凝集试验 100
三、红细胞凝集抑制试验 102
第十七章 红细胞吸附及其抑制试验 107
一、概况 107
二、材料 107
三、操作步骤 107
第十八章 中和试验 109
一、概况 109
二、材料 109
三、操作步骤 109
第十九章 补体结合和间接补体结合试验 120
一、概况 120
二、材料 121
三、操作步骤 122
第二十章 对流免疫电泳技术 129
一、概况 129
二、材料 129
三、操作步骤 130
第二十一章 胎蛋白(Fetuin)底物提取法 131
一、概况 131
二、材料 131
三、提取步骤 131
第二十二章 流感病毒神经氨酸酶活性及其活性抑制试验 133
一、概况 133
二、材料 133
三、操作步骤 134
第二十三章 花生凝集素提取法 137
一、概况 137
二、材料 137
三、提取步骤 137
第二十四章 卵黄中抗流感病毒LG(LgY)的提取 139
一、概况 139
二、材料 139
三、提取步骤 139
第二十五章 凝集素神经氨酸酶活性(L-N)和凝集素神经氨酸酶活性抑制(L-NI)测定法 141
一、概况 141
二、材料 141
三、操作步骤 141
第二十六章 流感病毒的浓缩和纯化 143
一、概况 143
二、材料 143
三、具体方法与步骤 143
第二十七章 流感病毒单价抗原的获得及其免疫血清的制备 145
一、概况 145
二、材料 145
三、方法 145
第二十六章 琼脂免疫双扩散 149
一、概况 149
二、材料 150
三、实验步骤 150
第二十九章 单放射免疫扩散及火箭免疫电泳 152
一、概况 152
二、材料 153
三、实验步骤 154
第三十章 单放射免疫扩散溶血技术 158
一、概况 158
二、材料 159
三、实验步骤 160
四、注意事项 161
第三十一章 杂交瘤技术 162
一、概况 162
二、材料 162
三、操作步骤 163
第三十二章 酶联免疫吸附试验(ELISA) 167
一、概况 167
二、ELISA的主要组成部分 167
三、几种特殊的ELISA 171
四、ELISA在流感病毒快速诊断中的应用 172
第三十三章 免疫荧光技术 174
一、概况 174
二、材料 174
三、荧光抗体染色法 175
四、间接荧光抗体染色(IIF)在检测流感病毒中的应用 176
第三十四章 一种简便的受体破坏酶(RDE)试剂制备法 177
一、概况 177
二、材料 177
三、制备步骤 177
四、RED的质量鉴定 177
第三十五章 应用Directigen试剂快速诊断甲型流感病毒感染 179
一、概况 179
二、材料 179
三、实验程序 179
第三十六章 流感病毒感染小鼠肺重量测定法 180
一、概况 180
二、材料 180
三、实验步骤 180
第三十七章 流感病毒动物试验模型的快速建立法 182
一、概况 182
二、材料 182
三、实验步骤 182
第三十八章 流感病毒的分离与鉴定 185
一、概况 185
二、材料 185
三、实验步骤 186
第三十九章 流感的实验室诊断 189
一、概况 189
二、材料 189
三、方法与步骤 189
第四十章 流感病毒的传代与保存 192
一、概况 192
二、流感病毒的传代 192
三、流感病毒的保存 193
第四十一章 流感病毒RNA的提取法 194
一、概况 194
二、材料 194
三、方法与步骤 195
第四十二章 流感病毒核酸凝胶电泳 199
一、概况 199
二、材料 201
三、实验步骤 202
四、基因组单节段的分离 205
第四十三章 流感病毒基因组寡核苷酸图谱分析 206
一、概况 206
二、材料 206
三、实验步骤 207
第四十四章 流感病毒的核苷酸序列测定 211
一、概况 211
二、材料 212
三、方法与步骤 212
四、基因进化 223
第四十五章 流感病毒核酸斑点杂交(Dot llot)技术 227
一、概况 227
二、实验步骤 227
第四十六章 RT-PCR限制性内切酶图谱分析 234
一、概况 234
二、具体例子 234
三、实验步骤 238
四、在流感病毒研究中的应用 241
五、该法的优缺点 241
第四十七章 流感病毒结构蛋白的凝胶电泳(RAGE) 242
一、概况 242
二、材料 242
三、实验步骤 243
第四十八章 一些常用溶液的配制 245
一、生理盐水的配制 245
二、75%酒精的配制 245
三、Alsever氏液 245
四、钙镁盐水的配制 245
五、Versene溶液的配制 245
六、10%蛋清盐水的制备 245
七、脱脂奶的制备 245
八、3%谷氨酰胺的配制 246
九、10%十二(烷)酰甲基甘氨酸钠试剂 246
十、Glycine(甘油)sodium lauroyl sarcosinate(Glycine sarkosyl buffer) 246
十一、大磷酸盐缓冲液(Phosphate buffered saline, PBS,pH7.2) 246
十二、Hank's溶液 246
十三、5.6%NaHCO3的配制 247
十四、1%酚红溶液 247
十五、1:1000中性红溶液 247
十六、0.25%胰酶溶液的配制 247
十七、抗菌素的配制 247
十八、10倍Eagle's母液的配备 248
十九、Eagle's细胞生长液 249
二十、Eagle's细胞维持液 249