目 录 1
第一章 取样方法和样品的直接观察 1
Ⅰ．岩圈表层 1
一、取样地点的选择 1
二、取样方法 2
三、观察时的处理方法 3
Ⅱ．表层土壤及植物体 4
一、取样地点的选择 4
二、取样方法 5
三、观察时的处理方法 7
Ⅲ．海水和海底沉积物 14
一、取样地点的选择 14
二、取样方法 15
三、观察时的处理方法 16
Ⅳ．淡水、污泥、空气 17
一、取样地点的选择 17
二、取样方法 18
三、观察时的处理方法 20
Ⅴ．反刍动物第一胃 22
一、取样地点的选择 22
二、取样方法 23
三、观察时的处理方法 24
Ⅵ．发酵食品 28
一、取样地点的选择 28
二、取样方法 29
三、观察时的处理方法 31
第二章微生物的分离 37
Ⅰ．无菌操作 37
一、分离微生物时必备的器具 38
二、接种操作 39
一、干热灭菌 40
二、蒸汽灭菌 40
Ⅱ．灭菌 40
三、无菌箱 40
三、高压灭菌 41
四、过滤灭菌 42
五、药剂灭菌 42
Ⅲ．培养基的配制和种类 42
一、营养成分 42
二、其它因子 44
三、配制培养基的注意事项 45
四、培养基的种类 46
五、培养基的基本材料 47
一、好氧性微生物 49
Ⅳ．分离 49
二、厌氧性微生物 51
三、噬菌体 53
Ⅴ．富集培养 58
一、一般技术 58
二、土壤回流法 59
三、选择培养基 61
Ⅵ．显微操作法 61
二、机械操作方法 62
一、显微操作器的种类和特点 62
三、解剖针的制作方法 63
四、单胞分离法 64
五、四分体分析 65
Ⅶ．膜过滤 65
一、无菌过滤器 66
二、操作 67
Ⅷ．细胞分部法 67
第三章菌种保藏 69
Ⅰ．菌株和培养物、保藏 69
一、传代培养保藏 70
Ⅱ．菌种保藏方法 70
二、降低代谢速度保藏 71
三、冷冻保藏 72
四、干燥保藏 75
第四章微生物细胞的观察 88
Ⅰ．光学显微镜的一般操作方法 88
一、光学部分 88
二、机械部分 91
三、盖玻片和载玻片 92
五、显微镜的种类 93
四、照明 93
Ⅱ．显微镜照相 95
一、一般的显微镜摄影法 95
二、彩色照相 98
Ⅲ．微生物细胞的观察 99
一、细胞大小的测定 99
二、用血球计数板测定细胞数 100
三、未染色样品的观察 100
四、染色样品的观察 101
五、载片培养 104
Ⅳ．电子显微镜 105
三、超薄切片法 107
一、投影法 107
二、负染法 107
四、冰冻蚀刻法 111
五、扫描电子显微镜 112
二、深层培养 113
第五章培养 114
Ⅰ．培养的一般问题 114
一、培养基的选择 114
二、种龄和接种量 114
三、培养时间 115
一、表面培养 116
Ⅱ．培养 116
四、培养装置和温度 116
三、同步培养 122
四、连续培养 127
五、透析培养 134
六、研究细胞分化的培养方法 138
Ⅲ．细胞的收获方法 141
一、收获时的一般注意事项 141
二、离心法 142
四、特殊的菌体收集方法 143
三、用纱布或滤纸过滤收集菌体 143
五、微生物悬浊液的制备和保藏 144
六、培养液中高分子物质的浓缩 145
第六章生理学性状的观察方法 149
Ⅰ．增殖的测定方法 149
一、细胞总数的测定 149
二、活细胞数的测定 152
三、比色法和比浊法 154
四、重量测定 155
五、叠集细胞体积的测定 155
七、统计处理法 156
六、ATP的微量测定 156
Ⅱ．生理活性的测定方法 164
一、膜透性 165
二、呼吸与发酵 167
三、光合作用和光化学反应 172
四、固氮作用 176
Ⅲ．表面性状的测定方法 178
一、细胞表面的带电状态 178
二、与固体表面的相互作用 179
Ⅳ．生长抑制物质活性的测定方法 180
一、稀释法 180
二、扩散法 181
三、自显术 184
四、微生物测定法 185
第七章生物化学研究方法基础 192
Ⅰ．细胞成分的提取和定量 192
一、蛋白质 192
二、核酸 194
三、脂类 196
四、糖类 198
一、一般注意事项 200
Ⅱ．细胞结构的分部分离 200
二、细胞的破碎方法 201
三、细菌细胞结构物的制备方法 206
四、酵母菌和霉菌细胞结构的制备方法 211
第八章遗传学研究法 217
Ⅰ．突变 217
一、突变的诱发 217
二、突变菌株的分离 221
三、营养缺陷型菌株所需营养物的确定 227
四、突变的分类 228
一、细菌的杂交 231
Ⅱ．杂交方法 231
二、酵母菌的杂交 241
三、霉菌的杂交 249
四、原生动物的杂交 261
第九章鉴定 269
Ⅰ．目的 269
Ⅱ．各类微生物的检索表 270
一、细菌 270
二、厌氧细菌 277
三、放线菌 278
四、霉菌 286
五、酵母菌 292
六、微细藻类 296
七、原生动物 298
Ⅲ．鉴定的化学方法 302
一、免疫学方法 302
二、化学方法 306
附录一实验室和实验室设备 319
附录二培养基 324
附录三染色液 342
附录四缓冲液 344
索引 346