第一章 绪论 1
第一节 基因工程的概念 1
第二节 基因工程的诞生和发展 1
第三节 基因工程的研究内容 3
第四节 基因工程的应用 5
第五节 基因工程的发展前景 8
第六节 植物基因工程进展和存在的问题 9
第二章 基因工程的工具酶 12
第一节 概述 12
第二节 限制性内切核酸酶 13
第三节 DNA连接酶 21
第四节 DNA聚合酶 25
第五节 DNA甲基化酶 27
第六节 DNA及RNA的修饰酶 29
第七节 核酸酶 30
第三章 克隆载体 33
第一节 质粒的概念和基本特性 33
第二节 常用的质粒载体 36
第三节 质粒DNA的提取 41
第四节 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 43
第四章 目的基因的分离 45
第一节 基因克隆的意义和策略 45
第二节 已知序列为基础的克隆方法 46
第三节 cDNA文库构建和筛库法获得目的基因 48
第四节 RACE方法获取基因的全长序列 54
第五节 图位克隆和转座子标签法克隆基因 56
第六节 以表达差异为基础的基因克隆方法 59
第五章 植物基因工程的目的基因 66
第一节 抗虫基因 66
第二节 抗病基因 79
第三节 抗非生物胁迫的基因 93
第四节 雄性不育基因 107
第五节 改良作物品质的基因 108
第六节 改良植物其他性状的基因 116
第六章 植物基因工程表达载体 125
第一节 植物基因工程载体的种类 125
第二节 致瘤农杆菌Ti和发根农杆菌Ri质粒 126
第三节 植物转化载体构建 132
第四节 抑制、沉默目标基因的表达载体 137
第五节 无标记植物表达载体 143
第七章 目的基因的转化 147
第一节 植物基因转化受体 147
第二节 农杆菌介导的植物转基因方法 148
第三节 直接转化方法 152
第四节 种质系统转化法 155
第五节 病毒载体转化 156
第八章 转基因植物的检测与鉴定 160
第一节 PCR检测 160
第二节 报告基因的表达检测 163
第三节 Southern杂交鉴定 170
第四节 Northern杂交鉴定 179
第五节 外源基因表达蛋白的检测 182
第六节 分子标记及生物芯片技术检测 188
第九章 转基因植物的遗传稳定性及表达调控 190
第一节 外源基因在植物基因组上的整合特点 190
第二节 外源基因整合的遗传学效应和转基因沉默 198
第三节 转基因植物中外源基因的遗传稳定性 206
第四节 外源基因在植物基因组中的表达特点 213
第五节 转化外源基因的表达调控 222
第十章 转基因植物的安全性评价 233
第一节 生物安全性评价概述 233
第二节 转基因植物食品的安全性评价 238
第三节 转基因植物生态环境的安全性评价 243
第四节 转基因植物的安全性评价管理办法 246
附录一 基因工程安全管理办法 251
附录二 农业转基因生物安全评价管理办法 256
附录三 农业转基因生物进口安全管理办法 272
附录四 农业转基因生物标识管理办法 275
参考文献 277