目录 1
一、糖的定量测定 1
(一)根据糖的还原性进行测定 1
1.3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法 1
2.Somogyi-Nelson法 2
(二)将糖转变成糖醛衍生物进行测定 3
1.地衣酚-硫酸法 3
2.戊糖的测定(地衣酚法) 5
3.苯酚-硫酸法 6
4.蒽酮-硫酸法 7
(三)酶法测定糖 8
葡萄糖氧化酶法测葡萄糖 8
二、糖的色谱法和电泳法 10
(一)糖的纸色谱 10
1.单糖和双糖的纸色谱 10
2.寡糖和多糖的纸色谱 18
3.多羟基醇的纸色谱 18
4.糖酸的纸色谱 19
6.糖内酯的纸色谱 20
5.氨基糖的纸色谱 20
7.糖磷酸酯的纸色谱 21
(二)糖的柱色谱 23
1.糖的活性炭柱分离 23
2.蜂蜜中寡糖的炭柱分级法 25
3.糖的离子交换树脂柱分离 26
(三)糖的亲和色谱 29
花生凝集素(PNA)亲和柱在糖分离中的试用 34
(四)糖的气相色谱 38
1.糖的三甲基硅醚衍生物 39
2.糖腈乙酸酯衍生物 41
3.糖醇乙酸酯衍生物 43
4.糖的三氟乙酸酯衍生物 46
5.果糖与葡萄糖或甘露糖共存时的气相色谱定量法 48
(五)糖的高效液相色谱分析 49
1.单糖和双糖的分析 51
2.寡糖的分离和测定 58
3.糖肟全苯甲酸酯紫外标记法分离和测定微量单糖和双糖 62
(六)糖的薄层色谱 65
(七)糖的电泳法 68
1.红细胞膜上唾液酸的等速电泳 68
2.多糖的滤纸电泳 70
3.多糖的玻璃纤维纸电泳 72
4.多糖的醋酸纤维薄膜电泳 73
5.多糖的凝胶电泳 73
三、糖链结构分析方法 76
1.测定多糖分子量的方法原则 77
(一)多糖的分子量测定和纯度鉴定 77
2.渗透压法测定多糖分子量 81
3.蒸气压法测定多糖分子量 84
4.端基法测定多糖分子量 86
5.光散射法测定多糖分子量 90
6.粘度法测定多糖分子量 97
7.高效液相色谱法测定多糖分子量 101
8.多糖的纯度鉴定 108
9.超过滤法及其在多糖化学研究中的应用 111
1.糖的红外光谱法 121
(二)糖的红外光谱、质谱和核磁共振 121
2.糖的质谱法 128
3.高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)脱机联用进行低聚糖 146
的结构序列分析 146
4.1H和13C核磁共振光谱在多糖上的应用 150
(三)用于糖类结构分析的化学方法 155
1.多糖的部分水解 155
2.O-糖苷键的稀碱水解(β-消除反应) 158
3.N-糖苷键的肼解法 160
4.高碘酸氧化 163
5.Smith降解 164
6.甲基化反应(Hakomori,箱守仙一郎法) 166
7.甲基化反应(硫酸二甲酯法) 171
(四)糖苷酶及其底物的制备和测定 173
1.一种产多糖链内切酶的微生物的培养以及内切酶作用条件 173
2.从褶皱链霉菌(Streptomycesplicatus)分离提纯β-N-乙酰氨基葡萄糖苷内切酶-H 175
3.β-甘露糖苷酶的分离提纯 179
4.从土壤细菌中初步分离α-甘露糖苷酶和α(1→6)甘露聚 182
糖内切酶 182
5.枯草杆菌α-淀粉酶的分离纯化 185
6.红色红曲霉α-葡萄糖苷酶的分离纯化 188
7.茁霉多糖酶的分离纯化 192
8.β-葡萄糖苷酶的分离纯化 195
9.硝基苯酚糖苷化合物的有机合成 200
各论 209
一、微生物多糖和植物多糖 209
(—)细菌胞外多糖的纯化 209
粪产碱杆菌产粘变株(Alcaligenes faecalisvar.myxogenes)胞外酸性多糖的纯化 210
(二)真菌多糖和植物多糖的研究方法 211
1.斜顶菌(ClitopluscaespitosusPK)水溶性多糖的分离提纯 213
2.香菇(Lentinusedodes)中碱溶性多糖的分离提纯 214
3.大蒜球根中多糖的提取 215
(三)酵母甘露聚糖的研究方法 217
1.酵母甘露聚糖的分离提取 218
2.选择性的乙酰解反应 220
3.免疫学方法在酵母甘露聚糖结构研究中的应用 222
二、海藻多糖 226
1.褐藻中单糖的气相色谱分析 227
(一)海藻和海藻多糖中单糖成分的测定 227
2.红藻中D-半乳糖和3,6-内醚半乳糖的气相色谱分析 229
3.红藻中D-半乳糖和3,6-内醚半乳糖的比色分析 231
(二)红藻多糖 234
1.红藻多糖的分离与提取 236
2.红藻多糖物理性质的测定 242
(三)褐藻多糖 247
1.褐藻胶 247
2.褐藻糖胶 253
3.海带淀粉 255
三、蛋白聚糖 259
(一)蛋白聚糖(PG)和糖胺聚糖(GAG)的分离提取 263
1.离子交换层析法分离蛋白聚糖(PG) 264
2.糖胺聚糖(GAG)的一般提取方法 266
3.透明质酸的分离提取 267
4.4-硫酸软骨素的分离提取 269
5.6-硫酸软骨素的分离提取 270
6.软骨素的制备 272
7.硫酸皮肤素的分离提取 273
8.肝素的分离提取 275
9.硫酸类肝素(或硫酸乙酰肝素)的分离提取 277
10.硫酸角质素的分离提取 279
11.刺参粘多糖的分离提取 281
(二)糖胺聚糖(GAG)的组成分析及定量测定 283
1.糖胺聚糖(GAG)的电泳法 284
2.糖胺聚糖(GAG)各组分的定量分析 290
(三)培养的动物细胞中蛋白聚糖(PG)的研究方法 299
1.细胞培养和标记蛋白聚糖(PG)的提取 300
2.离子交换柱层析分离蛋白聚糖(PG) 303
3.凝胶过滤柱层析分离蛋白聚糖(PG) 304
4.氯化铯(CsCl)等密度超速离心法分离蛋白聚糖(PG) 305
5.糖胺聚糖(GAG)和寡糖的分离、鉴定及蛋白聚糖(PG) 306
结构的分析 306
6.硫酸二糖的分析 312
四、神经鞘糖脂 313
(一)神经节 苷脂的分离和纯化 318
1.分配分离法 318
2.离子交换法 320
1.神经节 苷脂的定量——唾液酸含量测定 322
(二)神经节 苷脂的鉴定 322
2.薄板层析(TLC)法 325
(三)中性糖脂的分离和纯化 327
五、凝集素 330
(一)凝集素的分离、纯化和鉴定 333
1.凝集素的分离、纯化 333
2.凝集素活力及纯度鉴定的一般方法 341
(二)标记凝集素的制备 345
1.放射性标记凝集素 345
2.酶标记凝集素 349
3.荧光标记凝集素 351
4.铁蛋白标记凝集素 354
(三)固相化凝集素的制备 355
1.Sepharose4B的活化 355
2.ConA-Sepharose4B的制备 356
3.RCA-Sepharose4B的制备 357
4.RCA-Sepharose4B(带己二胺“臂”)的制备 357
附录有关糖类生化的文献查阅 360
后记 370