目 录 1
引 言 1
第一章细胞杂交瘤的实验技术 1
第一节淋巴细胞杂交瘤的发展简史 1
第二节杂交瘤技术的原理 2
第三节杂交瘤技术的基本条件 4
(一)选择骨髓瘤细胞 4
(二)选择免疫动物 7
(三)HAT培养液 8
(四)细胞融合剂 10
(五)胎牛血清 13
(六)饲养细胞 14
(七)免 疫 15
第四节杂交瘤技术的基本操作方法 16
(一)免疫小鼠脾细胞悬液的收集 17
(二)小鼠腹腔巨噬细胞的收集 18
(三)小鼠骨髓瘤细胞的准备 18
(四)细胞融合的步骤与方法 19
第五节杂交瘤细胞的筛选 23
(一)选择筛选方法的原则 24
(二)常用筛选方法简介 25
第六节杂交瘤细胞的克隆化 31
(一)有限稀释法 32
(三)显微操作法 34
(二)软琼脂培养法 34
(四)应用荧光激活细胞分类器 35
第七节单克隆抗体的鉴定 36
(一)单克隆抗体的Ig类型鉴定 36
(二)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 36
(三)凝胶等电点聚焦电泳 38
第八节单克隆抗体的大量制备 41
(一)体外培养法 41
(二)动物体内培养法 42
(三)微囊技术 43
第九节杂交瘤细胞的冷冻保存 43
第十节单克隆抗体的分离、纯化与保存 45
(一)盐析法纯化单克隆抗体 46
(二)亲和层析法纯化单克隆抗体 47
(三)DEAE离子交换层析法 48
(四)蛋白质A-琼脂糖珠亲和层析法 49
(五)单克隆抗体的保存 50
第十一节小鼠单克隆抗体的某些理化性质 51
第十二节关于预防污染问题 52
第二章单克隆抗体的应用 54
第一节在某些基因调控方面的应用 54
(一)绘制人类基因图 54
(二)DNA复制检测 55
(三)遗传缺陷的基因互补 56
(四)控制肿瘤的恶性行为 57
第二节应用单克隆抗体寻找特异性抗原 58
第三节单克隆抗体在细胞免疫 59
方面的研究及应用 59
(一)抗人T细胞单克隆抗体的分类 59
(二)抗人T细胞单克隆抗体在人 60
T细胞研究中的应用 60
第四节单克隆抗体在体液免疫方面的研究 62
(一)抗人IgG单克隆抗体 62
(二)抗人IgA单克隆抗体 63
(三)抗人IgE单克隆抗体 64
第五节单克隆抗体在肿瘤学中的应用 64
(一)应用单克隆抗体探讨肿瘤抗原 64
抗原的初步成果 65
(二)应用单克隆抗体探索肿瘤 65
(三)单克隆抗体在肿瘤治疗、 78
诊断方面的应用 78
第六节单克隆抗体在病毒方面的应用 81
(一)流感病毒 82
(二)乙型肝炎病毒 82
(三)脊髓灰质炎病毒 84
(四)其 它 85
第七节单克隆抗体在寄生虫方面的 86
研究与应用 86
第八节单克隆抗体在钩端螺旋体 88
方面的研究 88
方面的应用 89
第十节单克隆抗体在组织移植 89
第九节 单克隆抗体在霍乱毒素 89
方面的研究 89
第十一节单克隆抗体在自身抗体 91
方面的研究与应用 91
第十二节单克隆抗体用于肌无力的研究 93
第十三节单克隆抗体用于硬皮病的研究 94
第十四节单克隆抗体在干扰素方面的应用 95
第十五节单克隆抗体在酶学中的应用 95
(一)抗人前列腺酸性磷酸酶的 95
单克隆抗体 95
(二)抗β-半乳糖苷酶的单克隆抗体 96
受体及其它领域的应用 98
第十六节单克隆抗体在激素、 98
结语 101
附录 104
(一)细胞杂交瘤技术中主要试剂配制 104
(二)小鼠骨髓瘤细胞的培养方法 106
(三)无血清培养液的应用 107
(四)金黄色葡萄球菌蛋白A 108
的纯化方法 108
(五)荧光抗体标记技术 109
(六)杂交瘤技术流程概要 111
(七)本书英语缩写检索 112
参考文献 114