第一章 绪论 1
第一节 组织化学的研究内容和原理 1
一、组织化学的兴起与发展 1
二、组织化学的研究内容 2
三、组织化学技术的原理 3
第二节 组织化学方法的基本要求和注意事项 3
一、基本要求 4
二、注意事项 4
第二章 组织制备 5
第一节 取材 5
一、注意事项 5
二、样品大小 5
第二节 固定 5
一、固定的目的 6
二、固定的对象 7
三、固定剂的性质 7
四、固定的方法 7
五、固定的注意事项 8
六、常用固定剂 9
第三节 洗涤、脱水和透明 18
一、洗涤 18
二、脱水 19
三、透明 19
第四节 包埋 20
一、石蜡包埋法 20
二、电镜包埋剂 21
第五节 切片 23
一、石蜡切片法 23
二、冰冻切片法 24
三、其他切片法 26
第六节 切片贴附和封固 26
一、贴附和贴附剂 26
二、封固和封固剂 27
第七节 缓冲液 28
一、缓冲液的组成及应用 28
二、摩尔（克分子）溶液 29
第三章 糖类及其衍生物的组织化学 31
第一节 分类 31
一、糖类化学 31
二、糖类的组织化学分类 32
第二节 糖类的组织化学方法 35
一、糖原的显示法 35
二、糖共轭物（黏蛋白类）的显示法 39
三、纤维素及类纤维素的显示法 43
四、淀粉样物质的显示法 45
第四章 核酸和核蛋白组织化学 47
第一节 显示DNA的方法 47
一、Feulgen反应 47
二、改良Feulgen反应 49
第二节 对比显示DNA和RNA的方法 49
一、甲基绿-派洛宁法 49
二、吖啶橙反应 50
第三节 核酸的消化与提取 51
一、DNA的消化 51
二、RNA的消化 52
三、过氯酸提出法 53
四、三氯乙酸提出法 53
第四节 显示核蛋白的方法 53
一、氨银法染组氨酸 53
二、肝素-阿尔新蓝反应 54
第五节 核仁组成区嗜银蛋白染色 55
一、Ag-NOR经典染色法 55
二、李氏Ag-NOR改良法 56
第五章 脂类组织化学 57
第一节 脂类组织化学概述 57
一、分类 57
二、固定 57
三、常用组化显示法 57
第二节 物理方法显示脂类 58
一、苏丹黑法显示中性脂肪 58
二、溴-苏丹黑法显示脂类 59
三、油红O显示中性脂肪 60
四、偏振光显微镜检测法 61
第三节 化学方法显示脂类 61
一、四氧化锇显示不饱和脂类 61
二、硫酸尼罗蓝显示中性及酸性脂类 62
三、过氯酸-萘醌（PAN）法显示胆固醇及胆固醇酯 63
四、酸性苏木红显示磷脂法 64
第六章 蛋白质组织化学 67
第一节 蛋白质的组化显示原理 67
第二节 蛋白质的组织化学显示方法 68
一、茚三酮-Schiff法显示氨基酸 68
二、米伦反应显示酪氨酸 69
三、坂口反应显示精氨酸 69
四、DDD反应显示硫氢基 70
五、汞-橘黄法显示巯基 71
六、过甲酸-阿尔新蓝显示二硫键 72
第七章 酶类组织化学 74
第一节 酶及其组织化学的基本理论 74
一、生物体内酶的分类 74
二、酶组织化学的意义 75
三、酶的组化反应 75
四、影响酶组化显示效果的因素 78
第二节 几种常见酶的组织化学 79
一、碱性磷酸酶 79
二、酸性磷酸酶 81
三、葡萄糖-6-磷酸酶 83
四、硫胺素焦磷酸酶 84
五、非特异性酯酶 85
六、琥珀酸脱氢酶 86
七、乳酸脱氢酶 88
八、3β-羟甾体脱氢酶 89
九、三磷酸腺苷酶 90
十、明胶薄膜法显示顶体酶 92
第八章 免疫组织化学的基本理论 94
第一节 免疫学基础 94
一、抗原 94
二、抗体 95
第二节 常用标记物及其检测 98
一、荧光染料 98
二、酶 99
三、生物素 103
四、胶体金 104
第三节 基本条件 110
一、组织抗原的保存与暴露 110
二、特异性抗体 115
三、免疫组织化学常用试剂 118
第九章 常用的免疫组织化学方法 123
第一节 基本原理 123
一、直接法 123
二、间接法 124
三、未标记抗体酶法 124
四、标记抗原法 126
第二节 免疫荧光法 126
一、原理 126
二、染色方法 127
三、对照试验 128
四、结果的观察与记录 129
五、非特异性荧光的消除 129
第三节 免疫酶法 131
一、原理 131
二、酶标抗体法 131
三、PAP法 132
四、EnVision法 135
第四节 抗生物素蛋白-生物素法 135
一、原理 136
二、ABC法 136
三、SP法 139
第五节 蛋白A法 140
一、蛋白A的性质及应用 140
二、染色方法 142
第六节 免疫金法与免疫金银法 142
一、免疫金法 143
二、免疫金银法 144
第十章 免疫组织化学的特异性与敏感性 148
第一节 特异性与特异性染色 148
一、特异性 148
二、特异性染色与非特异性染色 148
第二节 对照试验 149
一、阳性对照 149
二、阴性对照 150
第三节 提高免疫组织化学敏感性的方法 152
一、增强特异性染色 152
二、背景染色的来源及消除 155
第十一章 免疫组织化学双重染色技术 158
第一节 连续切片双重染色法 158
第二节 免疫荧光双重染色法 158
一、直接法 159
二、间接法 159
第三节 免疫酶双重染色法 160
一、基本考虑 160
二、抗体洗脱 161
三、第一抗体来自不同种属动物的双重染色 164
四、第一抗体来自同种属动物的双重染色 165
五、免疫荧光和免疫酶双重染色法的比较 168
第四节 免疫酶-免疫荧光双重染色法 169
第五节 免疫酶-免疫金（银）双重染色法 169
第十二章 凝集素组织化学 171
第一节 凝集素的特性与应用 171
一、组织中糖的结构 171
二、凝集素的特性 172
三、凝集素的应用 175
第二节 凝集素组织化学方法 175
一、基本原理与条件 176
二、直接法 177
三、抗体法 178
四、生物素法 180
五、糖-凝集素-糖夹层法 181
六、电镜方法 182
七、对照试验 184
第三节 凝集素的标记与抗体制备 185
一、凝集素和糖蛋白的标记 185
二、凝集素抗体的制备 186
第十三章 原位杂交组织化学 188
第一节 原位杂交组织化学的基本原理 188
第二节 探针制备 189
一、探针的种类及选择 190
二、探针标记的原理和方法 192
第三节 原位杂交组织化学的程序 193
一、基本流程 193
二、使用DNA探针检测石蜡切片中mRNA 193
三、使用地高辛标记的cRNA探针检测石蜡切片中mRNA 204
第四节 影响原位杂交的因素 207
一、探针的浓度 207
二、杂交温度 207
三、杂交反应的时间 208
四、杂交液 208
五、严格度 209
第五节 对照试验 209
一、组织对照 209
二、探针对照 210
三、杂交反应对照 210
四、检测系统对照 211
第十四章 原位PCR技术 212
第一节 原位PCR技术的基本原理 212
第二节 原位PCR技术的基本类型 213
一、直接法原位PCR技术 213
二、间接法原位PCR技术 213
三、原位反转录PCR 213
第三节 原位PCR技术的程序 214
一、标本的制备 214
二、原位聚合酶链反应 215
三、原位检测 215
四、直接法原位PCR技术的操作步骤 215
五、间接法原位PCR技术的操作步骤 216
六、对照试验 216
第四节 原位PCR技术的应用 217
一、用于外源性基因的检测 217
二、用于内源性基因的检测 217
第十五章 电镜细胞化学技术 218
第一节 电镜酶细胞化学技术 218
一、电镜酶细胞化学程序 218
二、电镜酶细胞化学举例 223
三、细胞器的电镜酶细胞化学 227
第二节 电镜免疫细胞化学技术 232
一、免疫电镜的技术要求 232
二、免疫酶电镜技术 237
三、免疫金电镜技术 240
四、免疫电镜双重染色技术 242
五、扫描免疫电镜技术 246
六、冷冻蚀刻免疫电镜技术 249
第十六章 组织化学和免疫组织化学的定量测定 252
第一节 显微分光光度术 252
一、显微分光光度计的工作原理 252
二、显微分光光度术 253
三、显微分光光度术的应用 253
第二节 图像分析术 254
一、图像分析仪的基本原理 255
二、图像分析仪的工作程序 255
三、图像分析系统在生物医学研究中的应用 257
第三节 流式细胞术 257
一、流式细胞仪的主要构成和原理 257
二、流式细胞术的样品制备 258
三、流式细胞术的应用 262
第四节 激光扫描共焦显微镜术 263
一、激光扫描共焦显微镜术的基本原理和特点 264
二、激光扫描共焦显微镜的功能 265
三、几种荧光染料的染色方法 267
主要参考文献 270
附录 274
附录1 常用缓冲液的配制 274
附录2 免疫组织化学常用抗体标记谱 282