第一章 基础实验 1
Ⅰ．显微镜技术 1
1-1 普通光学显微镜的使用 1
1-2 暗视野显微镜的使用 6
1-3 相差显微镜的使用 8
1-4 显微测微计的使用 11
Ⅱ．微生物的形态构造 14
1-5 细菌的涂片及简单染色法 14
1-6 革兰氏染色法 16
1-7 抗酸性染色法 19
1-8 细胞壁染色法 21
1-9 荚膜染色法 23
1-10 鞭毛染色法 26
1-11 芽孢染色法 30
1-12 细胞内含物的染色法 32
1-13 放线菌形态特征的初步观察 34
1-14 酵母菌细胞核的染色 36
1-15 根霉假根的观察 37
1-16 根霉接合孢子的观察 39
1-17 载片培养及其观察方法 40
1-18 昆虫病毒多角体的观察 42
1-19 四大类微生物菌落形态的比较和识别 43
Ⅲ．培养基的配制和灭菌 46
1-20 培养基的配制 46
1-21 加压蒸汽灭菌法 51
1-22 干热灭菌法 52
1-23 过滤除菌法 54
1-24 微生物的接种方法 56
Ⅳ．接种、分离和纯化 56
1-25 稀释涂布和平板划线分离法 65
1-26 真菌的单孢子分离法 70
1-27 用厌氧袋法分离培养丙酮丁醇梭菌 73
Ⅴ．生长繁殖和若干生理生化反应的测定 78
1-28 微生物的计数 78
1-29 细菌生长曲线的测定 85
1-30 细菌的生理生化反应——试纸法 88
Ⅵ．菌种保藏 91
1-31 简易常用保藏法 91
1-32 冷冻干燥保藏法 94
参考文献 96
第二章 微生物的分离与鉴定 97
Ⅰ．细菌 97
2-1 芽孢杆菌、肠道杆菌、假单胞菌及球菌的分离纯化 97
2-2 芽孢杆菌属（Bacillus）种的鉴定 101
2-3 肠杆菌科（Enterobacteriaceae）各属的鉴定 115
2-4 假单胞菌属（Pseudomonas）的鉴定 122
2-5 革兰氏阳性球菌的鉴定 133
2-6 放线菌的分离 164
Ⅱ．放线菌 164
2-7 放线菌菌体形态的观察 167
2-8 放线菌细胞化学组分的测定 174
2-9 放线菌抗菌谱的测定 178
2-10 放线菌分科、分属的鉴定 180
2-11 链霉菌属的分群 187
2-12 放线菌种的鉴定 189
Ⅲ．酵母菌 197
2-13 酵母菌的分离 197
2-14 酵母菌的分属鉴定 200
2-15 酵母菌种的鉴定 205
Ⅳ．丝状真菌 232
2-16 小型丝状真菌的分离 232
2-17 水霉科（Saprolegniaceae）常见属的分离与鉴定 236
2-18 毛霉科（Mucoraceae）常见种的鉴定 241
2-19 散囊菌目（Eurotiales）常见代表种的鉴定 246
2-20 球壳菌目（Sphaeriales）常见代表种的鉴定 249
2-21 曲霉属（Aspergillus）的分群（种群） 253
2-22 青霉属（Penicillium）的分系（种系） 258
2-23 镰孢菌属（Fusarium）种的鉴定 267
2-24 半知菌亚门（Deuteromycotina）常见种的鉴定 273
参考文献 278
第三章 微生物的生理生化 281
Ⅰ．青霉素发酵 281
3-1 青霉素发酵 281
3-2 青霉素效价的生物测定 283
3-3 青霉素发酵过程中糖的利用 290
3-4 青霉素发酵过程中氨态氮的变化 294
3-5 前体物质对青霉素生物合成的影响 298
3-6 天冬氨酸和苏氨酸对赖氨酸生物合成的代谢调节 302
Ⅱ．微生物的代谢调节 302
Ⅲ．瓦勃氏定容呼吸测定仪的应用 308
3-7 瓦勃氏呼吸仪反应瓶常数的测定 308
3-8 应用瓦勃氏呼吸仪测定NaHCO3释放CO2的体积 312
3-9 大肠杆菌的呼吸作用——耗氧速度的测定及碘乙酸的影响 319
3-10 发酵液中L-谷氨酸的定量测定 322
Ⅳ．抗生素筛选中的早期鉴别 335
3-11 抗生素的一般筛选方法 335
3-12 用纸上pH层析法确定抗生素的离子特性 339
3-13 用捷克八溶剂系统纸层析法鉴别抗生素 342
3-14 用纸电泳法鉴别抗生素的离子特性 345
3-15 用薄层层析法分离和鉴别抗生素 348
Ⅴ．蛋白质、酶及核酸的测定 351
3-16 蛋白质含量的简易测定法 351
3-17 α淀粉酶活力的测定 354
3-18 蛋白酶活力的测定 358
3-19 细菌细胞中大分子DNA的分离与提纯 363
3-20 细菌细胞核酸含量的测定 366
3-21 用二苯胺法作脱氧核糖核酸（DNA）的定量测定 369
3-22 细菌转移核糖核酸（tRNA）的分离纯化 373
3-23 细菌核糖体的分离与纯化 375
3-24 核糖核酸（RNA）的定量测定 379
Ⅵ．大肠杆菌λ噬菌体及其DNA的制备与鉴定 383
3-25 λ噬菌体——E．coli225（λ）的制备及其效价测定 383
3-26 λ噬菌体——E．coli225（λ）的分离纯化 387
3-27 λ噬菌体DNA的制备及琼脂糖电泳鉴定 394
3-28 限制性内切核酸酶EcoRI的分离纯化及其对λ-DNA的酶切作用 398
3-29 λDNA生物学活性的测定——对大肠杆菌的转染作用 404
Ⅰ．大肠杆菌（E．coli）lac-突变型的诱变、筛选和鉴定 408
参考文献 408
第四章 微生物的遗传变异和育种 412
4-1 在鉴别性培养基上检出大肠杆菌乳糖操纵子的各种突变型 412
4-2 用紫外线诱变大肠杆菌筛选乳糖调节基因突变型 415
4-3 用EMS诱变大肠杆菌筛选i-突变型 419
4-4 用转座子诱发的插入突变来筛选i-、z-和y-突变型 424
4-5 利用抑制基因来检测无义突变 428
Ⅱ．高产菌株的诱变育种 433
4-6 通过筛选抗反馈抑制突变型提高赖氨酸产量 433
4-7 用紫外线和氟乙酸选育酵母菌的柠檬酸高产菌株 436
4-8 耐高浓度自身代谢产物的抗反馈抑制突变型的选育 442
4-9 用快中子辐照选育抗生素高产菌株 448
4-10 应用快中子和多烯类抗生素选育霉菌蛋白酶的高产菌株 459
Ⅲ．营养缺陷型突变株的筛选 463
4-11酵母菌营养缺陷型的诱变、筛选和鉴定 463
Ⅳ．诱变剂的检测 471
4-12 用Ames方法检测诱变剂和致癌剂 471
4-13 用中断杂交法进行基因定位 480
Ⅴ．基因定位 480
4-14 通过梯度转移进行基因定位 485
4-15 lacz基因内点突变的精细定位 488
Ⅵ．基因重组 492
4-16 细菌蛋白酶产生菌的杂交育种 492
4-17 半乳糖基因的高频转导 495
Ⅶ．基因工程技术 501
4-18 λ噬菌体DNA和Charon4ADNA的酶切图谱分析 501
4-19 λ噬菌体DNA的体外包装 505
4-20 大肠杆菌pBR322质粒DNA的分离和纯化 511
参考文献 516
Ⅰ．免疫血清学技术 519
5-1 免疫血清的制备 519
第五章 免疫学实验技术 519
5-2 试管凝集反应 525
5-3 双向琼脂扩散试验 527
5-4 对流免疫电泳 530
5-5 琼脂免疫电泳 532
5-6 火箭免疫电泳 536
5-7 交叉免疫电泳和火箭-线形免疫电泳 539
5-8 免疫球蛋白的提取——盐析法 543
Ⅱ．免疫荧光技术 543
5-9 免疫球蛋白的纯化——离子交换层析法 547
5-10 免疫荧光标记及测定方法 551
Ⅲ．细胞免疫技术 557
5-11 白细胞移动抑制试验（LMIT） 557
5-12 免疫特异性玫瑰花结试验 560
5-13 抗体生成细胞的检测——溶血空斑试验 563
5-14 小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬试验 566
参考文献 573