第一章 核酸的高级结构 1
第一节 概述 1
第二节 DNA的二级结构 4
一、DNA碱基组成的规律件 4
二、X射线衍射分析和Watson-Crick模型 4
三、左旋DNA(Z-DNA) 8
四、DNA的可变构象及其生物学功能 10
第三节 DNA的变性 15
一、温度对DNA变性的影响 16
二、pH对DNA变性的影响 17
三、碱基组成对DNA变性的影响 19
四、离子强度对DNA变性的影响 19
五、有机试剂对DNA变性的影响 22
六、其他理化因素对DNA变性的影响 26
第四节 环状DNA 26
第五节 核糖核酸的高级结构 31
一、RNA的结构 31
二、tRNA的二级结构(三叶草模型) 32
三、tRNA的三级结构 35
四、mRNA 38
第二章 DNA和染色体 44
第一节 概述 44
第二节 从DNA到染色体的组装 45
一、染色体涂色技术和染色体显带技术 45
二、基因在染色体上的排列 47
三、人类基因组的解读 48
四、染色体形态结构在细胞周期中的变化 50
五、从DNA到30nm染色质纤维的组装 53
第三节 染色体的高级结构 62
一、灯刷染色体 62
二、多线染色体 62
三、有丝分裂染色体 66
四、常染色质和异染色质 68
五、染色体在细胞核中的定位 72
第三章 物理图谱的构建 74
第一节 限制性内切核酸酶 74
一、细菌的限制修饰作用和限制性内切核酸酶的发现 74
二、限制性内切核酸酶的命名 76
三、限制性内切核酸酶的种类与特性 77
四、识别位点的序列测定 80
五、限制修饰性酶对核苷酸序列的识别机制 82
六、限制-修饰性系统基因的克隆 85
七、影响限制性内切核酸酶活性的因素 88
第二节 构建物理图谱的克隆载体 91
一、质粒载体 92
二、柯斯质粒 92
三、酵母人工染色体(YAC) 93
四、细菌人工染色体(BAC) 95
第三节 基因组研究的有关图谱 96
一、遗传图谱 97
二、物理图谱 100
三、序列图谱 100
四、基因图谱 101
第四节 构建DNA物理图谱的方法 101
一、DNA片段的制备与分离 101
二、限制性内切核酸酶降解法 104
三、部分变性法 108
四、DNA聚合酶法 109
五、杂交电镜法(环形成法) 114
六、末端标记法 118
七、分子杂交法 122
第四章 核酸序列分析 126
第一节 DNA序列分析 126
一、加减法 126
二、化学断裂法 131
三、双脱氧法 136
四、双脱氧法的改进与发展 139
五、DNA序列分析的相关进展 144
第二节 序列分析凝胶电泳 147
一、凝胶电泳在DNA片段分离纯化中的应用 147
二、序列分析聚丙烯酰胺凝胶电泳 150
第三节 核糖核酸(RNA)序列分析 154
一、概述 154
二、测定RNA一级结构的片段重叠法 155
三、测定RNA一级结构的直读法 164
第五章 DNA的复制 177
第一节 概述 177
一、研究DNA复制的目的 177
二、历史的回顾 177
第二节 DNA复制的基本规律和几种复制模型 179
一、半保留复制 179
二、几种复制模型 181
三、不连续复制 185
第三节 参与DNA复制的几种主要的酶 188
一、拓扑异构酶(topoisomerase) 189
二、解旋酶(DNA helicase) 191
三、单链结合蛋白(SSB) 193
四、引发酶(DNA primase) 194
五、DNA聚合酶(DNA polymerase) 195
六、DNA连接酶(ligase) 202
第四节 DNA复制的过程 204
一、复制的起始 204
二、复制的延伸 207
三、复制的终止 211
四、其他原核生物的复制体系 215
五、非基因组DNA的复制 219
第五节 确保DNA复制准确性的机制 220
第六章 遗传信息的表达 224
第一节 从DNA到RNA(转录、RNA的生物合成) 224
一、概述 224
二、原核生物基因的转录 225
三、真核生物基因的转录 230
四、非编码RNA的合成 247
第二节 从RNA到蛋白质(蛋白质的生物合成) 251
一、概述 251
二、翻译的起始 257
三、肽链的延伸和终止 261
四、新生肽链的折叠 272
第七章 基因表达的调控 280
第一节 概述 280
一、在多细胞生物中不同类型细胞的基因组是相同的 280
二、不同类型的细胞所含的蛋白质是不同的 282
三、从DNA到RNA再到蛋白质,基因表达的调控可以在不同的水平上进行 283
第二节 基因调控蛋白 284
一、基因调控蛋白的发现 284
二、基因调控蛋白与DNA的识别 284
三、基因调控蛋白的特殊结合域 287
四、研究基因调控蛋白的生化技术 295
第三节 原核生物的转录调控 298
一、色氨酸操纵子 298
二、乳糖操纵子 300
第四节 真核生物的转录调控 301
一、真核生物转录调控的特点 301
二、真核生物转录调控的机理 302
三、果蝇发育过程中的转录调控 307
四、哺乳动物的转录调控 310
第五节 转录后调控 313
一、转录衰减 313
二、RNA的选择性剪接 313
三、RNA修订(RNA editing) 316
四、RNA的运输 318
五、mRNA在细胞质中的定位 320
六、翻译调控 321
第八章 DNA的修复与重组 329
第一节 基因突变 329
一、突变的类型 329
二、基因突变的原因 331
第二节 DNA的损伤修复 341
一、DNA聚合酶的矫正修复 341
二、光修复 341
三、切除修复(excision repairs) 342
四、错配修复(mismatch repair) 344
五、重组修复(recombination repair) 346
六、SOS修复 347
第三节 重组和转座 349
一、概述 349
二、基因重组的作用机制 350
三、转座 358
第九章 核酸的制备 381
第一节 核酸制备的基本原理 381
第二节 核酸制备的基本方法 382
一、细胞的破碎 382
二、核酸提取的基本方法 384
三、核酸的浓缩和沉淀 388
四、核酸的纯化 389
五、超离心技术在核酸分离中的应用 392
第三节 DNA的制备 395
一、细菌DNA制备 395
二、质粒DNA的分离纯化 395
三、动物DNA的制备 400
四、植物DNA的制备 403
五、病毒DNA的制备 404
第四节 RNA的制备 406
一、概述 406
二、制备RNA的一般方法 407
三、mRNA的制备 416
四、tRNA的制备 422
第五节 核酸的贮存与鉴定 425
一、核酸的贮存 425
二、核酸的含量测定 426
三、核酸的纯度估测 426
四、核酸凝胶电泳 427
主要参考文献 430
名词略语索引 438