上篇 生物化学与分子生物学基本理论第一章 实验室基本知识 1
第一节 实验室规则 1
第二节 实验记录与实验报告 2
第三节 实验用纯水的制备 3
第四节 实验样品的制备 6
第五节 实验室基本操作技术 7
第二章 光谱分析技术 12
第一节 吸收光谱分析技术 12
第二节 发射光谱分析技术 15
第三节 散射光谱分析技术 17
第三章 电泳技术 18
第一节 电泳的基本原理 18
第二节 影响电泳的因素 19
第三节 电泳技术的分类 21
第四节 几种常用电泳技术 22
第四章 层析技术 27
第一节 层析技术的原理与分类 27
第二节 常用的层析技术 30
第三节 高效液相层析法 33
第五章 离心技术 35
第一节 离心技术的基本原理和分类 35
第二节 离心分离方法 37
第三节 离心机的结构与分类 38
第六章 分子生物学基本技术 41
第一节 核酸分子杂交技术 41
第二节 聚合酶链反应技术 45
第三节 基因克隆技术 50
第四节 其他分子生物学技术 55
下篇 生物化学与分子生物学实验第七章 蛋白质 61
实验一 双缩脲法测定血清总蛋白 61
实验二 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质浓度 63
实验三 紫外分光光度法测定总蛋白 65
实验四 溴甲酚绿法测定血清清蛋白 67
实验五 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 69
实验六 蛋白质的盐析 73
实验七 蛋白质的两性解离和等电点的测定 74
实验八 氨基酸的薄层层析 76
实验九 凝胶层析法脱盐和分离蛋白质 78
实验十 SDS-PAGE法测定蛋白质相对分子质量 80
第八章 酶学 85
实验一 影响酶活性的因素 85
实验二 蔗糖酶的专一性 88
实验三 血清乳酸脱氢酶同工酶的分离 90
实验四 赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶 92
实验五 琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 95
实验六 精氨酸酶的作用 96
第九章 糖代谢 98
实验一 葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖 98
实验二 饱食和饥饿对肝糖原含量的影响 100
实验三 肌乳酸测定 101
第十章 脂类代谢 103
实验一 磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯 103
实验二 胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇 105
实验三 磷钨酸-镁沉淀法测定血清高密度脂蛋白-胆固醇 107
实验四 免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白B100 109
实验五 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 110
第十一章 维生素 113
实验一 维生素B1的荧光测定法 113
实验二 维生素B2的荧光测定法 114
实验三 2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C的含量 116
第十二章 核酸 118
实验一 酵母RNA的提取及组分鉴定 118
实验二 真核细胞基因组DNA的提取与鉴定 120
实验三 质粒DNA的提取、纯化和鉴定 122
实验四 从组织或培养的细胞中分离总RNA 125
实验五 DNA的限制性内切酶消化 127
实验六 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 129
实验七 聚合酶链反应技术体外扩增DNA 131
实验八 DNA的Southern印迹杂交技术 133
实验九 RNA的Northern印迹杂交技术 137
第十三章 综合性实验 141
实验一 碱性磷酸酶的提取、比活性及Km值的测定 141
实验二 血清γ-球蛋白的分离与纯化 146
实验三 逆转录PCR技术 148
实验四 蛋白质印迹 151
实验五 ApoE基因多态性分析 154
附：FABP2基因多态性分析 158
实验六 DNA的重组技术 160
附录1 常用单位换算法 165
附录2 实验室常用酸碱的密度和浓度 167
附录3 化学试剂纯度分级表 168
附录4 酸碱指示剂 169
附录5 待测溶液的颜色和选用滤光片的对应关系 170
附录6 常用蛋白质分子量标准参照物 171
附录7 常用DNA分子量标准参照物 172
附录8 常用的电泳缓冲液 173
附录9 常用贮存液的配制 174