第一篇 常用分子生物学实验技术及原理第一章 载体 3
第二章 分子生物学中常用的工具酶 11
第三章 电泳 20
第四章 真核生物基因组文库的构建 27
第五章 cDNA文库的构建 31
第六章 DNA序列测定 37
第七章 PCR基因扩增 45
第八章 基因表达 51
第九章 印迹法及分子检测 55
第十章 克隆化DNA的定点突变 61
第十一章 mRNA差异显示技术 69
第二篇 学生实验 75
实验一 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA的转化 75
实验二 质粒DNA的提取及其定性定量分析 78
实验三 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 82
实验四 PCR基因扩增及扩增产物的回收 86
实验五 DNA重组 91
实验六 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达和检测 97
实验七 蛋白质印迹 104
实验八 哺乳动物基因组DNA的分离和分析 109
实验九 植物基因组DNA的提取 113
实验十 大肠杆菌基因组DNA的提取 115
实验十一 植物总RNA的提取 118
实验十二 RT-PCR(反转录-聚合酶链反应) 121
实验十三 PCR法差异显示mRNA 125
实验十四 利用聚合酶链反应(PCR)定点突变 131
实验十五 寡核苷酸介导的定点突变 135
实验十六 Southern杂交 140
实验十七 双脱氧链终止法测定DNA序列 146
实验十八 DNA核苷酸序列分析——银染色法 151
附录 155
一、常用核酸、蛋白质换算数据 155
二、氨基酸符号及相应密码子 156
三、常见市售酸碱的浓度 156
四、离心机转速与相对离心力的换算 157
五、常用电泳缓冲液及凝胶加样缓冲液 159
六、常用限制酶酶切位点及缓冲液 162
七、分子生物学常用试剂和缓冲液的配制 163
八、常用细菌培养基和抗生素溶液 166
九、X光底片的冲洗方法 169
十、溴化乙锭溶液的净化处理 170