第一章 绪论 1
第一节 生物制药的概念和内容 1
第二节 生物药物的性质与分类 2
一、生物药物的性质及质量保证 2
二、生物药物的分类 5
第三节 新型生物药物研制的方法 9
一、新药研究和开发的主要过程 9
二、先导化合物的寻找 10
第四节 生物制药的发展历史和概况 15
一、生物制药的发展历史 15
二、生物制药的发展概况 16
第五节 生物制药的发展趋势 23
第六节 我国生物制药的发展状况 28
一、我国生物制药的研究现状 28
二、我国医药生物技术的战略对策及发展方向 30
第二章 基因工程制药技术 32
第一节 概述 32
一、基因工程制药发展态势 32
二、主要基因工程药物简介 34
三、基因工程技术的特点与步骤 37
第二节 基因工程制药中常用的工具酶 38
一、限制性核酸内切酶 38
二、DNA连接酶 41
三、DNA聚合酶 43
四、其他常用工具酶 45
第三节 基因工程制药中常用的克隆载体 47
一、质粒载体 47
二、λ噬菌体载体 52
三、黏粒载体 56
四、M13噬菌体载体 57
五、病毒载体 59
第四节 基因工程药物目的基因的制取 60
一、目的基因的化学合成 60
二、构建基因文库法分离目的基因 63
三、酶促合成法制取目的基因 65
第五节 目的基因与克隆载体的体外重组 71
一、目的基因与质粒载体的连接 71
二、目的基因与λ噬菌体载体的连接 75
第六节 重组克隆载体引入受体细胞 77
一、受体细胞概述 77
二、重组体DNA分子的转化或转染 79
三、重组λ噬菌体DNA的体外包装与转导 80
四、重组克隆载体导入哺乳动物细胞的转染 81
第七节 目的重组克隆的筛选、鉴定与分析 83
一、含目的基因重组克隆的筛选 83
二、目的重组克隆的鉴定 87
三、重组DNA的序列分析 89
第八节 目的基因在宿主细胞中的表达 91
一、外源目的基因在原核细胞中的表达 91
二、目的基因在原核细胞中的表达形式 94
三、目的基因在原核细胞中的高效表达 95
四、外源目的基因在真核细胞中的表达 95
第九节 基因工程菌（细胞）的培养与发酵 97
一、基因工程细菌的培养与发酵 98
二、基因工程酵母菌的培养与发酵 101
三、基因工程细胞的培养与发酵 104
第三章 细胞工程制药技术 106
第一节 概述 106
第二节 细胞工程常用技术 108
一、细胞形态与结构的观察技术 108
二、细胞组分分析技术 112
三、细胞内含物观察技术 112
四、细胞化学定量分析技术 113
第三节 细胞融合技术 113
一、细胞融合技术的发展 113
二、细胞工程中遗传物质的转移途径 116
三、细胞融合方法 117
四、影响细胞融合的因素 120
五、细胞融合操作中的技术问题 120
六、杂种细胞的筛选原理及系统 123
七、杂种细胞有用性状的检测系统 124
八、控制杂种细胞遗传表现型的机制 126
九、微生物原生质体融合技术 127
十、植物原生质体的制备、培养、融合及转化技术 134
十一、动物细胞融合技术 144
第四节 杂交瘤技术与单克隆抗体 145
一、单克隆抗体 145
二、杂交瘤技术 146
三、杂交瘤细胞培养及单克隆抗体的生产 158
第五节 微生物转化生产甾体药物 160
一、微生物转化及其特点 160
二、甾体药物 162
三、甾体药物生物转化反应的类型 163
四、甾体药物的生物转化工艺 167
第四章 酶工程制药技术 173
第一节 概述 173
一、酶的催化特性 174
二、影响酶催化反应的主要因素 175
三、酶活力测定 178
四、酶的分类与命名 179
第二节 药用酶的生产技术 182
一、酶的生物合成及其调节 183
二、药用酶生产细胞的选择 189
三、药用酶生产工艺条件及其控制 190
四、提高药用酶产量的措施 194
五、药用酶的分子修饰 197
六、酶在疾病治疗和预防方面的应用 208
第三节 药物的酶法生产技术 212
一、酶的选择与反应条件的确定与控制 212
二、固定化酶及其在制药方面的应用 214
三、酶的非水相催化及其在制药方面的应用 222
四、酶在制药方面的应用 233
第五章 微生物发酵制药技术 239
第一节 概述 239
一、微生物发酵制药发展沿革 239
二、微生物发酵制药的研究范围 240
三、微生物发酵药物的分类 241
四、微生物发酵制药研究的发展趋势 242
第二节 制药微生物与产物的生物合成 242
一、制药微生物的选择 242
二、制药微生物菌种的选育 243
三、微生物菌种的保藏 245
四、微生物代谢产物的生物合成 249
五、微生物生物合成的主要调节机制 256
第三节 发酵工艺条件的确定 262
一、培养基及其制备 262
二、灭菌操作技术 268
三、发酵工艺条件的确定及主要控制参数 270
第四节 发酵过程及其优化控制 285
一、抗生素发酵生产 285
二、维生素及辅酶类药物的生产 296
三、蛋白质、多肽、氨基酸和核酸类药物 298
四、微生物生产的其他药物 303
第五节 微生物制药的质量控制 311
一、微生物制药质量控制的意义 311
二、微生物制药成品的主要检验项目 312
第六章 动、植物细胞培养制药技术 316
第一节 动物细胞培养制药技术 316
一、概述 316
二、动物细胞培养的特性 323
三、动物细胞培养基的组成与制备 323
四、细胞培养过程的检测 330
五、动物细胞培养方法与操作方式 335
六、动物细胞大规模培养系统 340
七、动物细胞大规模培养技术的应用 345
八、动物细胞培养制药工艺实例 346
第二节 植物细胞培养制药技术 350
一、植物细胞培养技术的研究进展 350
二、植物细胞培养的特性与营养 354
三、植物细胞培养的类型与技术 361
四、植物细胞培养的应用 371
第七章 生物药物的分离纯化技术 380
第一节 概述 380
第二节 预处理及固液分离技术 384
一、概述 384
二、直接从发酵液中提取产品 385
三、细胞破碎 386
四、离心 387
五、膜分离技术 388
六、膜分离技术的应用 394
第三节 沉淀 397
一、沉淀 397
二、盐析 398
三、有机溶剂沉淀 399
四、其他沉淀技术 399
五、亲和沉淀 400
六、沉淀的应用 401
第四节 萃取 402
一、概述 402
二、抗生素萃取操作的影响因素 403
三、萃取剂的选择 403
四、萃取方式 404
五、萃取技术的应用 405
六、脂类药物的提取和纯化 406
七、双水相萃取 407
八、反胶束提取纯化技术 410
九、超临界萃取技术 413
第五节 吸附 415
一、层析 415
二、离子交换技术 418
三、大网格聚合物吸附 423
四、凝胶过滤 424
第六节 亲和层析 426
一、概述 426
二、共价亲和层析 427
三、疏水层析 428
四、固定化金属离子亲和层析 429
五、免疫亲和层析 430
六、染料配体亲和层析 431
七、凝集素亲和层析 432
八、核酸类亲和层析 432
九、置换层析 433
十、色谱聚焦 434
十一、高压亲和层析 435
第七节 药用蛋白分离纯化策略 435
一、分离纯化需注意的问题 435
二、合理设计层析方案 436
三、蛋白质分离纯化方法的组合 439
第八节 新型层析分离纯化装置及介质 441
一、分离纯化装置 441
二、预装柱层析介质 444
主要参考文献 446