第一篇 生物化学实验基础知识 1
第一章 生物化学实验技术发展概况 1
第二章 生物化学实验室常识介绍 3
第二篇 现代生物化学实验技术 10
第一章 离心分离技术 10
第二章 电泳技术 14
第三章 分光光度技术 22
第四章 层析技术 25
第五章 聚合酶链式反应(PCR)技术 38
第三篇 生物化学实验 42
第一章 基础性实验 42
第一节 糖生物化学实验 42
实验一 糖的还原性检验 42
实验二 总糖和还原糖的测定 43
Ⅰ 费林试剂热滴定法 43
Ⅱ 3,5—二硝基水杨酸法 47
第二节 脂类化学实验 49
实验三 脂肪碘值的测定 49
实验四 粗脂肪含量的测定——索氏抽提法 52
第三节 蛋白质化学实验 54
实验五 蛋白质的呈色反应和沉淀反应 54
Ⅰ 蛋白质、氨基酸的呈色反应 54
Ⅱ 蛋白质的沉淀反应 57
实验六 蛋白质含量测定 58
Ⅰ 紫外吸收法测定蛋白质含量 58
Ⅱ 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 59
Ⅲ 双缩脲法测定蛋白质浓度 61
Ⅳ Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质含量 62
实验七 牛乳中蛋白质的分离和提取 64
实验八 氨基酸的分离鉴定——纸层析法 66
实验九 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 67
实验十 凝胶过滤法分离蛋白质 69
实验十一 葡聚糖凝胶层析 71
第四节 核酸化学实验 73
实验十二 核酸含量的测定 73
Ⅰ 紫外吸收法测定核酸的含量 73
Ⅱ 二苯胺法测定DNA含量 75
实验十三 酵母核糖核酸的组分鉴定 76
实验十四 三种腺苷酸(AMP,ADP,ATP)的分离 78
Ⅰ 薄层层析分离AMP、ADP和ATP 78
Ⅱ 醋酸纤维素薄膜电泳分离三种腺苷酸 80
第五节 酶学实验 82
实验十五 酶的特性——底物专一性 82
第六节 维生素实验 84
实验十六 维生素A的含量测定——比色法 84
第二章 综合性实验 86
第一节 糖化学实验 86
实验一 天然产物中多糖的分离、纯化与鉴定 86
Ⅰ 多糖的提取、纯化 86
Ⅱ 多糖的鉴定 87
第二节 蛋白质化学实验 89
实验二 总氮量的测定——凯氏(Micro-Kjeldahl)定氮法 89
实验三 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白 94
实验四 凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量 97
第三节 核酸化学实验 100
实验五 动物肝脏DNA的提取及含量测定 100
实验六 质粒DNA的分离、纯化及鉴定 102
Ⅰ 质粒DNA的分离、纯化 102
Ⅱ 质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳分离鉴定 105
实验七 PCR扩增DNA 107
实验八 基因组DNA的提取与检测 109
Ⅰ 基因组DNA的提取 109
Ⅱ 基因组DNA的检测 111
实验九 植物基因组DNA的RAPD多态性分析 112
第四节 酶学实验 115
实验十 大蒜细胞SOD的提取与分离 115
实验十一 过氧化物酶活性的测定 117
实验十二 乳酸脱氢酶酶活力测定 119
实验十三 蔗糖酶的提取和比活力测定 121
实验十四 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 124
实验十五 胰蛋白酶的制备及活力的测定 126
实验十六 蛋白水解酶活力的测定 129
第五节 新陈代谢实验 132
实验十七 肌糖原的酵解作用 132
实验十八 脂肪酸β-氧化 135
第三章 设计性实验 138
实验一 总黄酮的提取和测定 139
实验二 碱性过硫酸钾氧化-紫外分光光度法测总氮 139
实验三 酶促反应的影响因素 140
实验四 硝酸还原酶活性的测定 140
实验五 核酸的提取及性质鉴定 141
实验六 果蔬维生素C的定量测定 142
第四章 双语教学选开实验 143
Experiment 1 Kit for assaying blood glucose(for hand and automatic analyzer)(实验一 血糖分析) 143
Experiment 2 Determination of Isoelectric Point of Protein——Precipitation Method(实验二 蛋白质等电点测定——沉淀法) 145
Experiment 3 Experiments of Enzyme Kinetics(实验三 酶动力学实验) 147
附录 152
附录一 常用缓冲液的配制方法 152
附录二 实验室中常用酸碱的相对密度和浓度 158
附录三 部分生化仪器的操作规程 159
附录四 常用生化仪器的使用注意事项 161
参考文献 165