第一章 绪论 2
第一节 大豆抗虫基因工程研究 2
一、抗虫基因 2
二、大豆的遗传转化 11
第二节 大豆食心虫及其研究概况 25
一、大豆食心虫简介 25
二、大豆食心虫国内外研究现状 27
第三节 大豆的组织培养与植株再生 27
一、大豆原生质体和单细胞的组织培养与植株再生 28
二、大豆器官发生与植株再生 29
第四节 转化体的筛选与检测 34
一、常用报告基因的检测 34
二、目的基因检测 38
第五节 转Bt基因安全性评价 40
一、Bt基因的作用机制分析 40
二、转Bt基因生态安全性评价原则 41
第二章 大豆再生体系优化 42
第一节 无菌苗获得 42
一、消毒方法确定 42
二、萌发培养基的确定 44
第二节 丛生芽诱导 47
一、材料与方法 47
二、结果与分析 48
三、小结 50
第三节 丛生芽伸长 51
一、材料与方法 51
二、结果与分析 52
三、小结 54
第四节 丛生芽的生根与驯化 55
一、材料与方法 55
二、结果与分析 56
三、小结 57
第三章 农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化条件优化 58
第一节 卡那霉素（Km）筛选方法与浓度的确定 58
一、供试材料与筛选方法 58
二、结果与分析 59
三、小结 63
第二节 菌株生长时期和浸染浓度的确定 64
一、材料与方法 64
二、结果与分析 65
三、小结 67
第三节 易感大豆基因型的筛选 68
一、材料与方法 68
二、结果与分析 68
三、小结 69
第四节 影响遗传转化主要因子的试验 70
一、材料与方法 70
二、结果与分析 71
三、小结 74
第四章 农杆菌介导大豆子叶节法转化Bt-cryV基因 75
第一节 菌液制备 75
一、材料与方法 75
二、结果与分析 76
三、小结 78
第二节 农杆菌介导大豆子叶节法转化Bt-cryV基因 79
一、材料与方法 79
二、结果与分析 80
三、小结 84
第五章 花粉管通道法转化外源基因 88
第一节 外源DNA制备 88
一、材料与方法 88
二、结果与分析 90
三、小结 91
第二节 质粒DNA导入方法 93
一、材料与方法 93
二、结果与分析 94
三、小结 95
第三节 花粉管通道法获得D1代检测方法 97
一、材料与方法 97
二、结果与分析 105
三、小结 110
第四节 花粉管通道法转化D2代植株的鉴定 114
一、材料与方法 114
二、结果与分析 114
三、小结 117
参考文献 118
附录 153
附录A 缩略词及其英汉对照 153
附录B 大豆子叶节再生系统的建立 155
附录C 农杆菌介导法对大豆子叶节的遗传转化 158
附录D 花粉管通道法大豆遗传转化 160