《细胞生物学实验技术》PDF下载

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  • 作  者:李芬主编
  • 出 版 社:北京:科学出版社
  • 出版年份:2007
  • ISBN:9787030202888
  • 页数:137 页
图书介绍:本书共37个实验,内容较丰富,知识面广,分为基础性实验、综合性实验和设计性实验三大部分。在第一部分基础性实验主要包括显微镜技术、细胞形态结构观察、细胞化学、细胞化学成分分离、细胞分裂和染色体超前凝集以及细胞培养、细胞融合和流式细胞术等细胞生物学基本实验。第二部分综合性实验选编了荧光原位杂交确定特定核酸序列的定位、磷酸钙沉淀法将DNA导入细胞、RT-PCR检测水稻肌动蛋白基因的表达、Western-blot检测HeLa细胞HSP70表达、重组GFP在洋葱细胞中瞬时表达的观察(基因枪导入法)、蛋白质与蛋白质相互作用检测--酵母双杂交筛选等现代细胞生物学和分子生物学相关技术。在增添的第三部分设计性实验中编入了不同类群细胞大小和结构的比较、植物细胞中叶绿体的原位观察 、不同方法制备同步化细胞的效果比较和细胞凋亡的诱导和检测四个实验,使学生通过完成这些实验,加深对细胞生物学相关理论知识的认识,同时学习从事科学研究和撰写科研论文的基本方法,为将来独立从事科研工作奠定坚实的基础。大多数实验采用生活细胞材料,由学生自己动手取材和实验,使学生能对细胞获得生动的认识。这些实验内容新颖、技术先进、可操作性强

第一部分 基础性实验 1

实验1 普通显微镜及其使用 1

实验2 特殊显微镜及其使用 6

实验3 石蜡切片法制备光学显微标本 15

实验4 冰冻切片法制备光学显微标本 21

实验5 透射电子显微镜及样品制备 24

实验6 扫描电子显微镜及样品制备 29

实验7 细胞形态观察、大小测量和死活细胞鉴定 32

实验8 液泡系的超活染色与动态观察 34

实验9 线粒体超活染色技术与数目统计 36

实验10 细胞骨架观察——微丝观察 37

实验11 细胞骨架观察——微管观察  40

实验12 碱性磷酸酶和酸性磷酸酶染色技术  42

实验13 核仁组织区银染色技术(Ag-Nor染色法)  44

实验14 多糖的细胞化学显示法——PAS反应  46

实验15 DNA的细胞化学显示法——Feulgen反应 50

实验16 RNA的细胞化学显示法——Brachet反应 51

实验17 细胞器的分离与鉴定 53

实验18 动物细胞基因DNA组提取 56

实验19 植物细胞基因组DNA提取 58

实验20 酿酒酵母RNA提取 61

实验21 细胞无丝分裂和有丝分裂的形态观察 63

实验22 细胞减数分裂的形态观察 65

实验23 超前凝集染色体标本的制备与观察 69

实验24 细胞的原代培养 71

实验25 细胞的传代培养 74

实验26 细胞融合 76

实验27 流式细胞仪测定细胞DNA含量 77

第二部分 综合性实验 81

实验28 荧光原位杂交确定特定核酸序列的定位 81

实验29 磷酸钙沉淀法将DNA导入细胞 84

实验30 RT-PCR检测水稻肌动蛋白基因的表达  86

实验31 Western-Blot检测HeLa细胞HSP70表达  89

实验32 重组GFP在洋葱细胞中瞬时表达的观察(基因枪导入法) 94

实验33 蛋白质与蛋白质相互作用检测——酵母双杂交筛选 95

第三部分 设计性实验 103

实验34 不同类群细胞大小和结构的比较 103

实验35 植物细胞中叶绿体的原位观察 106

实验36 不同方法制备同步化细胞的效果比较 108

实验37 细胞凋亡的诱导和检测 111

附录 117

附录一 离心机转数与离心力的换算表 117

附录二 常用溶液的配制和使用 118

附录三 生物标本常用染料性能简介 130

附录四 常用玻璃、塑料仪器的清洗和干燥 133

附录五 常用单位 135

附录六 药品规格 136

参考文献 137