基础篇 1
第1章 流式细胞术及其原理 3
1.1流式细胞术 3
1.2流式细胞仪的基本结构 4
液流系统 5
光学系统 7
电子系统 10
分选系统 28
1.3流式细胞仪的主要技术指标 29
荧光分辨率 29
荧光灵敏度 29
前向角散射光灵敏度 30
分析/分选速度 30
分选纯度 30
分选收获率 30
参考文献 30
第2章 流式细胞术的质量控制 33
2.1环境要求 33
2.2仪器的校正 33
2.3样本的要求 34
2.4合理设计对照 34
2.5获取实验数据和分析 35
参考文献 35
操作篇 37
第3章 流式细胞术单细胞悬液的制备 39
3.1单层培养细胞分散为单个细胞 39
3.2新鲜实体组织分散为单个细胞 39
机械法 39
酶处理法 40
化学试剂处理法 40
3.3石蜡包埋组织分散为单个细胞 40
二甲苯脱蜡法 40
组织清洁剂脱蜡法 41
甲氧-双氧水处理法 41
参考文献 42
第4章 流式细胞术的应用 43
4.1细胞周期和DNA倍体分析 43
概述 43
荧光探针 46
DNA检测的常用术语 48
样品制备 49
上机检测(以PI标记的标本在BD FACSCalibur流式细胞仪检测为例) 50
数据分析 53
注意事项 55
应用举例 57
4.2 DNA的双参数分析 60
试剂 60
样品制备 60
上机检测 61
结果分析 63
注意事项 64
4.3凋亡检测 65
凋亡的诱导 67
细胞凋亡的形态学分析 68
Annexin V凋亡检测法 71
caspase-3分析 80
碘化丙啶(PI)单染色法 88
线粒体膜电位的检测 92
细胞内活性氧的检测 99
DNA片段检测 107
4.4肿瘤细胞多药耐药检测 118
细胞表面膜糖蛋白表达水平的检测 119
罗丹明123蓄积实验 123
4.5细胞免疫表型分析 127
概述 127
淋巴细胞免疫表型分析 130
应用举例 135
影响免疫表型分析的一些问题 137
4.6细胞因子的测定 139
细胞内细胞因子检测 140
流式微球分析(cytometric beads array,CBA)法检测细胞外细胞因子 153
参考文献 170
常见问题解答篇 171