第一篇 基本实验 1
第一章 医学细胞生物学基本实验 1
第一节 细胞的形态结构 1
实验一 细胞的一般形态结构观察 1
实验二 细胞的显微测量技术 5
实验三 细胞的超微结构 6
第二节 细胞生理活动 13
实验四 胞质环流 13
实验五 细胞吞噬 14
实验六 细胞活性鉴定 15
实验七 细胞融合 16
第三节 细胞化学成分的显示 18
实验八 普通细胞化学 19
实验九 核酸细胞化学 23
实验十 酶细胞化学 27
实验十一 荧光细胞化学与免疫荧光细胞化学 31
第四节 细胞增殖 36
实验十二 动物细胞的有丝分裂 36
实验十三 植物细胞的有丝分裂 38
实验十四 X染色质标本制备与观察 40
实验十五 早熟染色体凝集(PCC)的诱导和观察 42
第五节 细胞培养 45
实验十六 原代细胞培养 45
实验十七 细胞传代培养 48
实验十八 体外培养细胞的观察方法 51
第二章 医学生物化学与分子生物学基本实验 57
第一节 蛋白定量分析实验 57
实验一 双缩脲法测定蛋白质含量 57
实验二 Folin-酚测定蛋白质含量 58
实验三 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 60
实验四 紫外分光光度法测定蛋白质含量 61
第二节 层析分离纯化实验 63
实验五 血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定 63
实验六 葡聚糖凝胶分离蓝葡聚糖和溴酚蓝 65
实验七 葡聚糖凝胶分离血红蛋白和DNP-胰糜蛋白酶混合液 67
实验八 离子交换层析分离混合氨基酸 68
第二节 电泳实验 69
实验九 血清蛋白质乙酸纤维素薄膜电泳 69
实验十 血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 71
实验十一 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清LDH同工酶 72
实验十二 SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量 74
实验十三 等电聚焦法测定蛋白质等电点 77
第四节 酶学实验 79
实验十四 pH对酶促反应速度的影响 79
实验十五 温度对酶促反应速度的影响 82
实验十六 底物浓度对酶促反应速度的影响 83
实验十七 抑制剂对酶促反应速度的影响 85
实验十八 酶的提取及比活性测定 87
第五节 物质代谢实验 92
实验十九 胰岛素对血糖含量的影响 92
实验二十 邻甲苯胺法测血糖含量 93
实验二十一 糖酵解中间产物的鉴定 94
实验二十二 血清中谷丙转氨酶(GPT)活性的测定 96
实验二十三 血清脂类薄层层析 98
第六节 核酸实验 99
实验二十四 核糖核酸的提取 99
实验二十五 核糖核酸的测定 100
实验二十六 脱氧核糖核酸提取 101
实验二十七 脱氧核糖核酸的测定 101
第七节 分子生物学实验 103
实验二十八 真核细胞DNA的制备与定量 103
实验二十九 质粒DNA的提取与定量 104
实验三十 DNA琼脂糖凝胶电泳 106
实验三十一 DNA的限制性酶切反应 107
实验三十二 目的DNA片段的回收 109
实验三十三 大肠杆菌感受态细胞的制备 110
实验三十四 DNA的连接转化及阳性克隆的筛选 111
第三章 医学遗传学基本实验 113
实验一 人类外周血淋巴细胞培养 113
实验二 人类外周血淋巴细胞染色体的制备 114
实验三 人类染色体G-显带 116
实验四 正常人类染色体G带核型分析 117
实验五 人类遗传性状分析 120
实验六 短串联重复序列(STR)的多态性分析 122
第二篇 融合实验 128
实验一 培养细胞的凋亡检测 128
实验二 总RNA的提取及RT-PCR扩增目的基因 137
实验三 产前基因诊断的方法 141
实验四 真核基因在大肠杆菌中的表达 142
实验五 培养细胞绿色荧光蛋白基因转染及荧光显微镜检测 144
实验六 地高辛标记探针的制备及Southern杂交分析遗传病 145
实验七 Northern杂交分析 148
实验八 细胞核的分离提取、DNA的染色观察及定量分析 151
实验九 凋亡细胞的诱导及凋亡带的检测 152
实验十 细胞内RNA的定位及电泳分析 154
实验十一 人类淋巴细胞培养及细胞ATP活力检测 155
实验十二 p53基因与肺癌发生关系的分析 156
实验十三 利用遗传多态位点亲权鉴定 157
实验十四 蛋白质印迹(Western blotting) 157
实验十五 四氯化碳致培养肝细胞损伤及SOD活性检测 159
第三篇 创新实验 162
实验一 细胞凋亡与细胞坏死实验设计 162
实验二 细胞损伤保护实验设计 162
实验三 糖尿病的生化及遗传检测分析实验 163
实验四 唐氏综合征的产前诊断方法 163
实验五 小鼠组织细胞功能分析 163
实验六 小鼠组织特种细胞的特征性成分的鉴定 164
实验七 家族性高胆固醇血症的诊断方法 164
实验八 血友病的诊断 166
实验九 重组人红细胞生成素在细胞中的表达、分离和纯化 167
实验十 绿色荧光蛋白的表达、检测及应用 167
附录 169
附录一 实验室规则 169
附录二 实验室安全及防护 169
附录三 实验室常用玻璃仪器的洗涤与清洁 171
附录四 生物绘图的要求与方法 174
附录五 生物学实验设计报告 175
附录六 常用实验技术原理 175