上篇 微生物学及免疫学基本技术 1
第一章 微生物学实验室工作基本知识&任维国、朱毓兰、毕无邪 1
第一节 实验室规则 1
第二节 实验室基本设备及常用仪器 2
第三节 玻璃器材的规格及洗刷、包装、灭菌 4
第四节 消毒及灭菌法 6
第五节 微生物实验课准备的组织工作和注意事项 14
第二章 细菌染色技术&赵会先 18
第一节 细菌的染色法 18
一、染色原液的配制 18
二、染色标本的制备及染色步骤 19
三、微生物实验室常用染色法 20
（一）单染色法 20
（二）革兰氏染色法 21
（三）抗酸染色法 22
（四）荚膜染色法 23
（五）芽胞染色法 24
（六）白喉杆菌异染颗粒染色法 25
（七）鞭毛染色法 26
（八）螺旋体染色法 27
（九）真菌染色法 29
（十）细菌核质染色法 29
（十一）细菌细胞壁染色法 30
（十二）病毒、立克次氏体染色法 31
（十三）血片染色法 32
第二节 微生物教学常用标本片制备 33
一、制备标本片应注意的基本原则 33
二、教学常用标本制备举例 33
（一）葡萄球菌标本制备 33
（二）链球菌标本制备 34
（三）杆菌和弧菌标本片制备 34
（四）结核杆菌标本片制备 34
（五）破伤风杆菌芽胞标本片制备 34
（六）肉毒杆菌芽胞标本片制备 34
（七）肺炎双球菌荚膜标本片制备 34
（八）炭疽杆菌荚膜标本片制备 34
（九）白喉杆菌异染颗粒标本片制备 35
（十）吞噬现象标本片的制备 35
（十一）真菌标本片制备 36
第三章 细菌的培养技术&朱毓兰、任维国 37
第一节 培养基制备的一般技术 37
第二节 常用培养基的制备 42
一、培养基种类 42
二、常用培养基的制备 43
1.蛋白胨水培养基 43
2.肉膏汤培养基 43
3.牛肉浸汤培养基 44
4.肝浸汤培养基 44
5.葡萄糖肉汤培养基 45
6.血清肉汤培养基 45
7.普通琼脂培养基 45
8.血琼脂培养基 46
9.巧克力培养基 46
10.半固体琼脂培养基 46
11.S—S琼脂培养基 46
12.去氧胆盐柠檬酸盐琼脂培养基 47
13.伊红美兰培养基 47
14.双糖（含铁）培养基 48
15.糖发酵管培养基 48
16.尿素琼脂培养基 49
17.菊糖血清培养基 50
18.明胶培养基 50
19.吕氏（Loef fler）血清斜面培养基 50
20.亚碲酸钾（Potassium tellurite）培养基 51
21.艾立克（Elek）氏白喉杆菌毒力试验用培养基 51
22.脱脂牛乳培养基 52
23.紫牛乳培养基 52
24.醋酸铅培养基 52
25.硝酸盐培养基 52
26.柯索夫（Korthof）培养基 53
27.疱肉培养基 53
28.罗氏（Lowenstein）培养基 53
29.卵磷脂蛋黄素培养基 54
30.3%氯化钠血琼脂培养基 54
31.沙保弱（Sabouraud）氏培养基 55
32.玉米面琼脂培养基 55
33.硷性琼脂培养基 56
34.艾（Avery）氏培养基 56
35.博一姜（Bordet—Gengou）氏培养基 56
36.威一布氏培养基 57
37.枸橼酸盐琼脂培养基 57
38.酒石酸盐培养基 58
39.含硫堇及硷性复红培养基 58
40.胡罗卜马铃薯琼脂培养基 58
第三节 细菌的培养法 59
一、各种培养基接种手技 59
1.琼脂平板培养基划线接种技术 59
2.斜面培养基接种技术 59
3.半固体培养基穿刺接种技术 59
4.液体培养基接种技术 60
二、细菌培养法 60
（一）一般培养法 60
（二）厌氧培养法 61
（三）CO2培养法 62
第四章 动物接种技术&朱毓兰 63
第一节 动物接种技术 63
1.一般注意事项 63
2.皮内接种法 63
3.皮下接种法 63
4.肌肉接种法 63
5.家兔耳静脉接种法 63
6.腹腔内接种法 64
7.脑内接种法 64
8.家兔足掌皮内注射法 65
第二节 感染动物的观察 65
第三节 动物采血技术 66
1.家兔心脏采血法 66
2.绵羊颈静脉采血法 67
3.鸡心脏采血法 68
4.家兔颈动脉放血法 68
5.小牛（初生牛）颈动脉放血法 69
第四节 常用动物解剖技术 70
第五章 免疫学检查技术&李静波、朱毓兰、毕无邪 71
第一节 琼脂扩散及电泳技术 71
一、琼脂扩散 71
（一）琼脂双相扩散 71
（二）单相琼脂扩散 72
二、电泳技术 74
（一）琼脂平板区带电泳 74
（二）免疫电泳 75
（三）对流免疫电泳 76
（四）火箭免疫电泳 77
第二节 细胞免疫功能检查技术 78
一、玫瑰花形成试验 78
二、淋巴细胞转化试验 80
三、硝基兰四氮唑还原试验 82
第三节 免疫荧光技术 83
一、荧光标记抗体的制备过程 84
二、染色技术 87
三、荧光显微镜检查 87
〔附〕抗核抗体检查法 89
第四节 免疫血清的制备 90
一、免疫血清制备的一般原则 90
二、常用免疫血清的制备 91
（一）伤寒免疫血清的制备 91
（二）痢疾免疫血清的制备 91
（三）溶血素的制备 92
（四）流行性感冒病毒免疫血清之制备 93
（五）抗人血清的制备（包括全血清、丙球和IgG） 94
第六章 微生物实验课前准备要点&任维国、李静波、赵会先、毕无邪 96
一、显微镜的使用方法—观察细菌的形态结构 96
二、细菌涂片标本的制备及单染色法 97
三、革兰氏染色法 97
四、细菌动力的观查 98
五、细菌的生长现象 99
六、紫外线杀菌试验 100
七、色素抑菌试验 100
八、细菌生化反应 101
九、细菌的变异现象 103
十、噬菌体特异性实验 104
十一、噬菌斑实验 104
十二、玻片凝集试验 105
十三、试管（定量）凝集反应 106
十四、环状沉淀反应 108
十五、间接凝集反应 108
十六、补体结合试验 109
十七、动物过敏反应 116
十八、脓汁分离培养—化脓菌系统实习之一 117
十九、三种葡萄球菌及三种链球菌菌落—化脓菌系统实习之二 118
二十、血浆凝固酶试验（玻片法）—化脓菌系统实习之三 118
二十一、药物敏感试验（纸片法）—化脓菌系统实习之四 119
二十二、胆汁溶菌试验 120
二十三、脱氧核糖核酸酶（DNAse）产生试验 121
二十四、粪便分离培养—肠道菌系统检查之一 121
二十五、接种双糖（含铁）培养基—肠道菌系统检查之二 122
二十六、玻片凝集（肠道菌的初步鉴定）—肠道菌系统检查之三 122
二十七、分离细菌作生化反应及因子血清凝集试验（肠道菌的最后鉴定）肠道杆菌系统检查之四 123
〔附〕生化反应 123
（一）尿素分解试验 123
（二）枸橼酸盐利用试验 123
（三）甲基红（MR）试验 123
（四）V—P试验 123
二十八、厌氧芽胞杆菌血平板菌落 124
二十九、破伤风毒力试验及抗毒素保护试验 124
三十、产气荚膜杆菌动物试验—泡沫肝试验 125
三十一、产气荚膜杆菌培养物 126
三十二、卵磷脂酶试验 126
三十三、肉毒杆菌动物试验 126
三十四、需氧芽胞杆菌的鉴别 127
炭疽杆菌与类炭疽杆菌、枯草杆菌的鉴别（培养示教） 127
三十五、抗酸染色—检查结核病人痰 128
三十六、结核杆菌斜面培养物 129
三十七、结核杆菌动物试验标本 129
三十八、白喉杆菌的毒力测定 130
（一）动物体内测定法 130
（二）平板毒力测定法 130
三十九、流感杆菌卫星现象 131
四十、鼠疫杆菌培养标本 131
（一）普通平板培养物—观查菌落 131
（二）钟乳石状生长现象 131
（三）鼠疫噬菌体试验 132
四十一、布氏杆菌培养标本 132
（一）硫化氢产生试验 132
（二）色素抑制试验 133
四十二、鸡胚培养法 133
四十三、牛痘病毒感染鸡胚绒毛尿囊膜的病变 134
四十四、流感病毒血凝及血凝抑制试验 135
四十五、脑炎病毒小白鼠发病症状 136
四十六、螺旋体暗视野检查 137
四十七、真菌培养物 138
四十八、真菌病材及各种结构镜下标本 138
第七章 几项特殊技术&任维国、毕无邪 140
第一节 抗菌素敏感试验 140
第二节 病毒培养技术 146
一、鸡胚培养法 146
二、组织培养法 151
第三节 噬菌体的分离技术 156
第四节 菌（毒）种保存法 158
第五节 致病真菌检查技术 162
〔附〕常用溶液配制 166
下篇 寄生虫学实验诊断技术 170
第八章 血液中寄生虫的检查法&陈敏生 170
第一节 疟原虫等血涂片的制备及染色法 170
一、薄血片法 170
二、厚血片法 170
三、新鲜血片法 171
四、未染色血片的保存法 171
五、血涂片染色法 171
瑞氏染液的配制及染色法 171
吉氏染液的配制及染色法 171
缓冲液的制备 171
六、疟原虫薄血片吖啶橙染色萤光镜检法 172
七、血片上染色液沉淀的矫正法 172
第二节 丝虫的微丝蚴检查及染色法 173
一、新鲜血片检查法 173
二、厚血片染色检查法 173
三、微丝蚴血涂片快速染色法 173
四、微丝蚴浓集法 174
五、用计算数池方法检查微丝蚴阳性率和密度 174
表（5—29）班氏微丝蚴与马来微丝蚴区别要点 174
第九章 肠内原虫的检查法&陈敏生 175
第一节 直接涂片法 175
第二节 国产染料“学生兰”和“枣红”配制肠道原虫染液迅速诊断法 175
第三节 固定检查法 176
第四节 对比染色永久片制作法 177
第十章 内脏原虫检查法&陈敏生 179
第一节 阴道滴虫染色检查法 179
第二节 痰、肺、肝中痢疾阿米巴滋养体检查法 179
第三节 脾、肝、骨髓中利什曼原虫及其它原虫检查法 179
第十一章 常用原虫培养法&陈敏生 180
第一节 痢疾阿米巴培养及长期保种的方法 180
一、蛋血清培养基 180
二、营养琼脂血清盐水培养基 180
三、培养基的检查与转种 181
第二节 杜氏利什曼原虫培养法及长期保种 181
一、N、N、N、培养基 181
二、杨氏培养基 182
第三节 阴道滴虫无菌培养及长期保种的方法 183
一、大豆蛋白胨培养基 183
二、半胱氨酸—胨—肝—麦芽糖培养基 183
第十二章 蠕虫检查法&陈敏生 184
第一节 虫卵检查法 184
一、直接涂片法 184
常见寄生虫卵鉴别要点 184
二、虫卵浓缩法 185
（一）自然沉淀法 185
（二）离心沉淀法 185
（三）饱和盐水浮聚法 185
（四）乙醚蚁醛法 185
（五）汞醛碘法 185
（六）尼龙袋集卵法 186
三、蛲虫卵检查法 186
四、痰内肺吸虫卵检查法 186
五、绦虫卵检查法 186
第二节 虫卵保存法 186
第三节 虫卵计算法 187
一、洪氏过滤改良计算法 187
二、司氏稀释虫卵计算法 187
三、虫卵计算法测定钩虫病感染度 188
第四节 蠕虫幼虫检查法 188
一、钩蚴孵化法 188
二、蛔虫卵孵育法 189
三、日本血吸虫毛蚴孵化法 189
表 毛蚴与原生动物鉴别特点 189
四、皮下囊尾蚴检查法 189
痘猪肉检查法 189
猪、牛绦虫的囊虫头节孵出法 189
五、绦虫孕卵节片检查法 190
六、旋毛虫检查法 190
第五节 蠕虫成虫的检查及固定、染色、制片法 190
一、线虫检查与固定 190
二、线虫迅速诊断透明法 190
三、吸虫固定法 191
四、染色与封固 191
实验室常用胭脂红染液配制 191
实验室常用苏木素染液配制 192
第十三章 动物实验法&陈敏生 193
第一节 原虫 193
一、痢疾阿米巴原虫 193
二、杜氏利什曼原虫 193
第二节 蠕虫 193
一、接种蛔虫卵获取幼虫法 193
二、卫氏并殖吸虫（肺吸虫） 194
三、华枝睾吸虫（肝吸虫） 194
〔附〕人工消化液配方 194
四、日本血吸虫 194
第十四章 医学节肢动物的采集与保存&王才 195
第一节 采集方法 195
一、蚊 195
二、白蛉 195
三、蝇 196
四、蚤 196
五、虱 196
六、臭虫 196
七、蜱 196
八、恙螨幼虫 197
九、疥螨 197
第二节 标本的制作与保存 197
一、针插标本 197
（一）制作前的处理 197
（二）针插法 197
（三）保存 198
二、浸渍标本 198
（一）浸渍前的处理 198
（二）固定 198
三、玻片标本制作法 198
（一）制作前的处理 198
（二）封片法 199
第三节 几种饲养方法 200
一、蚊 200
二、白蛉 200
三、蝇 200
四、蚤 200
五、蜱 201
第四节 内部解剖 201
一、蚊 201
（一）唾液线的解剖 201
（二）胃肠的解剖 201
二、白蛉 201
（一）口腔咽喉 201
（二）受精囊的解剖 201
三、解剖标本的制片 201
第十五章 免疫诊断技术 202
第一节 间接血球凝集试验&连建安 202
第二节 蚊虫胃血测定的对流免疫电泳法&刘兆铭 205