引 言 1
第1章 Rgs5基因敲除对心房电重构的影响及其机制 3
1.1 材料与方法 4
1.1.1 实验动物 4
1.1.2 遥测心电图（Telemetry ECG）记录 4
1.1.3 心脏超声检查 4
1.1.4 组织纤维化检测 5
1.1.5 离体心脏制备 5
1.1.6 单相动作电位及双极电图记录 5
1.1.7 刺激程序 6
1.1.8 跨膜动作电位（TAP）的记录 6
1.1.9 心房肌细胞的分离 7
1.1.10 细胞钾离子通道电流电压关系记录 7
1.1.11 Ito和IKur通道动力学记录 8
1.1.12 实时定量PCR检测 9
1.1.13 统计学处理 12
1.2 结果 12
1.2.1 心电图记录结果 12
1.2.2 心脏超声检测 14
1.2.3 Rgs5-／-增加心房复极时间 14
1.2.4 窦房结及房室结功能检测 17
1.2.5 Rgs5-／-增加房性心律失常的诱发及持续时间 17
1.2.6 Rgs5-／-导致了心房肌细胞K＋电流的重构 19
1.2.7 Rgs5-／-对心房纤维化的影响 23
1.3 讨论 23
1.3.1 主要发现 23
1.3.2 Rgs5与心房复极时程 24
1.3.3 Rgs5与房性快速性心律失常 25
1.4 结论 26
第2章 Rgs5基因敲除对乙酰胆碱介导的房性心律失常的影响 27
2.1 材料和方法 27
2.1.1 实验动物 27
2.1.2 遥测心电图（Telemetry ECG）记录 27
2.1.3 离体心脏制备 28
2.1.4 双极电图记录 28
2.1.5 刺激程序 28
2.1.6 心房肌细胞的分离 29
2.1.7 乙酰胆碱敏感性钾通道电流电压关系记录 30
2.1.8 实时定量PCR检测 30
2.1.9 统计学处理 30
2.2 结果 31
2.2.1 Rgs5-／-增大Ach对心房不应期的影响 31
2.2.2 Rgs5-／-对窦房结及房室结功能的影响 32
2.2.3 房性快速型心律失常的诱发 32
2.2.4 Rgs5-／-对Ach敏感性K＋电流的影响 36
2.3 讨论 38
2.3.1 主要发现 38
2.3.2 Rgs5与IK，Ach通道 38
2.3.3 Rgs5与Ach介导的房性心律失常模型 39
2.4 结论 39
第3章 Rgs5基因敲除对心室肌复极相K＋电流的影响及其机制 40
3.1 材料与方法 40
3.1.1 实验动物 40
3.1.2 遥测心电图（Telemetry ECG）记录 41
3.1.3 离体心脏制备 41
3.1.4 单相动作电位及双极电图记录 41
3.1.5 程控刺激 42
3.1.6 跨膜动作电位（TAP）的记录 42
3.1.7 心室肌细胞的分离 42
3.1.8 成年小鼠心肌细胞的培养 43
3.1.9 细胞钾离子通道电流电压关系记录 43
3.1.10 Ito和IKur通道动力学记录 44
3.1.11 实时定量PCR检测 44
3.1.12 Western Blot检测 45
3.1.13 统计学处理 50
3.2 结果 50
3.2.1 Rgs5-／-导致心室复极相延长 50
3.2.2 Rgs5-／-导致复极相钾电流衰减 53
3.2.3 Rgs5-／-通过ATlR信号途径影响K＋电流 56
3.2.4 Rgs5-／-影响心室肌K＋通道的表达 56
3.3 讨论 59
3.3.1 主要发现 59
3.3.2 Rgs5与心室复极相 59
3.3.3 Rgs5与K＋电流 60
3.4 结论 61
第4章 Rgs5基因敲除对心室复极时间和空间异质性的影响 62
4.1 材料与方法 62
4.1.1 实验动物 62
4.1.2 心脏超声检测 62
4.1.3 遥测心电图（Telemetry ECG）记录 63
4.1.4 离体心脏制备 63
4.1.5 单相动作电位及双极电图记录 64
4.1.6 刺激程序 64
4.1.7 APD整复性曲线的构建 65
4.1.8 PSR染色 65
4.1.9 统计学处理 65
4.2 结果 66
4.2.1 Rgs5-／-并未导致心室腔结构变化 66
4.2.2 Rgs5-／-导致QTV增加并不依赖于HRV的变化 66
4.2.3 Rgs5-／-增加了心室复极离散度 67
4.2.4 Rgs5-／-增加整复性斜率 69
4.2.5 Rgs5-／-促进室性心律失常的诱发 69
4.3 讨论 73
4.3.1 主要发现 73
4.3.2 Rgs5与时间变异性 73
4.3.3 Rgs5与空间变异性 74
4.3.4 Rgs5与室性快速型心律失常 75
4.4 结论 76
第5章 综述：G蛋白信号调控因子与心律失常 77
5.1 G蛋白信号通路与离子流的关系 77
5.2 G蛋白对自主神经系统的调控作用 78
5.3 G蛋白信号调节因子对心律失常的作用 79
5.4 展望与挑战 81
参考文献 82
致谢 94