第一章 基本实验操作及常用仪器使用 1
第一节 常用研究技术 1
第二节 基本实验操作 24
第三节 常用仪器使用 32
第四节 实验室规则及安全防护 43
第五节 如何撰写实验报告 44
第二章 经典验证性实验 46
第一节 蛋白质定量分析实验 46
实验一 微量凯氏定氮法测定蛋白质含量 46
实验二 双缩脲法测定血清蛋白质含量 49
实验三 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 50
实验四 紫外分光光度法测定蛋白质浓度 52
实验五 BCA法测定蛋白质浓度 54
第二节 层析实验 56
实验六 纸层析法观察转氨基作用 56
实验七 葡聚糖凝胶柱层析分离血红蛋白与鱼精蛋白 58
实验八 离子交换层析分离混合氨基酸 60
实验九 薄层层析分离鉴定氨基酸 61
第三节 电泳实验 64
实验十 血清醋酸纤维薄膜电泳 64
实验十一 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清LDH同工酶 67
实验十二 SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子量 72
第四节 酶学实验 74
实验十三 血清碱性磷酸酶活性测定 75
实验十四 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定 77
实验十五 胰酶对蛋白质的消化和影响酶作用的因素 79
实验十六 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 82
实验十七 Hg 2＋对脲酶的抑制作用 84
实验十八 酶米氏常数的测定 86
第五节 糖与脂质 87
实验十九 血糖浓度的测定 88
实验二十 肾上腺素对血糖浓度的影响 90
实验二十一 血清三酰甘油浓度测定 91
实验二十二 血清总胆固醇浓度测定 94
实验二十三 血清载脂蛋白apoAl的测定 98
实验二十四 血清过氧化脂质的测定 99
实验二十五 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 101
第六节 核酸分离纯化技术 102
实验二十六 基因组DNA的提取制备与检测 102
实验二十七 全血基因组DNA的试剂盒法提取制备与检测 106
实验二十八 总RNA的提取制备与检测 108
实验二十九 质粒DNA的提取制备与检测 111
实验三十 动物组织核酸的提取及成分鉴定 115
第七节 PCR技术 117
实验三十一 常规PCR技术 117
实验三十二 定量PCR技术 120
第八节 基因克隆技术 123
实验三十三 凝胶中DNA片断的纯化回收 123
实验三十四DNA的限制性酶切与电泳 124
实验三十五DNA连接实验 127
实验三十六 感受态细胞的制备 130
实验三十七 重组DNA转化与蓝白斑筛选 131
第九节 分子杂交与印迹技术 133
实验三十八 核酸原位杂交 133
实验三十九Southern印迹杂交 139
实验四十Northern印迹杂交 142
实验四十一Western印迹 145
第十节 细胞结构 147
实验四十二 动植物细胞的基本形态与结构及细胞显微测量 147
实验四十三 细胞内几种细胞器的观察 151
实验四十四 小白鼠巨噬细胞吞噬实验 152
实验四十五 细胞内几种化学成分的显示 153
实验四十六 细胞骨架系统的显示与观察 155
实验四十七 细胞膜的通透性的观察 157
第十一节 细胞增殖 158
实验四十八 细胞融合实验 158
实验四十九 细胞有丝分裂观察 159
实验五十 细胞原代培养 161
实验五十一 细胞传代培养 163
实验五十二 培养细胞的冻存、复苏与运输 163
第十二节 医学遗传 164
实验五十三 人类某些遗传性状的观察及皮肤纹理分析 165
实验五十四 人类染色体照片核型分析 171
实验五十五 染色体G显带染色体的核型分析 173
实验五十六 人类染色体镜下核型分析 176
第三章 综合性实验 178
实验一 血清γ-球蛋白的分离纯化及鉴定 178
实验二 碱性磷酸酶的分离纯化与动力学研究 183
实验三 hCS基因在大肠埃希菌中的表达、纯化及鉴定 187
实验四 hCS基因在毕赤酵母中的表达及鉴定 192
实验五 荧光原位杂交实验 195
实验六 用双荧光素酶报告基因检测启动子活性 198
实验七 电泳迁移阻滞实验 201
实验八 染色质免疫沉淀 205
实验九 蛋白质双向电泳 209
实验十 肝癌组织的代谢组学分析 214
实验十一 酵母双杂交实验 218
实验十二 RNA干扰实验 220
实验十三 人类外周血染色体标本的制备观察 224
实验十四 人类恶性肿瘤染色体标本的制备观察 225
实验十五 羊水细胞培养及染色体标本的制备观察 226
实验十六 人精子染色体标本制备 228
实验十七 绿色荧光蛋白标记的融合蛋白转染及观察 230
第四章 创新性实验 231
实验一 重要蛋白质或酶的分离纯化 231
实验二 家族性高胆固醇血症的诊断 231
实验三 血友病的分子诊断 233
实验四RNA干扰技术靶向沉默目的基因 233
实验五 家系调查和遗传病的系谱分析 234
实验六 药物诱导肿瘤细胞凋亡的检测实验 236
主要参考文献 237