第一篇 生物化学与分子生物学实验基本要求 1
第一章 实验室安全规则 1
第一节 实验规则 1
第二节 实验室安全和注意事项 2
第三节 应急处理 2
第二章 实验设计与实验报告 4
第一节 实验设计 4
第二节 实验记录及实验报告 5
第三节 实验误差 6
第四节 有效数字 8
第三章 实验化学试剂 9
第四章 实验室的基本操作 13
第一节 玻璃器皿的洗涤 13
第二节 溶液的常规操作 16
第三节 实验常用标本的制备 17
第四节 常用实验器材的使用 20
第二篇 实验室常用基本技术 24
第五章 离心技术 24
第六章 分光光度技术 27
第七章 层析技术 30
第一节 吸附层析 30
第二节 分配层析 30
第三节 离子交换层析 31
第四节 凝胶层析 32
第五节 亲和层析 33
第八章 电泳技术 36
第一节 概述 36
第二节 醋酸纤维薄膜电泳 38
第三节 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 39
第四节 琼脂糖凝胶电泳 42
第五节 其他电泳 44
第六节 电泳后大分子的检测 44
第九章 聚合酶链式反应(PCR技术) 46
第一节 聚合酶链式反应 46
第二节 反转录PCR(RT-PCR) 48
第三节 实时荧光定量PCR 49
第四节 原位RCR 52
第五节 PCR扩增产物分析 53
第十章 生物大分子的制备 54
第一节 生物大分子制备的前处理 54
第二节 生物大分子的提取 55
第三节 生物大分子的分离和纯化 57
第四节 冰冻干燥 59
第十一章 AC9000型电解质分析仪使用 62
第十二章 DS-3C微量元素检测仪的使用 65
第三篇 生物化学与分子生物学实验项目 72
第十三章 蛋白定量测定 72
第一节 酚试剂法(改良Lowry) 72
第二节 紫外分光光度法 74
第三节 改良微量凯氏定氮法 75
第十四章 蛋白醋酸纤维薄膜电泳 77
第十五章 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量 80
第十六章 乳酸脱氢酶同工酶测定 85
第十七章 影响酶促反应速率的因素 87
第一节 pH和温度对酶促反应的影响 87
第二节 激活剂和抑制剂对酶促反应的影响 88
第十八章 碱性磷酸酶米氏常数的测定 90
第十九章 血清/尿淀粉酶测定 93
第一节 改良Winslow氏法 93
第二节 碘-淀粉比色法 94
第二十章 血糖测定 96
第一节 邻甲苯胺法 96
第二节 葡萄糖氧化酶法 97
第三节 尿糖的定性测定(班氏试剂法) 99
第二十一章 血脂测定 100
第一节 总胆固醇测定 100
第二节 甘油三酯测定 102
第三节 高密度脂蛋白测定(磷钨酸-镁沉淀法) 106
第四节 血清载脂蛋白的测定 107
第二十二章 超速离心法分离血浆脂蛋白 110
第二十三章 肝/尿中酮体的测定 112
第一节 肝中酮体的测定 112
第二节 尿中酮体的定性测定(Lange法) 113
第二十四章 血清转氨酶测定 115
第一节 血清丙氨酸氨基转移酶测定 115
第二节 血清AST测定(赖氏法) 120
第二十五章 血清尿素氮测定(二乙酰—肟法) 122
第二十六章 血清胆红素测定 124
第一节 改良J-G法 124
第二节 胆红素氧化酶法 125
第二十七章 提取基因组DNA(蛋白酶K消化法) 129
第二十八章 提取人外周血基因组DNA(改良碘化钾法) 131
第二十九章 PCR扩增血液胆固醇酯转运蛋白D442G 133
第三十章 DNA的琼脂糖凝胶电泳 135
第三十一章 快速质粒抽提及酶切鉴定 138
参考文献 141