绪论 1
第一章 植物组织培养实验室的建设和离体操作技术 8
第一节 植物组织培养实验室的建设 8
第二节 培养基 15
第三节 灭菌与消毒 22
第二章 植物细胞形态建成 25
第一节 植物细胞的全能性 25
第二节 愈伤组织的诱导 26
第三节 器官建成 28
第四节 体细胞胚胎建成 33
第三章 植物离体快繁技术 42
第一节 离体快繁的一般方法 42
第二节 离体无性繁殖中存在的一些问题 49
第三节 离体无性繁殖的商业性生产的范围和应用 52
第四章 无病毒苗木培育 54
第一节 植物脱毒方法 55
第二节 脱病毒植株的检测 60
第三节 脱病毒植株的保存与繁殖 62
第五章 单倍体和多倍体的培养 63
第一节 花药培养 63
第二节 花粉(小孢子)培养 75
第三节 胚乳培养 77
第六章 细胞悬浮培养与次生代谢物的生产 82
第一节 细胞悬浮培养 82
第二节 培养细胞生产有用次生代谢物 89
第七章 原生质体培养和体细胞杂交 97
第一节 原生质体培养 98
第二节 植物体细胞杂交 108
第八章 基因工程的基本技术 120
第一节 凝胶电泳技术 120
第二节 PCR技术 124
第三节 核酸分子杂交技术 129
第九章 基因工程的工具酶和载体 130
第一节 基因工程的工具酶 130
第二节 基因工程的载体 139
第十章 植物目的基因的克隆与分离 146
第一节 植物基因工程研究常用的基因 146
第二节 目的基因的制备与克隆 150
第三节 目的基因的分离 155
第十一章 植物的转基因技术 164
第一节 植物基因转化的受体系统 164
第二节 农杆菌介导的基因转移 165
第三节 DNA直接转移法 169
第十二章 转基因植物中外源基因的表达与调节 173
第一节 植物基因表达调节概述 173
第二节 转基因沉默的发生机理及其消除对策 176
第三节 环境因素对转基因表达活性的影响 179
第四节 提高转基因表达水平的若干技术途径 179
第十三章 转基因植株的鉴定及利用 182
第一节 报告基因的表达检测 182
第二节 外源基因整合的分子杂交检测 185
第三节 转基因植物的PCR检测 189
第四节 转基因植物的应用 190
第十四章 分子标记 194
第一节 分子标记概述 194
第二节 分子标记主要类型、原理与特点 195
第三节 分子标记技术的应用 204
第十五章 植物基因工程的安全性评价 207
第一节 转基因植物的安全性评价 207
第二节 转基因植物安全性评价的主要内容 208
第三节 国内外转基因植物的安全性评价概况 209
实验一 培养基母液的配制 214
实验二 植物组织培养培养基的制备 216
实验三 胚培养 218
实验四 叶片愈伤组织的诱导 219
实验五 不定芽的增殖培养 221
实验六 单细胞的分离与培养 222
实验七 原生质体的分离、纯化与培养 224
实验八 植物基因组DNA的提取 226
实验九 质粒的提取与鉴定 230
实验十 大肠杆菌感受态的制备和转化 232
实验十一 PCR基因扩增 234
附录 236
附录一 植物生物技术常用缩略语 236
附录二 植物组织培养常用的培养基成分 239
附录三 常用几种培养基中的离子浓度比较 240
附录四 离心机转数与离心力的列线图 241
附录五 用血球计数板计数原生质体的方法 241
附录六 常用的限制性核酸内切酶的主要性质 243
附录七 常用抗生素配制及使用浓度 244
附录八 常用试剂配方 244
参考文献 247