总论 1
第一篇 生物化学与分子生物学实验基本操作、基本技术及原理 4
第一章 生物化学与分子生物学实验基本操作 4
第二章 实验样品的制备与保存 9
第三章 分光光度法 12
第四章 层析法 16
第五章 电泳法 22
第二篇 生物化学与分子生物学实验 30
第一章 蛋白质化学 30
实验一 Folin酚试剂法测定蛋白质含量 30
实验二 BCA法测定蛋白质浓度 32
实验三 双缩脲法测定蛋白质含量 34
实验四 蛋白质的两性反应与等电点测定 35
实验五 蛋白质的沉淀反应 38
第二章 核酸化学 43
实验六 紫外吸收法测定核酸含量 43
实验七 定磷法测定核酸含量 45
实验八 地衣酚法测定RNA含量 47
第三章 酶学实验 50
实验九 温度对酶活性的影响 50
实验十 酸碱度对酶活性的影响 51
实验十一 琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制 52
实验十二 酶的性质——酶的特异性 54
实验十三 碱性磷酸酶Km值测定 56
实验十四 乳酸脱氢酶同工酶琼脂糖电泳法测定 58
实验十五 氨基移换作用(纸层析法) 61
实验十六 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定 64
第四章 生物大分子的分离实验 68
实验十七 分子筛柱层析(葡聚糖凝胶过滤) 68
实验十八 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 70
实验十九 血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳 72
实验二十 蛋白质的分子量测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 75
第五章 其他生化指标的检测 81
实验二十一 食物中还原糖和总糖含量测定 81
实验二十二 茶中总游离氨基酸含量测定 85
实验二十三 维生素C含量测定——2,6-二氯酚靛酚滴定法 87
实验二十四 血糖含量的测定 90
第六章 分子生物学实验 94
实验二十五 聚合酶链式反应及产物鉴定(PCR) 94
实验二十六 RT-PCR 96
实验二十七 DNA的回收(琼脂糖凝胶法) 99
实验二十八 大肠杆菌感受态细胞的制备——氯化钙法 104
实验二十九 酵母双杂交实验 105
实验三十 RNA干扰实验 110
实验三十一 蛋白质免疫共沉淀 117
第七章 综合性实验 122
实验三十二 血清γ-球蛋白的分离与纯化 122
实验三十三 动物组织核酸的提取和含量测定 126
实验三十四 基因组DNA的提取与电泳检测 131
实验三十五 质粒DNA的快速提取制备及酶切鉴定 136
参考文献 141