《生物化学与分子生物学实验教程 第2版》PDF下载

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  • 作  者:徐跃飞,孔英主编
  • 出 版 社:北京:科学出版社
  • 出版年份:2017
  • ISBN:9787030472694
  • 页数:146 页
图书介绍:本书针对生物化学及研究中涉及的生物大分子——蛋白质、酶、核酸,根据生物大分子理化性质,结合实用的电泳技术、层析技术、离心技术、分子克隆技术等,综合系统地介绍了生物大分子的分离纯化含量测定分析鉴定,并结合教学中物质代谢、酶促反应动力学的系统分析,设计实验并融入相关实验技术和新进展,使学生在实验教学中掌握知识、技能的同时,体会对科研方法的选择与评价。

第一章 生物化学常用分析技术 1

第一节 生物大分子的基本制备技术 1

第二节 分光光度法 6

第三节 层析技术 15

第四节 电泳技术 24

第二章 蛋白质分子组成与理化性质分析 37

第一节 蛋白质的分子组成与结构 37

第二节 蛋白质的分离和纯化 38

第三节 蛋白质的定量 38

第四节 蛋白质相对分子量测定 41

第五节 实验项目 42

实验一 蛋白质的定量测定 42

实验二 血清蛋白质的层析分离 45

实验三 血清蛋白质的电泳分离 48

实验四 蛋白质理化性质分析 52

实验五 固定化蛋白质的免疫生化鉴定(Western Blot) 56

第三章 核酸的分子组成及理化性质分析 58

第一节 核酸的分子组成与结构 58

第二节 核酸的理化性质 59

第三节 核酸的制备和含量测定 60

第四节 实验项目 61

实验六 真核生物基因组DNA的制备(苯酚法) 61

实验七 人外周血白细胞DNA的制备 62

实验八 DNA与RNA含量测定 63

实验九 琼脂糖凝胶电泳分离DNA 63

第四章 酶作用及酶促反应动力学 65

第一节 酶的分子结构和功能 65

第二节 酶促反应动力学 65

第三节 酶活性测定 69

第四节 实验项目 70

实验十 淀粉酶的特异性及温度、pH对淀粉酶活性的影响 70

实验十一 碱性磷酸酶的提纯及比活性的测定 73

实验十二 碱性磷酸酶的Km测定 77

实验十三 磷酸盐对碱性磷酸酶的抑制作用 78

实验十四 温度和pH对碱性磷酸酶活性的影响 79

实验十五 乳酸脱氢酶同工酶分析 81

第五章 物质代谢及其激素调节 83

第一节 物质代谢定义 83

第二节 物质代谢的研究方法 83

第三节 实验项目 85

实验十六 血清葡萄糖的测定 85

实验十七 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 87

实验十八 肝糖原的提取和鉴定 89

实验十九 生物氧化中酶的催化作用 90

实验二十 血浆高密度脂蛋白-胆固醇含量的测定 92

实验二十一 磷脂的提取及其薄板层析 94

实验二十二 酮体的生成与作用 95

实验二十三 血清丙氨酸转氨酶活性的测定(改良赖氏法) 97

实验二十四 纸层析法鉴定转氨酶的转氨基作用 99

第六章 分子生物学基本实验技术 102

第一节 基因工程基本技术 102

第二节 聚合酶链反应 108

第三节 核酸分子杂交 111

第四节 DNA测序技术 113

第五节 实验项目 115

实验二十五 动物组织总RNA的提取 115

实验二十六 聚合酶链反应(PCR)技术体外扩增DNA 116

实验二十七 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) 117

实验二十八 质粒DNA的制备 118

实验二十九 限制性内切酶酶切 122

实验三十 目的DNA片段的分离和纯化 123

实验三十一 DNA片段与载体的连接 124

实验三十二 感受态细菌的制备(化学法) 126

实验三十三 质粒DNA的转化 127

实验三十四 重组质粒的筛选 128

实验三十五 Southern blot(印迹) 129

实验三十六 外源基因的原核表达 131

实验三十七 外源基因在真核生物中的表达 132

附录 134

附录一 常用缓冲溶液的配制 134

附录二 常用蛋白质相对分子质量及等电点 137

附录三 色谱法常用数据 139

附录四 离心转数和离心力的换算 141

附录五 实验数据和数据处理 142