第一章 绪论 1
一、生物技术的概念 1
二、生物技术药物 2
三、生物技术制药的概念和主要研究内容与任务 5
四、生物技术制药的发展历程和趋势 6
第二章 基因工程制药 8
第一节 概述 8
一、基因工程制药的基本概念 8
二、基因工程制药的发展简史 8
三、基因工程制药的基本过程 9
第二节 基因工程制药技术 9
一、基因工程菌的构建与筛选的基本方法 9
二、原核细胞工程菌的构建与筛选 19
三、真核工程细胞株的构建与筛选 21
第三节 基因重组蛋白的分离纯化 24
一、基因重组蛋白的主要分离技术 24
二、基因重组蛋白的主要纯化技术 26
三、选择分离纯化方法的依据 28
第四节 基因工程药物的改造 29
一、构建突变体 29
二、构建融合蛋白 30
第五节 基因工程药物的质量控制 32
一、基因工程药物的质量控制要点 32
二、方法及技术应用 33
第六节 基因工程制药实例 37
一、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 37
二、胰岛素 39
三、人生长激素 42
第三章 动物细胞工程制药 46
第一节 概述 46
一、动物细胞工程制药的基本概念 46
二、动物细胞工程制药的发展历史 46
三、动物细胞工程制药的基本过程 47
第二节 动物细胞的体外培养 47
一、体外培养动物细胞的类型 47
二、动物细胞培养的环境条件 48
三、动物细胞的培养特性 49
四、动物细胞培养的基本技术 49
第三节 动物细胞培养基和其他常用液体 51
一、动物细胞的营养要求 51
二、动物细胞培养基 51
三、动物细胞培养常用的其他溶液 54
第四节 生产用动物细胞 55
一、生产用动物细胞的种类 56
二、制药工业中常用的动物细胞 57
第五节 动物细胞的大规模培养 58
一、动物细胞的大规模培养方法 58
二、动物细胞生物反应器 60
三、动物细胞生物反应器的主要操作模式 63
第六节 动物细胞工程制药技术 64
一、细胞融合 64
二、转基因动物 65
三、细胞核移植技术 71
第七节 动物细胞工程制药实例 71
一、利用动物细胞培养制造促红细胞生成素 71
二、利用转基因动物生产抗凝血酶 73
第四章 抗体工程制药 76
第一节 概述 76
一、抗体工程制药的基本概念 76
二、抗体工程制药的发展简史 76
三、抗体工程制药的基本过程 78
四、抗体药物的分类 78
第二节 抗体分子的结构与功能 78
一、抗体的结构 78
二、抗体的基因结构及其表达 81
三、抗体的功能 82
第三节 单克隆抗体的制备 83
一、单抗技术的基本原理 83
二、抗原和动物免疫 85
三、细胞融合及杂交瘤细胞的筛选 87
四、筛选阳性克隆及克隆化 89
五、单抗的鉴定和检测 90
六、单抗的大量制备 91
七、单抗的纯化 91
第四节 基因工程抗体 91
一、Fab与Fv 92
二、单链抗体 92
三、双链抗体 94
四、抗体融合蛋白 96
五、嵌合抗体 97
六、人源化抗体 97
第五节 噬菌体抗体库技术 98
一、噬菌体抗体库技术的基本原理和程序 98
二、噬菌体抗体库技术的筛选方法 100
第六节 人抗体药物研发新技术 101
一、重组人多克隆抗体技术 101
二、抗原特异性抗体分泌细胞高效筛选技术 102
第七节 抗体工程制药实例 103
一、工艺流程 103
二、工艺过程 104
第五章 疫苗及其制备技术 108
第一节 概述 108
一、疫苗的概念 108
二、疫苗的作用与意义 108
三、疫苗的产生 108
四、疫苗技术的发展简史 109
第二节 疫苗的组成、作用原理、类型与特点 112
一、疫苗组成 112
二、疫苗作用原理 112
三、疫苗的类型与特点 112
第三节 疫苗的制备方法举例 122
一、灭活全毒疫苗制备方法举例——流感全病毒灭活疫苗的制备 122
二、减毒活疫苗制备方法举例——皮内注射用卡介苗的制备 124
三、基因重组亚单位疫苗制备方法举例——重组乙型肝炎疫苗的制备 126
四、生化提取亚单位组分疫苗制备方法举例——吸附破伤风疫苗的制备 128
第四节 疫苗生产的质量控制 130
一、生产原料的质量控制 131
二、生产过程质量控制 132
三、疫苗产品的质量控制 132
第五节 疫苗产业特点及应用概况 134
一、疫苗研发生产特点 134
二、我国疫苗分类及需求 134
三、我国疫苗行业现状 135
四、接种疫苗的效果 135
五、面临的形势和挑战 135
第六章 酶工程制药 139
第一节 概述 139
一、酶工程简介 139
二、酶工程的研究内容 139
三、酶的来源和生产 141
第二节 酶的提取与分离纯化 141
一、酶制备的基本原则 142
二、酶制备的一般程序 142
三、酶的提取 142
四、酶的纯化 144
第三节 酶和细胞的固定化 144
一、固定化酶的制备 145
二、固定化细胞的制备 149
三、酶和细胞的固定化载体 150
四、固定化酶（细胞）的评价指标 151
五、固定化酶（细胞）的应用 152
第四节 酶反应器 156
一、酶反应器的基本类型 156
二、酶反应器的选择及其性能评价 159
三、酶反应器的操作 160
第五节 酶工程的研究现状与展望 162
一、利用基因工程技术生产酶 162
二、突变酶 163
三、酶分子的定向进化 165
四、抗体酶 168
五、酶的化学修饰 171
六、非水相酶催化 173
七、模拟酶 177
第六节 酶工程在制药工业中的应用 178
一、固定化酶法生产L-氨基酸 179
二、固定化酶法生产β-内酰胺类抗生素 180
第七章 发酵工程制药 184
第一节 概述 184
一、发酵的定义 184
二、发酵类型 185
三、微生物发酵生产药物的分类 186
四、发酵工程制药的特点和发展趋势 187
第二节 发酵工程中的微生物 188
一、常见的药用微生物 188
二、优良菌种的选育 190
三、菌种保藏 193
第三节 发酵设备及消毒灭菌 194
一、发酵设备 195
二、培养基和灭菌 197
第四节 发酵工程制药的过程与控制 198
一、种子的扩大培养 199
二、微生物发酵方式 200
三、发酵过程中的中间分析项目 202
四、发酵过程的影响因素及控制 203
五、发酵终点的确定 210
六、基因工程菌的发酵 210
第五节 发酵工程中的代谢调控与代谢工程 211
一、初级代谢与次级代谢 212
二、代谢产物合成的调控 212
三、定向发酵 216
四、代谢工程 219
第六节 发酵工程在制药工业上的应用 222
一、抗生素的发酵生产 222
二、氨基酸的发酵生产 224
三、多糖的发酵生产 225
四、维生素的发酵生产 226
第八章 微生物转化 230
第一节 概述 230
一、微生物转化的发展 230
二、微生物转化的反应类型及应用实例 230
三、微生物转化反应的特点 232
第二节 微生物转化的研究现状 233
一、甾体的生物转化 233
二、苷类的生物转化 246
三、萜类分子的生物转化 248
四、组学时代的微生物转化研究 249
第三节 微生物转化在制药工业上的应用及实例 251
一、微生物转化在甾体药物合成中的应用 252
二、微生物转化与中药现代化 256
三、微生物转化在天然药物开发中的应用 257
四、微生物转化与其他药物制备 261
第九章 蛋白质药物的化学修饰 266
第一节 概述 266
一、蛋白质药物化学修饰简介 266
二、修饰剂 268
三、修饰策略 268
四、蛋白质药物化学修饰的前景 269
第二节 聚乙二醇化修饰 269
一、可作为修饰剂的聚乙二醇 270
二、随机修饰 272
三、定点修饰 274
第三节 糖基化修饰 277
一、可作为修饰剂的糖 277
二、修饰策略 278
第四节 人血清白蛋白修饰 280
第五节 用其他修饰剂修饰 281
一、用脂肪酸修饰 281
二、用糖肽修饰 282
三、用卵磷脂修饰 282
第六节 蛋白质的化学修饰在制药工业上的应用 283
一、PEG修饰的腺苷脱氨酶 283
二、PEG修饰的干扰素 284
三、PEG修饰的尿酸氧化酶 285
四、化学修饰的超氧化物歧化酶 285
第十章 新型生物技术制药 290
第一节 核酸药物及其制药技术 290
一、反义核酸和核酶 290
二、RNA干扰药物 292
三、核酸类药物的修饰和给药 294
第二节 基因治疗技术 295
一、基因治疗的概念及给药途径 295
二、治疗性基因的导入方法 296
三、肿瘤的基因治疗 298
第三节 细胞治疗技术 299
一、免疫细胞治疗技术 299
二、基于干细胞的治疗技术 303
索引 308