第1章 绪论 1
1.1 病毒形态、结构和化学组分 1
1.1.1 电镜下的病毒形态 1
1.1.2 病毒的结构 4
1.1.3 病毒的组分 7
1.2 病毒分类系统 10
1.2.1 病毒的主要类群 11
1.2.2 病毒的分类和命名 12
1.2.3 病毒分类系统 15
1.3 病毒入侵、繁殖及病理变化 16
1.3.1 病毒的入侵 16
1.3.2 病毒的繁殖 18
1.3.3 病毒引起宿主细胞的病理变化 20
1.3.4 病毒的释放 28
1.4 病毒的电镜诊断和鉴定 29
1.4.1 病毒电镜诊断鉴定的依据 29
1.4.2 病毒电镜诊断鉴定的特点 31
第2章 病毒样品的超薄切片技术 37
2.1 常温超薄切片技术的取材与固定 38
2.1.1 取材 38
2.1.2 固定 39
2.2 常温超薄切片技术的脱水、渗透和包埋 51
2.2.1 脱水 51
2.2.2 渗透和包埋 53
2.3 常温超薄切片的制作和染色 57
2.3.1 常温超薄切片的制作方法 57
2.3.2 染色液和染色方法 64
2.4 冷冻超薄切片技术 67
2.4.1 取材、醛固定和包封 67
2.4.2 冷冻保护处理与冷冻固定 69
2.4.3 冷冻超薄切片 71
2.5 冷冻置换技术 74
2.5.1 冷冻置换的基本原理 74
2.5.2 冷冻置换介质 74
2.5.3 冷冻置换的方法 75
2.5.4 影响冷冻置换的因素 76
第3章 病毒的分离、纯化与病毒样颗粒的组装 78
3.1 病毒的分离纯化 79
3.1.1 病毒的分离 79
3.1.2 病毒的纯化 82
3.2 病毒纯化的超速离心技术 83
3.2.1 原理与设备 84
3.2.2 病毒离心纯化方法 87
3.3 病毒衣壳蛋白的体外表达与病毒样颗粒的组装 90
3.3.1 病毒样颗粒在大肠杆菌表达系统中的表达与组装 91
3.3.2 病毒样颗粒在昆虫杆状病毒表达系统中的表达与组装 94
3.3.3 病毒样颗粒体外表达研究进展 100
3.4 负染色技术 101
3.4.1 负染色液的制备 102
3.4.2 染色方法 102
3.4.3 操作中的注意事项 103
第4章 病毒免疫电镜技术 106
4.1 概述 106
4.2 抗原-抗体免疫复合物电镜技术 107
4.2.1 吸附法 107
4.2.2 修饰法 107
4.2.3 吸附-修饰法 108
4.2.4 凝集法 109
4.3 免疫标记电镜技术的基本方法 109
4.3.1 取材与固定 109
4.3.2 免疫标记方法 110
4.3.3 样品包埋 112
4.3.4 对照实验 114
4.4 铁蛋白标记电镜技术 114
4.4.1 铁蛋白标记抗体的制备 114
4.4.2 铁蛋白标记电镜技术的应用 115
4.5 酶标记电镜技术 116
4.5.1 酶标记抗体 116
4.5.2 PAP技术 117
4.5.3 酶标记电镜技术的应用 117
4.6 胶体金标记电镜技术 118
4.6.1 胶体金探针的制备技术 119
4.6.2 胶体金标记电镜技术的应用 123
4.7 电镜原位杂交技术 129
4.7.1 同位素标记cRNA探针电镜原位杂交 130
4.7.2 生物素标记DNA探针电镜原位杂交 131
4.7.3 地高辛标记rRNA探针电镜原位杂交 133
4.7.4 电镜原位杂交技术的注意事项 134
第5章 生物样品的高分辨电子显微技术 135
5.1 电子显微镜的发明 135
5.2 磁透镜的光学性质 137
5.2.1 磁透镜的聚焦原理 137
5.2.2 磁透镜的像差 139
5.2.3 磁透镜的分辨本领、景深和焦深 141
5.3 像的反差形成原理 143
5.3.1 散射反差的形成与提高方法 144
5.3.2 提高散射反差的方法 145
5.3.3 相位反差 147
5.3.4 电子衍射 149
5.4 生物样品的高分辨成像技术 152
5.4.1 合轴、消像散和聚焦 153
5.4.2 生物样品的高分辨成像 161
第6章 冷冻电镜单颗粒技术与病毒研究 166
6.1 病毒的冷冻电镜成像 167
6.1.1 如何获得玻璃态的冰 168
6.1.2 冷冻制样与样品传输 169
6.1.3 低剂量成像 172
6.1.4 冷冻电镜图像的复原 174
6.2 病毒三维重构的单颗粒技术 175
6.2.1 单颗粒技术的发展现状 176
6.2.2 病毒的结构特点 178
6.2.3 中央截面定理 181
6.2.4 取向和中心估计 182
6.2.5 重构基本流程 185
6.3 家蚕质多角体病毒（BmCPV）的形态与结构研究 189
6.3.1 CPV在8A分辨率下的结构 190
6.3.2 CSP蛋白的构象变化及其无缝连接 190
6.3.3 LPP蛋白的构象变化及其分子铆接作用 193
6.3.4 TP蛋白的功能结构域及衣壳锚定作用 193
6.3.5 转录酶复合物（TEC）及dsRNA病毒的内转录机制模型 196
6.3.6 A球突蛋白及其MAb抗体复合物的研究 200
6.4 乙型肝炎病毒的结构研究 202
6.5 戊型肝炎病毒结构研究进展 203
第7章 电子断层成像技术与病毒研究 209
7.1 电子断层成像技术简介 209
7.1.1 电子断层成像原理 209
7.1.2 多角度系列电子投影图像的获取 210
7.1.3 投影图像的配准 211
7.1.4 断层图像的三维重构 211
7.1.5 重建结果的去噪、分割和理解 212
7.2 电子断层成像技术在病毒研究中的应用 212
7.2.1 电子断层成像研究的样品制备 212
7.2.2 电子断层成像技术用于病毒颗粒的三维结构研究 213
7.2.3 电子断层成像用于病毒与细胞的相互作用研究 218
7.2.4 电子断层成像技术在其他方面的应用及展望 219
参考文献 221
附录 国际病毒分类系统的科与属（ICTV，2009年） 228