第一部分 基础性实验 3
第一章 水分生理 3
实验1-1 植物组织中自由水和束缚水含量的测定 3
Ⅰ 折射仪法 3
Ⅱ 称重法 4
实验1-2植物组织渗透势的测定(质壁分离法) 5
实验1-3植物组织水势的测定(液体交换法) 7
Ⅰ 小液流法 7
Ⅱ 折射仪法 8
实验1-4蒸腾强度的测定 9
实验1-5环境因子对植物吐水的影响(示范) 11
实验1-6植物叶子气孔密度和面积的测定 12
实验1-7钾离子和ATP对气孔开度的影响 13
实验1-8气孔运动与K+迁移 15
实验1-9植物伤流液中糖、氨基酸及矿物元素的点滴分析 16
实验1-1蒸腾强度的测定(钴纸法) 19
实验1-2小孔的扩散 19
第二章 矿物营养 19
实验2-1植物的元素缺乏症(溶液培养) 19
Ⅰ 老叶受影响 20
Ⅱ 幼叶受影响 21
实验2-2 单盐毒害及离子间颉颃作用 21
实验2-3 植物对离子的选择性吸收 23
实验2-4 离体根对铵离子的交换吸收 24
实验2-5 氧对小麦离体根吸收钾离子的影响 26
实验2-6 根系体积的测定 27
实验2-7 根系活力的测定 28
Ⅰ α-萘胺氧化法 29
Ⅱ 氯化三苯基四氮唑(TTC)法 30
实验2-8 硝酸还原酶活性的测定 32
Ⅰ 活体法 32
Ⅱ 离体法 33
实验2-9 植物灰分元素的分析鉴定 34
实验2-10 植物组织可挥发性元素的鉴别 36
实验2-11 植株中硝态氮的测定 37
实验2-12 植株磷素的测定(钼蓝法) 39
实验2-13 植株中总铁量的测定 40
Ⅰ 硫氰化物法 40
Ⅱ 邻二氮杂菲(菲绕啉)法 41
实验2-14 微量元素铜的测定 42
实验2-15 细胞内游离Ca2+的测量(流式细胞法) 44
实验2-1 磷酸盐的测定(间隔流动分析仪法) 46
第三章 光合作用 46
实验3-1 叶绿体色素的提取、分离及理化性质的鉴定 46
实验3-2 叶绿体色素的分离和吸收光谱曲线 48
实验3-3 叶绿素a、b含量测定 50
实验3-4 植物光合强度的测定 52
Ⅰ 改良半叶法 53
Ⅱ 氧电极法 54
Ⅲ 便携式光合测定仪法 55
实验3-5 环境因素对光合作用的影响 57
Ⅰ 叶圆片上浮法 57
Ⅱ 光合测定仪实时测定法 58
实验3-6 离体叶绿体光还原反应(希尔反应) 59
实验3-7 叶绿体偶联因子提取及ATPase活性测定 60
实验3-8 乙醇酸氧化酶活性测定 62
实验3-9 二磷酸核酮糖羧化酶-加氧酶羧化活性的测定 64
实验3-10 二磷酸核酮糖羧化酶-加氧酶的加氧活性的测定 66
Ⅰ 氧电极法 67
Ⅱ 发光光度计法 67
实验3-1 藻类植物光合强度测定 69
实验3-2 环境因素对光合作用的影响(量气法) 69
第四章 呼吸作用 69
实验4-1 植物呼吸强度的测定 69
Ⅰ 简易测定法 69
Ⅱ 小篮子法 70
Ⅲ 呼吸比重瓶法 71
实验4-2 呼吸商的测定 73
实验4-3 呼吸抑制剂对呼吸作用的影响 74
实验4-4 离体线粒体的氧化作用和磷酸化作用 76
实验4-5 丙酮酸激酶活性的测定 79
实验4-6 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定 80
实验4-7 植物组织中几种酶的组化定位鉴定 81
实验4-8 多酚氧化酶活性的测定(氧电极法) 85
实验4-9 过氧化氢酶活性的测定(氧电极法) 86
实验4-10 过氧化物酶活性的测定 88
Ⅰ 比色法 88
Ⅱ化学发光法 89
实验4-1 NADP磷酸酶活性测定 91
第五章 物质代谢 91
实验5-1 糖类含量的测定 91
Ⅰ 可溶性总糖的测定 91
Ⅱ 还原糖的测定 93
Ⅲ 蔗糖、葡萄糖和果糖的测定 95
Ⅳ 淀粉的测定 99
Ⅴ 粗纤维含量的测定 99
实验5-2 糖类代谢酶的测定 100
Ⅰ α-淀粉酶与β-淀粉酶活力的测定 100
Ⅱ 蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶活性的测定 103
实验5-3 油脂过氧化值的测定 104
实验5-4 脂肪水解酶活性的测定 105
实验5-5 蛋白质的提取和测定 107
Ⅰ 蛋白质的提取 107
Ⅱ 微量凯氏定氮法 109
Ⅲ Folin-酚试剂法 111
Ⅳ BCA测定蛋白质 112
Ⅴ 考马斯蓝染料结合法 114
Ⅵ 紫外吸收法 115
实验5-6 转氨酶(GOT、GPT)的提取和测定 116
实验5-7 酰脲含量的测定 118
实验5-8 次生物质含量的测定 120
Ⅰ 总黄酮含量的测定 120
Ⅱ HPLC法测定黄酮苷元含量 121
Ⅲ 茶多酚含量的测定 123
Ⅳ 花青素含量测定 124
Ⅴ 咖啡碱的提取 125
Ⅵ 咖啡碱含量测定(质量法) 127
Ⅶ 总皂苷的粗提及HPLC法测定其中甾体皂苷元含量 128
Ⅷ 挥发油含量及成分分析 131
实验5-1 化学发光法测量脂质过氧化及抗氧化剂 135
实验5-2 化学发光法测定葡萄含量 135
实验5-3 蛋白质特性分析 135
实验5-4 穿心莲总内酯的含量测定 135
第六章 植物激素 135
实验6-1 吲哚乙酸(IAA)的提取、纯化和测定 135
实验6-2 生长素含量测定(小麦芽鞘切段伸长法) 137
实验6-3 吲哚乙酸氧化酶活性的测定 139
实验6-4 赤霉酸(GA3)的生物鉴定(水稻幼苗第二叶叶鞘伸长的“点滴法”) 140
实验6-5 GA3对小麦种子α-淀粉酶的诱导形成 142
实验6-6 酶联免疫法测定脱落酸(ABA)含量 144
实验6-7 细胞分裂素含量测定(萝卜子叶测定法) 146
实验6-8 细胞分裂素对花色素苷积累的影响 147
实验6-9 生长调节剂对黄瓜性别表达的作用 148
实验6-10 生长调节剂对果实发育的影响 149
实验6-11 香石竹的切花保鲜 151
实验6-12 水仙的矮化 152
第七章 生长发育 154
实验7-1 种子生活力的快速测定 154
Ⅰ 氯化三苯四氮唑法(TTC法) 154
Ⅱ 溴麝香草酚蓝法(BTB法) 155
Ⅲ 纸上荧光法 155
实验7-2 种子活力的测定 157
Ⅰ 抗冷法 157
Ⅱ 砂压法 158
Ⅲ 低温法 158
Ⅳ 电导法 159
Ⅴ 加速衰老法 160
实验7-3 人工种子的制备方法 161
实验7-4 细胞生长周期测定(流式细胞法) 162
实验7-5 花粉活力的测定 165
Ⅰ 碘-碘化钾染色测定法 165
Ⅱ 过氧化物酶测定法 165
Ⅲ 氯化三苯四氮唑法(TTC法) 166
实验7-6 花粉管生长的测定 167
实验7-7 谷物种子萌发时淀粉酶的形成(示范) 170
实验7-8 油类种子萌发时脂肪酸含量的变化 171
实验7-9 大豆萌发时氨基酸含量的变化 172
实验7-10 光对植物叶绿体运动的调控作用 173
实验7-11 H+流向与植物生长模式 175
实验7-12 植物开花的光周期诱导 176
Ⅰ 苍耳的光周期诱导 176
Ⅱ 日本青萍6746的光周期诱导 178
实验7-13 球根花卉的花期调节 180
实验7-14 胚珠的离体受精 181
实验7-15 植物的组织培养 183
Ⅰ 愈伤组织的培养和分化 183
Ⅱ 原生质体的分离和培养 185
Ⅲ 离体培养下的花芽分化 186
实验7-16 拟南芥的水培和生长发育观察 187
实验7-1 谷物种子萌发时淀粉酶活性的测定 190
第八章 植物与环境 190
实验8-1 植物的向性运动(示范) 190
实验8-2 高温和低温对植物的伤害 191
实验8-3 渗透胁迫与脯氨酸的积累 192
实验8-4 高效液相色谱法测定海藻糖 194
实验8-5 冷胁迫对质膜H+-ATPase活性的影响 195
实验8-6 干旱处理对叶片脂氧合酶活性的影响 197
Ⅰ 分光光度法 197
Ⅱ 氧电极法 198
实验8-7 盐胁迫蛋白的检测 199
实验8-8 超氧化物歧化酶活性的测定 202
Ⅰ 比色法 202
Ⅱ 邻苯三酚自氧化法 203
实验8-9 植物组织中活性氧含量的测定与定位分析 205
Ⅰ H2O2的组织原位定位分析(DAB染色法) 205
Ⅱ 过氧化氢含量的测定 206
Ⅲ 氧自由基产生速率的测定(羟胺法) 208
实验8-10 植物膜脂脂肪酸的分析 209
实验8-11 丙二醛的测定 211
实验8-12 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的测定 214
实验8-13 植物根系分泌物 215
Ⅰ 植物根系分泌物的观察 215
Ⅱ 植物根系分泌的酶 216
实验8-14 土壤中的酶 217
实验8-15 植物组织细胞死亡的分析鉴定 219
Ⅰ 台盼蓝染色法 219
Ⅱ FDA荧光染色法 220
实验8-1 花粉管生长的趋性 222
实验8-2 植物幼苗的超微弱发光 222
实验8-3 β-1,3-葡聚糖酶活性的测定 222
实验8-4 几丁酶活性的测定 222
实验8-5 微微型浮游植物的识别和细胞亚群丰度测定(流式细胞法)实验8-6 浮游植物丰度测定(流式细胞法)实验8-7 氧自由基吸收能力(ORAC)的测定第九章 植物分子生物学 222
实验9-1 根癌农杆菌介导的拟南芥稳定转化 222
实验9-2 根癌农杆菌介导的烟草叶片瞬时转化 223
实验9-3 植物基因组DNA的制备 225
Ⅰ 尿素法制备植物基因组DNA 225
Ⅱ CTAB法制备植物基因组DNA 226
实验9-4 叶绿体DNA的制备 228
实验9-5 植物总RNA的提取 229
Ⅰ LiCl法提取植物总RNA 229
Ⅱ 异硫氰酸胍法提取植物总RNA 230
实验9-6 电泳法鉴定植物基因组DNA和总RNA 232
实验9-7 分光光度计法分析植物基因组DNA和RNA 234
实验9-8 PCR鉴定植物肌动蛋白基因 235
实验9-9 拟南芥抗逆特异基因Rd29A表达水平的半定量和定量分析 236
实验9-10 用GUS与启动子融合表达法检测基因表达 239
实验9-1 非洲菊(Gerberahybida)花瓣CHS基因的表达检测 241
实验9-2 原位杂交 241
实验9-3 TAIL-PCR分析T-DNA的插入旁邻序列 241
第十章 果蔬采后生理 241
实验10-1 果实硬度的测定 241
实验10-2 果蔬可溶性固形物的测定 242
实验10-3 果蔬含酸量的测定 244
实验10-4 果蔬维生素C含量的测定 246
实验10-5 果蔬乙烯释放量的测定(气相色谱法) 247
实验10-6 果蔬ACC含量的测定 250
实验10-7 气相色谱法测定果蔬中的乙醇含量 251
实验10-8 果蔬二氧化碳释放速率的测定(气相色谱法) 253
第二部分 综合性实验 257
实验1 植物在渗透胁迫条件下形态、生理和基因表达方面的适应性变化 257
实验2 热激诱导的玉米幼苗耐热性观察及其可能的生理生化机制 259
实验3 钙信使系统和活性氧对ABA诱导气孔关闭的影响 261
实验4 槐米中芸香苷的提取、纯化与鉴定 263
实验5 植物生长调节剂对植物插条不定根发生的影响 265
实验6 盐胁迫对小麦种子萌发过程的生理影响 267
实验7 盐胁迫对蚕豆种子萌发后第一对真叶的生理影响 269
实验8 蛋白质印迹检测特异性蛋白质 271
实验9 免疫共沉淀检测植物体内蛋白质互作 276
附录 280
附录1 常用酸碱的浓度 280
附录2 常用缓冲溶液的配制 280
附录3 几种常用缓冲剂的pKa 287
附录4 常用酸碱指示剂 287
附录5 泛用酸碱指示剂 288
附录6 离心机转速与相对离心力的换算 288
附录7 提高溶液饱和度时应加入硫酸铵质量的对应关系 289
附录8 不同温度下以空气饱和的水中的氧含量 290
附录9 常用植物激素的一些化学特性 290
附录10 植物组织和细胞培养常用培养基成分 291
附录11 常用培养基附加成分 292