1 基因操纵——个全面涵盖的技术 1
前言 1
序列分析 1
细胞内的生物化学 2
新医学 3
生化科技：新兴的工业 4
大肠杆菌的中心角色 6
本书的其他摘要 6
2 基本技巧 9
前言 9
基本问题 9
解决方法：基本技巧 9
琼脂糖电泳 10
核酸点渍法 12
大肠杆菌的转形 19
聚合酶连锁反应 21
3 DNA分子的截段及接合 29
DNA分子的截段 29
接合DNA分子 39
4 质粒及噬菌体载体的基本生物学 49
质粒生物学及简单的质粒载体 49
质粒DNA的纯化作用 54
质粒选殖工具的适宜特性 56
细菌噬菌体λ 60
改良的噬菌体-λ载体 65
使用单股DNA载体进行DNA选殖 69
5 黏接质体，Phasmids，及其他先进的载体 73
前言 73
选殖大DNA片段的载体 73
专门性目的的载体 79
全部放在一起：具多重特性的载体 94
6 基因选殖策略 97
前言 97
组基因DNA的选殖 98
互补DNA的选殖 106
筛选方法 118
差异选殖 135
7 序列鉴定及诱变作用 143
前言 143
基本的DNA序列鉴定 143
完整基因组的序列鉴定 149
序列资料的分析 150
改变基因：作用点-引导的诱变作用 156
8 非大肠菌之细菌选殖 165
前言 165
细菌细胞之DNA引入 165
于非大肠杆菌之革兰氏阴性菌中之复制 170
革兰氏阳性菌之选殖 174
同生态重组 183
9 酿酒酵母及其他真菌之选殖 185
前言 185
DNA引入霉菌后之命运 186
使用于真菌中之质体载体 187
类-逆转录酶病毒载体 189
选殖基因之表现 193
真菌中蛋白质的过度表现 195
特殊载体 195
酵母菌之表面展示 199
带有特殊细胞活性基因的确认 200
决定功能的特殊基因 202
10 基因殖入动物细胞 205
前言 205
DNA媒介基因转入法 206
利用病毒性基因导入殖入基因 225
用于动物细胞的表现载体系统的总结 241
11 动物的基因操作 245
前言 245
哺乳动物的基因操作 246
其他脊椎动物的基因转殖 262
其他无脊椎动物的基因转殖 267
12 植物的基因转移 273
前言 273
植物肿瘤菌媒介的转基因 277
DNA直接移植植物 292
植物转形法 294
叶绿体基因转移法 295
植物病毒型之载体 296
13 基因转殖技术之进展 303
前言 303
诱导性基因表达系统 303
定点式重组基因之应用 310
更多的基因抑制策略 317
转殖技术应用在功能性基因体 324
14 重组DNA技术的应用 333
前言 333
主题1：核酸的顺序当做是诊断的工具 333
主题二：遗传性疾病的新药品和新疗法 342
主题三：对抗传染性疾病 352
主题四：蛋白质工程 360
主题五：代谢工程 364
主题六：21世纪的植物繁衍 372
结语：从基因到基因型 381
参考文献 383
索引 441