1 SOD的发现和研究进展 1
1.1 SOD的发现 1
1.2 SOD的研究现状 2
1.2.1 SOD的理论研究 2
1.2.2 SOD的药用研究 3
1.2.3 SOD的应用研究 4
1.2.4 rh SOD分子生物学研究的进展及问题 4
参考文献 7
2 SOD的种类与分布 8
2.1 概述 8
2.2 微生物中SOD的种类与分布 9
2.2.1 SOD在原核微生物中的种类与分布 9
2.2.2 SOD在真核微生物中的种类与分布 9
2.2.3 SOD在藻类生物中的分布 10
2.3 植物SOD的种类与分布 10
2.3.1 植物SOD的种类与分布 10
2.3.2 植物SOD在抗逆中的作用 11
2.4 动物SOD的种类与分布 12
2.4.1 人SOD的种类与分布 12
2.4.2 SOD在动物组织及器官中的分布 13
参考文献 14
3 SOD的分子结构 16
3.1 SOD分子的一级结构 16
3.1.1 Cu,Zn-SOD的氨基酸组成及一级结构 16
3.1.2 Mn-SOD的一级结构 16
3.2 SOD分子的高级结构 17
3.2.1 Cu,Zn-SOD分子的高级结构 17
3.2.2 Mn-SOD分子的高级结构 20
3.3 SOD的活性中心 22
3.3.1 Cu,Zn-SOD的活性中心及其催化机理 22
3.3.2 EC-SOD的活性中心 30
3.3.3 Mn-SOD的活性中心 30
参考文献 32
4 SOD的理化特点 35
4.1 SOD全酶的相对分子质量及亚基相对分子质量 35
4.1.1 Cu,Zn-SOD的相对分子质量、亚基数及铜锌含量 35
4.1.2 Mn-SOD的相对分子质量及亚基相对分子质量 36
4.1.3 Fe-SOD的相对分子质量及亚基的相对分子质量 37
4.2 SOD的氨基酸组成及特点 38
4.2.1 Cu,Zn-SOD的氨基酸组成及特点 38
4.2.2 Mn-SOD的氨基酸组成及特点 41
4.2.3 Fe-SOD的氨基酸组成及特点 41
4.2.4 EC-SOD的氨基酸组成及特点 43
4.3 金属辅基与酶活性 43
4.4 SOD的电泳性质 45
4.5 SOD的光谱性质 46
4.5.1 Cu,Zn-SOD的吸收光谱 46
4.5.2 Mn-SOD的吸收光谱 47
4.5.3 Fe-SOD的吸收光谱 49
4.6 电子顺磁共振(EPR)波谱 50
4.7 SOD的稳定性 51
4.7.1 变性剂和还原剂 51
4.7.2 SOD的热稳定性 52
4.7.3 SOD的pH稳定性 53
4.8 SOD的特殊反应 54
4.8.1 对氰化物的敏感性 54
4.8.2 SOD对H2O2的敏感性 54
4.8.3 氯仿-乙醇对SOD活性的影响 54
4.9 SOD的活性保护与失活作用 54
4.9.1 糖类对SOD活性的保护 55
4.9.2 有机酸对SOD活性的影响 55
4.9.3 还原剂对Cu,Zn-SOD的失活和还原作用 55
4.9.4 SOD与电离辐射 56
4.9.5 金属螯合作用 56
参考文献 56
5 SOD的分子生物学 58
5.1 Cu,Zn-SOD的分子生物学 58
5.1.1 Cu,Zn-SOD的基因特征 58
5.1.2 Cu,Zn-SOD表达的调控 62
5.1.3 Cu,Zn-SOD基因的克隆与表达 64
5.1.4 不同细胞定位的Cu,Zn-SOD基因结构差异 66
5.1.5 植物SOD基因的组织特异性表达 66
5.2 Mn-SOD的分子生物学 67
5.2.1 人Mn-SOD的分子生物学特性 67
5.2.2 Mn-SOD表达的调控 69
5.2.3 人Mn-SOD启动子的突变导致人Mn-SOD在癌细胞中表达减少 70
5.2.4 hMn-SOD基因的克隆与表达 75
5.2.5 心脏缺血再灌流中,通过氧化还原信号传递将死亡信号转变成生存信号 76
参考文献 80
6 SOD的化学修饰 82
6.1 设计酶化学修饰的注意点 82
6.2 酶化学修饰方法的选择 83
6.2.1 修饰反应专一性的控制 83
6.2.2 修饰程度和修饰部位的测定 85
6.2.3 化学修饰反应条件的控制 85
6.3 对SOD特殊氨基酸残基侧链基团的化学修饰 86
6.3.1 对精氨酸残基的修饰 86
6.3.2 对组氨酸残基的修饰 87
6.3.3 对半胱氨酸残基的修饰 87
6.4 对SOD非活性部位的赖氨酸残基的修饰 87
6.4.1 PEG对SOD的修饰 87
6.4.2 多糖类物质对SOD的化学修饰 90
6.4.3 聚烯属烃基氧化物对SOD的化学修饰 90
6.5 SOD化学修饰实例 92
6.5.1 PEG修饰SOD 92
6.5.2 低分子肝素(LMWH)修饰SOD 92
6.5.3 牛血清白蛋白修饰SOD 92
6.5.4 棕榈酸修饰SOD 93
6.5.5 右旋糖酐对SOD的化学修饰 93
6.5.6 β-环糊精对SOD的化学修饰 93
6.6 修饰SOD的性质 94
6.6.1 在血液中的半衰期 94
6.6.2 修饰SOD的免疫原性 94
6.6.3 修饰SOD的抗炎活性 95
6.6.4 修饰SOD的膜通透能力 95
6.6.5 修饰SOD体内分布的改变 95
6.6.6 修饰SOD理化性质的改变 96
6.7 超氧化物歧化酶化学修饰的展望 96
参考文献 96
7 SOD与氧自由基 99
7.1 氧自由基的特性 99
7.1.1 自由基的性质 99
7.1.2 超氧阴离子自由基(O?) 100
7.1.3 羟基自由基(·OH) 102
7.1.4 NO自由基 103
7.1.5 过氧化氢 105
7.1.6 脂质过氧化 106
7.2 SOD与氧自由基的关系 110
7.2.1 SOD与自由基 110
7.2.2 氧自由基的相互作用 111
7.2.3 NO、O?与SOD的关系 113
7.3 自由基生物学 117
7.3.1 氧自由基在生物体内的作用 118
7.3.2 生物体内自由基的产生与清除 119
参考文献 129
8 SOD的药理与毒理活性 131
8.1 概述 131
8.2 SOD的抗辐射作用 132
8.2.1 放射损伤及其分类 132
8.2.2 放射损伤的机制 134
8.2.3 SOD对放射损伤的防护作用及其机制 136
8.3 SOD与糖尿病的慢性并发症 137
8.3.1 糖尿病的慢性并发症(DCC) 137
8.3.2 氧化应激与DCC 138
8.3.3 Mn-SOD与DCC的关系 138
8.4 SOD与肺病 140
8.4.1 氧化应激与肺病 140
8.4.2 肺组织中的SOD 140
8.4.3 EC-SOD与肺病 141
8.5 SOD的抗炎作用 142
8.5.1 炎症 142
8.5.2 自由基与炎症 142
8.5.3 SOD的抗炎作用 143
8.6 SOD在缺血再灌流损伤中的作用 144
8.6.1 缺血再灌流与氧化应激 144
8.6.2 SOD与缺血再灌流 146
8.7 SOD在心血管疾病中的作用 147
8.7.1 心血管疾病的病理生理学 147
8.7.2 氧自由基与CVD 149
8.7.3 SOD与CVD 150
8.8 SOD在脑组织中的调控作用 150
8.9 SOD对肿瘤的作用 150
8.9.1 自由基与肿瘤 150
8.9.2 SOD与肿瘤 151
8.10 抗衰老及其他 151
8.10.1 SOD抗衰老的作用 151
8.10.2 SOD的其他药理活性 152
8.11 SOD的毒理研究 153
参考文献 154
9 类SOD的结构与功能 157
9.1 类SOD的来源及其简易判别法 157
9.2 含SOD和类SOD的植物资源 157
9.3 天然类SOD活性化合物 158
9.3.1 大分子类SOD活性化合物 158
9.3.2 小分子类SOD活性化合物 159
9.4 海洋生物抗氧剂的研究与开发 160
9.4.1 大分子自由基清除剂 160
9.4.2 小分子天然抗氧剂 162
9.5 类SOD的活性测定 163
参考文献 163
10 抗氧酶与天然抗氧剂 165
10.1 生物体内的重要抗氧酶 165
10.1.1 超氧化物歧化酶(SOD) 165
10.1.2 过氧化氢酶和过氧化物酶 166
10.1.3 谷胱甘肽过氧化物酶 168
10.1.4 谷胱甘肽转硫酶 171
10.1.5 其他过氧化物酶 173
10.1.6 过氧化氢酶与谷胱甘肽过氧化物酶的协同作用 175
10.2 天然抗氧剂 175
10.2.1 天然抗氧剂的分类 176
10.2.2 重要的天然抗氧剂 176
10.3 超氧化物还原酶(SOR) 183
10.3.1 SOR的分子结构 183
10.3.2 SOR催化作用的特点 185
10.3.3 SOR催化作用的机制 186
10.3.4 SOR的生物学意义 186
参考文献 186
11 SOD活性的测定 189
11.1 直接法与间接法 189
11.1.1 直接法 189
11.1.2 间接法 190
11.2 最常用的SOD测活方法 190
11.2.1 黄嘌呤氧化酶-细胞色素c法(McCord法) 191
11.2.2 经典连苯三酚自氧化法(改良Marklund法) 192
11.2.3 微量连苯三酚法(325 nm法) 193
11.2.4 黄嘌呤氧化酶-NBT还原法 194
11.2.5 化学发光法 195
11.3 SOD活性的一般测活方法 197
11.3.1 MTT法 197
11.3.2 亚硝酸盐法 198
11.3.3 肾上腺素自氧化法 199
11.3.4 极谱氧电极法 200
11.3.5 羟多巴胺法 202
11.3.6 免疫学方法 203
11.3.7 电泳法 205
11.4 Cu,Zn-SOD、Mn-SOD和Fe-SOD的鉴别与活性测定 206
11.4.1 Mn-SOD和Cu,Zn-SOD的鉴别 206
11.4.2 Fe-SOD活性测定 208
11.5 SOD测活方法的比较 208
11.5.1 SOD三种测活方法的比较 209
11.5.2 建议在SOD测活方法中采用参照品方法 211
参考文献 212
12 SOD纯度的鉴定 215
12.1 根据SOD的比活鉴定 215
12.2 根据SOD的均一性鉴定 216
12.2.1 电泳分析法 216
12.2.2 高效凝胶色谱分析法 222
12.2.3 超速离心法 223
12.3 根据SOD某些特殊理化性质的鉴别法 224
12.3.1 根据金属离子含量的分析法 225
12.3.2 根据最大紫外吸收鉴别法 225
12.3.3 根据相对分子质量鉴别法 225
12.3.4 根据SOD的构象融点温度鉴别法 226
12.3.5 末端分析法 227
参考文献 231
13 SOD的制备技术 232
13.1 SOD分离纯化的一般原则 232
13.1.1 建立一个可靠和快速的测活方法 232
13.1.2 SOD原料的选择 232
13.1.3 SOD提取方法的选择 233
13.1.4 SOD纯化方法的选择 235
13.2 SOD分离纯化中的关键技术 247
13.2.1 SOD原料的预处理 249
13.2.2 SOD层析技术的选择 251
13.2.3 超滤技术 252
13.2.4 变复性技术 252
13.3 SOD的制备技术(实例) 253
13.3.1 动物血SOD的制备技术 254
13.3.2 动物肝Mn-SOD的制备方法 255
13.3.3 植物SOD的制备方法 255
13.3.4 微生物SOD的制备技术 257
13.3.5 基因重组人SOD的制备技术 258
参考文献 263
14 SOD在医药上的应用研究 267
14.1 SOD与疾病 267
14.1.1 SOD与辐射防护 267
14.1.2 SOD与自身免疫性疾病 271
14.1.3 SOD与心血管疾病 273
14.1.4 SOD与缺血再灌流 274
14.1.5 SOD与肿瘤 275
14.2 SOD临床应用的最新动态 278
14.2.1 动脉粥样硬化 278
14.2.2 糖尿病 279
14.2.3 慢性阻塞性肺疾病 280
14.2.4 关节病 281
14.2.5 肌萎缩性侧索硬化症 282
14.2.6 佩罗尼病 282
14.2.7 SOD在眼疾防治上的应用 282
14.2.8 现代病的预防与治疗 283
14.2.9 呼吸窘迫综合征的早产儿 284
14.3 我国药用SOD的研究与进展 284
14.3.1 化学部分 285
14.3.2 药理、毒理部分 287
14.3.3 SOD的药代动力学 289
14.3.4 生物利用度研究 289
14.3.5 临床试验 290
参考文献 291
15 SOD在工业上的应用 293
15.1 SOD在食品工业上的应用 293
15.1.1 SOD在食品中的存在形式 293
15.1.2 SOD的抗氧化作用 294
15.1.3 SOD口服有效性的研究 294
15.1.4 提高蛋白质(酶)及肽类药物生物利用度的方法 299
15.2 SOD在日化工业上的应用 301
15.2.1 SOD在护肤品上的应用 302
15.2.2 SOD对牙齿、口腔的保健作用 310
参考文献 311
16 SOD在农业上的应用 313
16.1 活性氧在植物细胞中的作用 313
16.1.1 活性氧对植物细胞的损伤作用(弊) 313
16.1.2 活性氧的积极作用(利) 314
16.2 抗氧酶与植物抗逆性的关系 314
16.2.1 SOD与植物抗逆性的关系 314
16.2.2 过氧化氢酶(CAT)与植物抗逆性的关系 315
16.2.3 谷胱甘肽还原酶(GR) 315
16.2.4 抗坏血酸过氧化物酶(APx) 315
16.3 转SOD基因对农作物的抗逆研究 316
16.3.1 转SOD基因对作物抗旱、抗盐等逆境的研究 317
16.3.2 转SOD基因对作物抗高温逆境的研究 318
16.3.3 转SOD基因对作物冷害逆境的研究 318
16.3.4 转SOD基因对作物早衰的研究 318
16.3.5 转SOD基因对作物抗病害逆境的研究 319
16.3.6 转SOD基因稳定性 319
16.4 动植物转SOD基因的制备方法 320
16.4.1 转基因动物SOD的制备方法 320
16.4.2 转基因植物SOD的制备方法 321
16.5 SOD在果蔬上的应用 321
16.5.1 发展类SOD水果的原动力 321
16.5.2 类SOD水果的微生态学基础 322
16.5.3 类SOD水果及其功能 322
16.5.4 我国类SOD水果的生产现状 323
16.6 SOD在农业上的应用前景 323
参考文献 325
附录 本书英文缩写一览表 328